Αν τα παρακάτω δεδομένα του Dr Ardis, της Βασούλας και της Σουφλή είναι αληθινά σταματά το μυαλό του ανθρώπου με τις μεθοδείες του Σατανάείναι αληθινά

Το βίντεο που αποκαλύπτει ΦΡΙΚΤΕΣ ΑΛΗΘΕΙΕΣ και πρέπει να δουν όλοι. Η ΠΑΝΔΗΜΙΑ ΤΟΥ ΠΑΠΙΚΟΥ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟΥ – ΤΑ ΕΡΠΕΤΑ ΕΠΙΣΤΡΑΤΕΥΟΥΝ ΤΑ ΕΡΠΕΤΑ ΚΑΤΑ ΤΗΣ ΑΝΘΡΩΠΟΤΗΤΑΣ!!! Τα ερπετά κήρυξαν σ’ολάκερη την ανθρωπότητα στον πλανήτη, ανηλεή πόλεμο…

26 Απριλίου, 2022 36 Από Καλλιόπη Σουφλή
Μοίρασέ το

Βγήκε στο φως πληροφορία και ανάλυση για το πώς εμπλέκεται (και πώς δημιουργήθηκε) ο κόβιντ με τα ιοβόλα φίδια σε πρώτο πλάνο, και τι συνεπάγεται για την ανθρωπότητα (πολυεπίπεδα) αυτή η ιστορια που έχει ήδη σκοτώσει εκατοντάδες χιλιάδες (αν όχι εκατομμύρια) μέσω των ενεσεων αλλά και με τα πρωτόκολλα αγωγής και “θεραπείας” γι’αυτούς που είχαν ή θα έχουν την ατυχία να μπουν σε ΜΕΘ κόβιντ…

Ένα βίντεο που πραγματικά δεν πρέπει να προσπεράσει ΚΑΝΕΙΣ.

 

Ίσως είναι ένα από τα δέκα κορυφαία βίντεο που είδαν ποτέ το φως της δημοσιότητας…

Ίσως το κορυφαίο στο θέμα που αφορά στον κορονοϊό…

Μπορεί οι λέξεις “οι αποκαλύψεις ξεπερνούν και την πιο νοσηρή φαντασία” να μοιάζουν πολυσυνηθισμένες, αλλά κατά την άποψή μου τα όσα θα ακούσετε και θα δείτε στο βίντεο που ακολουθεί, δίνουν την πραγματική εικόνα μιας πραγματικότητας, που παραπέμπει στον πλέον σκοτεινό εφιάλτη…

Μια σατανική σκευωρία σε βάρος όλης της ανθρωπότητας, που μόνο διαβολικά μυαλά μπορούσαν να σκεφθούν και να υλοποιήσουν…

Μια ΠΑΓΚΟΣΜΙΑ ΓΕΝΟΚΤΟΝΙΑ, με ΤΟ ΣΗΜΑΔΙ ΤΟΥ ΔΙΑΒΟΛΟΥ, στην κυριολεξία.

Δεν είναι σχήμα λόγου… θα το διαπιστώσετε δυστυχώς, βλέποντας το βίντεο.

Οι αποκαλύψεις του ΙΑΤΡΟΥ Δρ. Άρντις, δεν ρίχνουν μόνο το σκοτεινό παρασκήνιο της ψευτοπανδημίας, αλλά βγάζουν στην δημοσιότητα ΤΟ ΣΑΤΑΝΙΚΟ ΣΧΕΔΙΟ ΥΒΡΙΔΟΠΟΙΗΣΗΣ ΤΩΝ ΑΝΘΡΩΠΩΝ, ΑΠΟ ΕΝΑ ΕΜΒΟΛΙΟ, ΠΟΥ ΕΧΕΙ ΜΕΣΑ ΤΟΥ ΤΟ ΙΔΙΟ ΤΟ ΥΠΕΡΤΑΤΟ ΚΑΚΟ.

Πριν προχωρήσω σε μια περίληψη των όσων θα ακούσετε στο συγκλονιστικό βίντεο που ακολουθεί, θέλω να ευχαριστήσω δημόσια την Βασούλα και τον Nioland, για την μετάφραση και την δημοσιοποίηση, γιατί η συνεισφορά τους στην αφύπνιση και στην ενημέρωσή μας, είναι τεράστια και ανεκτίμητη.

Ας πάρουμε τα πράγματα από την αρχή…

Η ψευτοπανδημία του κορονοϊού, είναι ένα σχέδιο που εκπονήθηκε δεκαετίες πριν, και έχει την ρίζα του, στην ίδια την Θρησκεία, κυρίως του Χριστιανισμού.

ΠΟΙΟΣ ΗΤΑΝ ΕΞ ΑΡΧΗΣ ΤΗΣ ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑΣ ΤΟΥ ΑΝΘΡΩΠΟΥ ΑΠΟ ΤΟΝ ΘΕΟ, Ο ΜΕΓΑΛΥΤΕΡΟΣ ΕΧΘΡΟΣ;

ΤΑ ΕΡΠΕΤΑ και πιο συγκεκριμένα, ΤΟ ΦΙΔΙ…

Όλη η “πανδημία” στήθηκε από μια κλίκα σατανιστών, πάνω σ’ αυτό… θα το καταλάβετε στη συνέχεια, από τις αποκαλύψεις του Ιατρού Δρ. Άρντις…

Πολιτικές ηγεσίες, Παγκόσμιοι Οργανισμοί, Φαρμακοβιομηχανίες,  Κρατικοί Φορείς, Δημοσιογράφοι, Εκκλησιαστικοί Ηγέτες, Αμερικανικά Πανεπιστήμια και μια πλειάδα χιλιάδων διαπλεκόμενων γιατρών, συνεργάστηκαν για χρόνια πάνω σε ένα σχέδιο που όμοιό του δεν υπήρξε ποτέ άλλοτε…

Όλα ήταν φανερά και μπροστά μας… όλα μας τα είπαν μέσα από ταινίες του Χόλιγουντ, που δεκαετίες τώρα είναι το μέσον να μας προϊδεάζουν γι αυτά που θα κάνουν…

Η πρώτη βόμβα, και χωρίς εισαγωγικά, πέφτει από τα πρώτα λεπτά του βίντεο με την δήλωση του γιατρού Άρντις, ο οποίος εξηγεί πως έφτασε στην άποψη, αλλά και στην επιβεβαίωση πως τα εμβόλια του κορονοϊού, περιέχουν ΔΗΛΗΤΗΡΙΑ ΦΙΔΙΩΝ και σήκωσε την κουρτίνα του σατανικού σχεδίου.

Η αναφορά του με στοιχεία, όχι μόνο για την απουσία χρήσης μονοκλωνικών αντίδοτων στην “ασθένεια”,  αλλά και η χρήση του REMDESIVIR, ενός ΑΝΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΙΚΟΥ, ΤΟΞΙΚΟΥ ΚΑΙ ΘΑΝΑΤΗΦΟΡΟΥ ΦΑΡΜΑΚΟΥ που είναι Ο ΔΟΛΟΦΟΝΟΣ ΑΘΩΩΝ ΑΝΘΡΩΠΩΝ…

Οι αποκαλύψεις του δόκτορα Άρντις, διαδέχονται η μια την άλλη και κυριολεκτικά παγώνουν το αίμα.

Τον Ιανουάριο του 2020, το FDA  (Αμερικανικός Οργανισμός Φαρμάκων), αποφάσισε να κυκλοφορήσει και εκτός νοσοκομείων το REMDESIVIR, ως το μόνο φάρμακο για τα νεογνά στις ΗΠΑ, αλλά και μέχρι την ηλικία των 18 ετών, να δύναται να χορηγηθεί…

Αντί για τα μονοκλωνικά δηλαδή, να χορηγείται ένα φάρμακο ενδοφλέβιο, λίαν ΤΟΞΙΚΟ ΚΑΙ ΘΑΝΑΤΗΦΟΡΟ σε όποιον έχει… κορονοϊο… δηλαδή, COVID!!!

“Καταδικάζουν τα μονοκλωνικά, επειδή είναι τα μόνα που είναι αντίδοτο στον covid. Εξ αρχής δεν ήθελαν να πάρετε υδροξυχλωροκίνη, ιβερμεκτίνη και το N-acetylcystein… δηλαδή, να αποφεύγετε αυτά που κάνουν δουλειά.

ΕΣΚΕΜΜΕΝΑ ΔΕΝ ΘΕΛΟΥΝ ΝΑ ΑΝΑΡΡΩΣΕΙ Ο ΚΟΣΜΟΣ”, λέει ο δόκτορ Άρντις…

Στην συνέχεια, κάνει λόγο για την προπαγάνδα και την παραπληροφόρηση όλων των ΜΜΕ παγκοσμίως και εξηγεί πως λειτουργεί αυτή, σε συνδυασμό με τους υποστηρικτές του ψεύδους… (fack checkers), που παραπλανούν και αποπροσανατολίζουν το κοινό.

“Θεέ μου δεν μπορούσα να το πιστέψω…από την αρχή υπήρχαν πληροφορίες σ’ όλη την google, πως ο κορονοϊός μπορούσε να έχει προέλθει  από νυχτερίδες, φίδια ή μυρμηγκοφάγους… κι όποτε υπήρχαν αναφορές για φίδια, επενέβαιναν οι fack checkers και το γυρνούσαν στις νυχτερίδες. Κι όμως, τον Ιανουάριο του 2020, υπήρξαν δημοσιεύματα πως δεν μπορεί να προέρχεται από τις νυχτερίδες, γιατί αυτές πέφτουν σε χειμερία νάρκη τον χειμώνα…

Όταν έκαναν γενετικές αλληλουχίες από τα αντισώματα σ’ αυτούς που αρρώστησαν στην Γιουχάν, βρήκαν ότι η γενετική αλληλουχία, δεν ήταν σαν των νυχτερίδων, αλλά σαν των δυο συγκεκριμένων φιδιών… ήταν πρωτεΐνες από το φίδι KRAIT της Κίνας και την ΒΑΣΙΛΙΚΗ ΚΟΜΠΡΑ.

Ιατρική έρευνα  από τον Απρίλιο του 2020 αποκάλυψε πως οι υποδοχείς στον εγκέφαλο των ασθενών,  που λέγονται νικοτινικοί υποδοχείς ακετυλοχολίνης, συνδέονται πολύ στενά με το δηλητήριο των δυο φιδιών και ότι η πρωτεΐνη ακίδας από τον SARS COVID 2, είναι πανομοιότυπος με το δηλητήριο του KRAIT  και της ΒΑΣΙΛΙΚΗΣ ΚΟΜΠΡΑΣ!!!”

Ο Dr. ARNTIS, αναφέρεται και στην επαφή που είχε με γιατρό στο Πανεπιστήμιο του Πίτσμπουργκ, ο οποίος ανέλυε γενετικές αλληλουχίες πρωτεϊνών ακίδας, προσπαθώντας να λύσει το μυστήριο των θυμάτων SARS COV-2, και ο οποίος σκόπευε να ανακοινώσει τις έρευνές του, αλλά… ΔΟΛΟΦΟΝΗΘΗΚΕ!!!

Στην συνέχεια, ο dr. Ardis, συνεχίζει τις σοβαρές αποκαλύψεις του, για τις έρευνες που έχει κάνει, ενώνοντας κομμάτια του παζλ αυτού του σατανικού σχεδιασμού, που πραγματικά συγκλονίζουν και ανεβάζουν  την αγωνία σε όλα δηλώνει στον ανεξάρτητο δημοσιογράφο  Stew Peters…

Τα όσα αποκαλύπτει για τον ρόλο του φαρμάκου – ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ, του REMDESIVIR,  στους ασθενείς, παγώνουν το αίμα…

“ΕΙΝΑΙ ΣΑΝ ΝΑ ΠΕΡΝΑΕΙ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΑΠΟ ΤΟ ΣΩΜΑ.

ΕΡΕΥΝΗΤΕΣ, ΕΝΤΟΠΙΖΟΥΝ ΜΗΧΑΝΙΣΜΟ ΠΟΥ ΟΔΗΓΕΙ ΤΟΥΣ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ COVID ΣΤΟΝ ΘΑΝΑΤΟ.ΤΙ ΣΧΕΣΗ ΕΧΕΙ Ο ΚΡΟΤΑΛΙΑΣ ΜΕ ΤΟΝ ΘΑΝΑΤΟ ΑΠΟ COVID;;;”, λέει στο βίντεο…

“ΕΙΜΑΙ ΠΕΠΕΙΣΜΕΝΟΣ ΟΤΙ Ο COVID, ΔΕΝ ΕΙΝΑΙ ΙΟΣ ΤΟΥ ΑΝΑΠΝΕΥΣΤΙΚΟΥ. ΕΙΝΑΙ ΔΗΛΗΤΗΡΙΑΣΗ ΜΕ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΦΙΔΙΟΥ!!!”,  δηλώνει ο γιατρός… και συνεχίζει:

“Είναι το πιο πρωταρχικό απ’ όλα τα ΒΙΟΛΟΓΙΚΑ ΟΠΛΑ, ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΤΟΥ ΦΙΔΙΟΥ.

ΕΙΝΑΙ ΟΤΙ ΠΙΟ ΣΑΤΑΝΙΚΟ ΕΧΩ ΔΕΙ ΣΤΗ ΖΩΗ ΜΟΥ”…

Και ρίχνει την επόμενη … ΠΥΡΗΝΙΚΗ ΒΟΜΒΑ, στην συνέντευξη που δίνει στον διάσημο ανεξάρτητο δημοσιογράφο Stew Peters…:

“Μπορείς να σκεφθείς ότι το μεγαλύτερο σύμβολο του Κακού στον Χριστιανισμό, είναι ΤΟ ΕΡΠΕΤΟ;;;

Φαντάζεσαι κάτι πιο σατανικό, από την δηλητηρίαση όλου του κόσμου, με δηλητήριο φιδιού;;;

Να το χορηγείς ενδοφλέβια και να χρησιμοποιείς τεχνολογία mRNA, που απομόνωναν  από το δηλητήριο  φιδιού για χρόνια;

Το 2015, πήραν mRNA από το δηλητήριο της κόμπρας , το τύλιξαν σε υδρογέλη νανοσωματιδίων (πρόκειται για την νέα γενιά εμβολίων γενικώς) και το έκαναν ακόμα πιο σταθερό, προσθέτοντας dynabeats στην υδρογέλη νανοσωματιδίων, περιβάλλοντας το mRNA ΤΟΥ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟΥ ΦΙΔΙΟΥ, ΓΙΑ ΝΑ ΑΝΤΕΧΕΙ ΣΤΑ ΚΥΤΤΑΡΑ ΣΟΥ;;;

Ξέρεις τι είναι το dynabeats;;;

ΜΕΤΑΛΛΙΚΑ ΜΑΓΝΗΤΙΚΑ ΝΑΝΟΣΩΜΑΤΙΔΙΑ!!!”

Για ένα λεπτό… για να βάλουμε τη μνήμη μας να δουλέψει, σε όσα αποκαλύπτει ο dr. ARDIS…

ΠΟΙΟΣ ΕΙΝΑΙ Ο ΕΦΕΥΡΕΤΗΣ ΤΩΝ mRNA ΕΜΒΟΛΙΩΝ;;;

Μα ο dr. MALONE…

Και δεν έχει ιδέα, για την χρήση του mRNA σε συνδυασμό με τα φίδια;;;

ΤΙ ΜΑΣ ΚΡΥΒΕΙ Ο ΕΝ ΛΟΓΩ ΕΦΕΥΡΕΤΗΣ, που αν και …λαλίστατος, για την επικινδυνότητα των εμβολίων του κορονοϊού, δεν λέει λέξη απ’ όσα αποκαλύπτει ο Dr. ARDIS;;;

ΓΙΑΤΙ ΣΙΩΠΑ;;;

Στην συνέχεια,στο παρακάτω βίντεο, θα δείτε ένα μικρό απόσπασμα από το αμερικάνικο σήριαλ του 2014, με τίτλο “BLACK LIST”, όπου ο πρωταγωνιστής ψάχνει το αντίδοτο σε ένα δηλητήριο που του έχουν ρίξει… και στην ταινία, γίνεται αναφορά στο φίδι KRAIT, που ανέφερε ο dr. ARDIS, πιο πάνω…

ΜΑΣ ΤΑ ΑΠΟΚΑΛΥΠΤΟΥΝ ΟΛΑ, ΠΟΛΛΑ ΧΡΟΝΙΑ ΠΡΙΝ, ΟΙ ΑΟΡΑΤΟΙ ΜΑΡΙΟΝΕΤΙΣΤΕΣ… ΑΛΛΑ ΕΜΕΙΣ ΝΟΜΙΖΟΥΜΕ ΠΩΣ ΒΛΕΠΟΥΜΕ ΤΑΙΝΙΑ…

Συνεχίζω και περνάω στο κομμάτι εκείνο του βίντεο, που γίνεται αναφορά στο… ΝΕΡΟ ΚΑΙ ΣΤΟ  ΙΙΚΟ ΦΟΡΤΙΟ ΤΩΝ ΛΥΜΑΤΩΝ…

Θυμάστε που η κυβέρνηση του Μητσοτάκη με τον ανεκδιήγητο Χαρδαλιά, έκλειναν τις πόλεις τη μια μετά την άλλη, λόγω … αύξησης ιικού φορτίου στα λήματα;;;

ΣΟΚ!!! ΤΙ ΕΡΙΧΝΑΝ ΣΤΟ ΝΕΡΟ;;;

ΜΙΛΑΜΕ ΓΙΑ ΑΔΙΣΤΑΚΤΟΥΣ ΔΟΛΟΦΟΝΟΥΣ!!!

“Χρησιμοποιούν την ΥΔΡΕΥΣΗ, για να στοχεύουν συγκεκριμένες ομάδες.”!!!, λέει ο dr. Ardis…

Η συνέχεια, είναι ακόμα πιο εκπληκτική και έχει σχέση με τους καπνίζοντες, που είναι και το μικρότερο ποσοστό που ασθένησαν παγκοσμίως από τον covid…

Γιατί άραγε και πως το είχαν προβλέψει και αυτό ΟΙ ΣΑΤΑΝΙΣΤΕΣ;;;

Θα σας γυρίσω πίσω στο 2019…

Ποιός ήταν ο πρώτος νόμος που ψήφισε η ΣΑΤΑΝΙΚΗ ΠΟΛΙΤΙΚΗ ΣΥΜΜΟΡΙΑ ΤΟΥ ΜΗΤΣΟΤΑΚΗ;;;

Ο ΑΝΤΙΚΑΠΝΙΣΤΙΚΟΣ ΝΟΜΟΣ!!!

ΓΙΑΤΙ ΑΡΑΓΕ;

Οι απαντήσεις στο βίντεο που ακολουθεί, θα σας συγκλονίσουν…

Ιδιαίτερη αναφορά κάνει ο dr. ARDIS, στις διασωληνώσεις και τα ΠΡΩΤΟΚΟΛΛΑ ΤΟΥ ΘΑΝΑΤΟΥ, ΠΟΥ ΕΚΤΕΛΟΥΝΤΑΙ ΑΠΟ ΤΟΥΣ ΓΙΑΤΡΟΥΣ.

Και πάλι εδώ το ΦΑΡΜΑΚΟ-ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ το REMDESEVIR, που στην ουσία πρόκειται για το ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΤΗΣ ΚΟΜΠΡΑΣ, το οποίο προσκολλάται στους υποδοχείς νικοτίνης στον εγκέφαλο, μειώνει το οξυγόνο, καταστρέφει τους πνεύμονες των ασθενών…

Η αποκάλυψη του dr. ARDIS, παγώνει το αίμα…

“ΔΙΑΣΩΛΗΝΩΝΟΥΝ ΤΟΥΣ ΑΣΘΕΝΕΙΣ, ΓΙΑ ΝΑ ΤΟΥΣ ΒΑΛΟΥΝ ΣΕ ΚΑΤΑΣΤΟΛΗ ΚΑΙ ΝΑ ΤΟΥΣ ΔΟΛΟΦΟΝΗΣΟΥΝ ΜΕ ΕΥΘΑΝΑΣΙΑ, ΜΕΣΩ ΦΑΡΜΑΚΩΝ ΠΟΥ ΔΡΟΥΝ ΠΑΡΟΜΟΙΑ ΜΕ ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΚΑΙ ΔΙΟΧΕΤΕΥΟΝΤΑΙ ΣΤΟ ΙΔΙΟ ΚΕΝΤΡΟ ΤΟΥ ΟΡΓΑΝΙΣΜΟΥ ΠΟΥ ΕΛΕΓΧΕΙ ΤΗΝ ΑΝΑΠΝΟΗ.

ΕΙΝΑΙ ΤΑ ΦΑΡΜΑΚΑ ΤΗΣ ΕΥΘΑΝΑΣΙΑΣ ΚΑΙ ΠΑΡΑΛΛΗΛΑ, ΧΟΡΗΓΟΥΝ REMDESEVIR, ΓΙΑ ΝΑ ΜΕΙΩΘΕΙ Η ΑΝΑΠΝΟΗ”!!!!!!!!!!!!

 

 

Και πάμε τώρα στην πιο συγκλονιστική αποκάλυψη του ΣΑΤΑΝΙΚΟΥ ΣΧΕΔΙΑΣΜΟΥ ΤΗΣ ΨΕΥΤΟΠΑΝΔΗΜΙΑΣ…

Ο λατινικός ορισμός του ιού (virus) ιστορικά σημαίνει … “ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ”!!!

Η…κορώνα, εκκλησιαστικά, σημαίνει την …”χρυση κορδέλα στη βάση της παπικής μήτρας…

Η ΠΑΝΔΗΜΙΑ ΤΟΥ ΠΑΠΙΚΟΥ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟΥ!!!

Επίσης η κορώνα, είναι το στέμμα στα Λατινικά,που φορούν οι βασιλείς…

Ο συμβολισμός, είναι σαφής…

“ΠΑΝΔΗΜΙΑ ΜΕ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΒΑΣΙΛΙΚΗΣ ΚΟΜΠΡΑΣ”!!!

Δείτε τώρα πως ενώνει όλα τα κομμάτια του σατανικού πάζλ, ο dr. ARDIS…

“Εδώ και ένα χρόνο, λέω πως αυτός  είναι πιο πολύ ένας ΘΡΗΣΚΕΥΤΙΚΟΣ ΠΟΛΕΜΟΣ σ’ ολόκληρο τον κόσμο…

Το μήνυμα Του Χριστού είναι, πως είναι Ο ΜΕΓΑΛΟΣ ΘΕΡΑΠΕΥΤΗΣ.

Η Πίστη, προηγείται όλων των θαυμάτων, όχι τα εμβόλια…

Εμείς, γιατί έχουμε μεγαλύτερη πίστη στα φάρμακα, και γιατί ένας ιεράρχης, εκφράζει μεγαλύτερη πίστη στην επιστήμη αντί να παροτρύνει τον κόσμο να προσευχηθεί στον Θεό;;;

Το μεγαλύτερο δημιούργημα Του Θεού, ήσουν εσύ και είσαι φτιαγμένος από μοναδικά στοιχεία DNA.

Πόσο ειρωνικό θα ήταν η καθολική εκκλησία, ή οποιαδήποτε άλλη εκκλσία, να χρησιμοποιήσει το σύμβολο ενός ζώου που εκπροσωπεί το Κακό στις θρησκείες, που είναι ΤΟ ΦΙΔΙ, ή Ο ΔΡΑΚΟΣ, δηλαδή, φίδι με πόδια…

Δηλαδή, παίρνεις ΤΟ ΕΡΠΕΤΟ, το απομονώνεις γονιδιακά και βάζεις αυτά τα γονίδια, μέσα στο ΕΚ ΘΕΟΥ DNA”!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

 

ΑΥΤΟ ΗΤΑΝ ΕΞ ΑΡΧΗΣ ΤΟ ΣΧΕΔΙΟ!!!

ΝΑ ΜΠΕΙ ΤΟ DNA ΤΟΥ ΕΡΠΕΤΟΥ, ΤΟΥ ΚΑΚΟΥ, ΜΕΣΑ ΣΤΟ ΔΙΚΟ ΣΟΥ DNA…

Και βρήκαν την ευκαιρία να το κάνουν, με την τεχνολογία mRNA…!!!

Χρησιμοποίησαν mRNA, που έβγαλαν από ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΤΗΣ ΒΑΣΙΛΙΚΗΣ ΚΟΜΠΡΑΣ και θέλουν να βάλουν μέσα σου αυτό ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΚΑΙ ΝΑ ΣΕ ΚΑΝΟΥΝ ΥΒΡΙΔΙΟ ΤΟΥ ΣΑΤΑΝΑ, ΓΙΑ ΝΑ ΜΗΝ ΑΝΗΚΕΙΣ ΣΤΗΝ ΔΗΜΙΟΥΡΓΙΑ ΤΟΥ ΘΕΟΥ!!!” !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

ΣΑΤΑΝΙΚΟ;;;… θα ρωτήσω εγώ…

Ναι… μόνο σατανικά μυαλά και ψυχές παραδομένες στον ΔΙΑΒΟΛΟ, θα μπορούσαν να το σκεφθούν… είναι γνωστοί ποιοί είναι… δεν χρειάζεται να τους επαναλάβω…

Και μόνον “άνθρωποι” μακρυά από Τον Θεό, θα μπορούσαν να δεχθούν στο σώμα τους αυτό ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ και να μετατραπούν σε ΥΒΡΙΔΙΑ ΤΟΥ ΣΑΤΑΝΑ.

Έχετε προσέξει τις αντιδράσεις των εμβολιασμένων;;; Σαν ζόμπι κυκλοφορούν…  και η πορεία τους προς τον θάνατο, είναι δεδομένη…

Ήταν όμως επιλογή τους να εμβολιαστούν με τα ΕΜΒΟΛΙΑ ΤΟΥ ΣΑΤΑΝΑ.

Κάνει κι άλλες σημαντικές αποκαλύψεις ο dr. ARDIS, στο βίντεο που ακολουθεί…

Θα μπορούσα να γράφω ώρες για όσα ζούμε τα δυο χρόνια της ψευτοπανδημίας και ΤΟ ΔΙΑΒΟΛΙΚΟ ΠΑΙΧΝΙΔΙ ΣΕ ΒΑΡΟΣ ΤΗΣ ΑΝΘΡΩΠΟΤΗΤΑΣ.

Ας είναι καλά ο dr. ARDIS,  που με πολύ απλό και κατανοητό τρόπο, αποκάλυψε ΤΟ ΤΕΡΑΣΤΙΟ ΣΑΤΑΝΙΚΟ ΣΧΕΔΙΟ ΑΦΑΝΙΣΜΟΥ ΤΗΣ ΑΝΘΡΩΠΟΤΗΤΑΣ.

Θα προτείνω αυτό το βίντεο που έφτιαξαν και δημοσιοποίησαν η αγαπητή Βασούλα και ο NIOLAND, να το στείλετε -ΝΑ ΤΟ ΣΤΕΙΛΟΥΜΕ- σε όσους πολιτικούς, γιατρούς, δικαστές, εισαγγελείς, εκπαιδευτικούς, γονείς και παιδιά γνωρίζετεκαι γνωρίζουμε…

Προσωπικά, θα το έχω μαζί μου, όταν θα με υποχρεώσουν να κάνω το εμβόλιο και θα τους το τρίψω στη μούρη, ΑΡΝΟΥΜΕΝΗ ΝΑ ΕΜΒΟΛΙΑΣΤΩ ΜΕ ΤΟ ΕΜΒΟΛΙΟ ΤΟΥ ΔΙΑΒΟΛΟΥ, ακόμα κι αν αυτό σημαίνει οποιαδήποτε ποινή…ακόμα και θάνατο…

Σας καλώ όλους, να έχουμε ΠΙΣΤΗ ΣΤΟΝ ΧΡΙΣΤΟ, και ΔΥΝΑΜΗ ΣΤΗΝ ΨΥΧΗ ΜΑΣ.

ΔΕΝ ΘΑ ΜΑΣ ΝΙΚΗΣΟΥΝ…

Η ΑΝΑΣΤΑΣΗ ΤΟΥ, ΘΑ ΕΙΝΑΙ ΑΝΑΣΤΑΣΗ ΟΛΟΚΛΗΡΗΣ ΤΗΣ ΑΝΘΡΩΠΟΤΗΤΑΣ, ΟΣΑ ΔΕΙΝΑ ΚΙ ΑΝ ΜΑΣ ΠΕΡΙΜΕΝΟΥΝ…

Καλλιόπη Σουφλή

Υ.Γ. Σκεφθείτε τον ρόλο του Πάπα, σ’ αυτό το σατανικό σχέδιο… και αναρωτηθείτε γιατί το ΒΑΤΙΚΑΝΟ, ΕΙΝΑΙ ΓΕΜΑΤΟ ΜΕ ΣΑΤΑΝΙΚΑ ΣΥΜΒΟΛΑ… και θυμηθείτε και την ρήση του Αγίου Κοσμά του Αιτωλού: “ΤΟΝ ΠΑΠΑ ΝΑ ΚΑΤΑΡΑΣΘΕ” (φωτό, στο τέλος της ανάρτησης)

 

 

Γράφει η Βασούλα

Τα ερπετά κήρυξαν σ’ολάκερη την ανθρωπότητα στον πλανήτη, ανηλεή πόλεμο…

Οι πόλεμοι που μας έχουν κηρύξει ιστορικά εδώ και εκατονταετίες, ήταν ανελέητοι, οι ποταμοί αίματος στον πλανήτη το αποδεικνύουν σε όλη την ροή της καταγεγραμμένης τουλάχιστον ιστορίας…


Αυτή τη φορά όμως, ξεπέρασαν τον εαυτό τους…


Εκτός του ότι δημιούργησαν νέα νόρμα φρίκης από το Μάρτη του 2020 που επίσημα ανακοινώθηκε η (ψευτο) πανδημία του κορωνοϊού, εκτός του ότι παράλληλα ετοιμάζεται και το Great Reset του Schwab ήτοι η μεγάλη επανεκκίνηση για να ολοκληρωθεί η εξαθλίωση και οικονομική καταστροφή σ’όλο τον κόσμο, εκτός απο το γεγονός ότι σαν κολασμένοι παλεύουν εδώ και χρόνια για τον αποπληθυσμό και για τον πλήρη έλεγχο και τη ρομποτοποίηση (στα πλαίσια του μετανθρωπισμού) όσων θα απομείνουν….


Και μέσα σ’όλα αυτά, βγήκε στο φως πληροφορία και ανάλυση για το πώς εμπλέκεται (και πώς δημιουργήθηκε) ο κόβιντ με τα ιοβόλα φίδια σε πρώτο πλάνο, και τι συνεπάγεται για την ανθρωπότητα (πολυεπίπεδα) αυτή η ιστορια που έχει ήδη σκοτώσει εκατοντάδες χιλιάδες (αν όχι εκατομμύρια) μέσω των ενεσεων αλλά και με τα πρωτόκολλα αγωγής και “θεραπείας” γι’αυτούς που είχαν ή θα έχουν την ατυχία να μπουν σε ΜΕΘ κόβιντ…

Επ’αυτού, σημαντικό ντοκυμαντερ-ανάλυση, παρουσίασε ο Στιου Πήτερς…

Μια παρουσίαση που ο φίλος NIOLAND και εγώ δουλέψαμε μαζι σε δυνατή συνεργασία για να μεταφερθεί μεταφρασμένο στην ελληνική διαδικτυακή κοινότητα.

Ο φίλος μας έφτιαξε μια θαυμάσια εισαγωγή, μοντάρισε, προσάρμοσε τίτλους και σήκωσε το εξαιρετικό αυτό βίντεο για να παρουσιαστεί αυτή η ιστορία και οι σημαντκοί παράγοντες που την απαρτίζουν…

Ένα βίντεο που πραγματικά δεν πρέπει να προσπεράσει ΚΑΝΕΙΣ.

Αυτό που θέλω να συμπληρώσω σ’αυτό το σημείο, για να συμπεριληφθείστη σημαντική πληροφορία και ανάλυση που θα βγει στο βιντεο, είναι η δολοφονια του δόκτορα Bing Liu, ενός νέου άντρα που ερευνούσε γονιδιακές αλληλουχίες στο Παν/μιο του Πίτσμπουργκ, και όπως λέει κι ο δρ. Άρντις στο βίντεο που σήκωσε ο ΝΙΟ μας για την ενημέρωση της ελληνικής ιντερνετικής κοινοτητας, είχε πεί ότι σύντομα θα ανακοινώσει τα ευρήματα των ερευνών του, πράγμα που επιβεβαιωσε κι η δρ. Μπαχάρ (προϊσταμένη του).

Μετά τη δολοφονία του τα ευρήματα
δεν βγήκαν ποτέ στο φως.

Ο δημοσιογράφος Edward Szall που είναι πραγματικός ερευνητής κι όχι ξεπουλημένο φερέφωνο, βγήκε στην εκπομπή του Στιου Πήτερς προχθες (σχετικό βίντεο εδώ https://rumble.com/v11ly0a-exclusive-co … Shows&ep=2 )
λέγοντας ότι πρόκειται για υπόθεση φόνου-αυτοκτονίας που έχει πολλά κενά, έγινε κάτω απο ύποπτες συνθήκες κι είναι βέβαιο ότι οι Αρχές κρύβουν ή μάλλον συγκαλύπτουν πολλά…

Τον σκότωσε ένας μηχανολόγος (αρχιτέκτονας λένε) λογισμικού,
κατέχων μεγάλη θέση στο Ιτον που ασχολείται με αλληλουχίες και αλγόριθμους προβλέψεων για την “πανδημία” βεβαίως…

Είναι ο δρ. Χάο Γκου (Hao Gu) και συνεργαζοταν με την Microsoft
(ντινγκ ντινγκ καμπανάκι πουστιάς εδώ)

Σύμφωνα με την επίσημη εκδοχή, ο Γκου μάλωσε με τον Λιου στο σπίτι του όπου είχε πόρτες και παράθυρα ανοιχτά… τον πυροβόλησε 10 φορές (!) στον κορμό και το κεφάλι… (αναμφίβολα ήθελε να πεθάνει)

Συμφωνα με τον ρεπόρτερ, ένας τέτοιος θάνατος μοιάζει με
συμβόλαιο θανάτου. Θα έπρεπε επίσης να ακουστεί για τα καλά
στους γύρω (από το 14.50 στο βίντεο που έφερα πιο πάνω, δείχνει
την πολυκατοικία που έγινε ο φόνος) αλλά οι γείτονες δεν άκουσαν τίποτα!

Η επίσημη εκδοχή λέει ότι μετά το φόνο, βγήκε, πήγε στο αμάξι του ο δρ. Γκου, όπου και αυτοκτόνησε… χμ….τονιζουν δε, ότι αυτό δεν είχε καμία σχέση με την έρευνα του δρα. Μπινγκ Λιου…(κι εμείς τους αγαπάμε)

Η εκπομπή παροτρύνει το κοινο να τηλεφωνήσει στο Παν/μιο του Πίτσμπουργκ και να απαιτήσει να δημοσιοποιηθεί η έρευνα και τα ευρήματα του Δρα Λιου, από την δρα. Ivet Bahar αφού είπαν πως θα το ανακοινώσουν αλλά ποτέ δε βγήκε ανακοίνωση και η έρευνα αποσιωπήθηκε.

 

Πηγή

 

Δείτε το συγκλονιστικό βίντεο που μεταγλώττισαν η Βασούλα και ο NIOLAND.

Τους χρωστάμε ευγνωμοσύνη, για την γνώση που μας μεταδίδουν.

 

Καλλιόπη Σουφλή

 

 

Καλλιόπη Σουφλή

ΦΩΤΟΓΡΑΦΙΕΣ ΑΠΟ ΤΑ ΣΑΤΑΝΙΚΑ ΣΥΜΒΟΛΑ ΤΟΥ ΒΑΤΙΚΑΝΟΥ…

5:07 / 50:55

ΦΩΤΟΓΡΑΦΙΕΣ ΑΠΟ ΤΑ ΣΑΤΑΝΙΚΑ ΣΥΜΒΟΛΑ ΤΟΥ ΒΑΤΙΚΑΝΟΥ…

ΓΙ ΑΥΤΟ ΤΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ ΤΟΥ ΚΟΡΟΝΟΪΟΥ, ΕΙΝΑΙ… ΠΑΠΙΚΟ ΔΗΛΗΤΗΡΙΟ.

 

 

 

 

 

Δες το βίντεο στο πιο κάτω link http://https://rumble.com/v11ujbv-stew-.html και στα ΑΤΤΙΚΑ ΝΕΑ της Καλλιόπης Σουφλή 

http://Re: Βιντεο και αλλα αναρτήματα του χρήστη NIOLAND Δημοσίευση από Mavros Gatos » Πέμ 21 Απρ 2022, 22:13 https://rumble.com/v11ujbv-stew-.html

Μοίρασέ το:

Από τον Οκτώβρη του 2021 γνωρίζαμε ότι τα πεπτίδια του Covid-19 έμοιαζαν με τις τοξίνες των δηλητηρίων των ερπετών…

Πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες σε δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από ασθενείς με COVID-19

Carlo Brogna , Conceptualization , Formal Analysis , Funding Acquisition , Investigation , Methodology , Project Administration , Resources , Supervision , Original Draft Preparation , Review & Editing , # 1 Simone , Conceptualization , Data , Analysis – Investigation – Cristoni , Software , Validation , Visualization , Writing – Original Draft Preparation , Writing – Review & Editing , # a, 2 Mauro Petrillo , Conceptualization , Data Curation , Formal Analysis , Investigation , Methodology , Validation , Visualization , Original Writing Writing – Review & Editing , # b, Maddalena Querci , Conceptualization , Funding Acquisition , Methodology , Project Administration , Resources , Supervision , Validation , Original Draft Preparation Writing – Review & Editing , 3 Ornella Piazza , Superhoditology , Methodology 3 , – Writing – Προετοιμασία πρωτότυπου σχεδίου , Συγγραφή – Κριτική & Επιμέλεια , 4 και Gu y Van den Eede , Conceptualization , Funding Acquisition , Project Administration , Πόροι , Εποπτεία , Επικύρωση , Συγγραφή – Προετοιμασία πρωτότυπου σχεδίου , Συγγραφή – Κριτική & Επιμέλεια 5

Αλλαγές έκδοσης

Αναθεωρημένο. Τροποποιήσεις από την έκδοση 1

Αυτή η έκδοση περιέχει προσθήκες κειμένου στην ενότητα “Συζήτηση” μετά από τα σχόλια και τις προτάσεις που έγιναν από τους Δρ. Σχετικά με τις αλλαγές στο χειρόγραφο, σημειώστε ότι προσθέσαμε τρεις αναφορές μετά την αναφορά N.20. Καμία αλλαγή σε σχήματα ή πίνακες.

Περίληψη αξιολόγησης από ομοτίμους

Ημερομηνία αναθεώρησης Όνομα/τα κριτικού Η έκδοση εξετάστηκε Έλεγχος κατάστασης
29 Οκτωβρίου 2021 Μοσέ Αρδίτι Έκδοση 2 Εγκρίθηκε
18 Οκτωβρίου 2021 Πάολο Γκρουμάτι Έκδοση 2 Εγκρίθηκε
5 Οκτωβρίου 2021 Μοσέ Αρδίτι Έκδοση 1 Εγκρίθηκε με κρατήσεις
2021 9 Αυγούστου Πάολο Γκρουμάτι Έκδοση 1 Εγκρίθηκε με κρατήσεις

Αφηρημένη

Ιστορικό: Ο SARS-CoV-2 που προκαλεί τη νόσο COVID-19 και οδήγησε στην πανδημία που επηρεάζει αυτήν τη στιγμή τον κόσμο έχει διερευνηθεί ευρέως. Έχουν διεξαχθεί διάφορες μελέτες για την κατανόηση του μηχανισμού μόλυνσης και των εμπλεκόμενων ανθρώπινων γονιδίων, μεταγραφών και πρωτεϊνών. Παράλληλα, έχουν αναφερθεί πολυάριθμες κλινικές εξωπνευμονικές εκδηλώσεις που συνυπάρχουν με τη νόσο COVID-19 και οι ενδείξεις της σοβαρότητας και της εμμονής τους αυξάνονται. Το εάν αυτές οι εκδηλώσεις συνδέονται με άλλες διαταραχές που συνυπάρχουν με τη λοίμωξη SARS-CoV-2, είναι υπό συζήτηση. Σε αυτή την εργασία, αναφέρουμε την ταυτοποίηση πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες σε ασθενείς με COVID-19 με την εφαρμογή της Υγρής Χρωματογραφίας Επιφανειακά Ενεργοποιημένος Χημικός Ιονισμός – Φασματομετρία Μάζας Κινητικότητας Ιόντων Νέφους.

Μέθοδοι: Δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από ασθενείς με COVID-19 και άτομα ελέγχου αναλύθηκαν για τη μελέτη των προφίλ πεπτιδομικών τοξινών. Η διαδικασία παρασκευής κατακρήμνισης πρωτεΐνης χρησιμοποιήθηκε για το πλάσμα, για την απομάκρυνση πρωτεϊνών υψηλού μοριακού βάρους και την αποτελεσματική διαλυτοποίηση του πεπτιδικού κλάσματος. στην περίπτωση των κοπράνων και των ούρων, χρησιμοποιήθηκε άμεση πεπτιδική διαλυτοποίηση.

Αποτελέσματα: Πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες, σχεδόν πανομοιότυπα με τοξικά συστατικά δηλητηρίων από ζώα, όπως κωνοτοξίνες, φωσφολιπάσες, φωσφοδιεστεράσες, πρωτεϊνάσες μετάλλου ψευδαργύρου και βραδυκινίνες, εντοπίστηκαν σε δείγματα ασθενών με COVID-19, αλλά όχι σε δείγματα ελέγχου.

Συμπεράσματα: Η παρουσία πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες θα μπορούσε δυνητικά να συνδεθεί με τη μόλυνση από SARS-CoV-2. Η παρουσία τους υποδηλώνει μια πιθανή συσχέτιση μεταξύ της νόσου COVID-19 και της απελευθέρωσης στο σώμα (ολιγο-)πεπτιδίων σχεδόν πανομοιότυπων με τοξικά συστατικά δηλητηρίων από ζώα. Η εμπλοκή τους σε ένα μεγάλο σύνολο ετερογενών εξωπνευμονικών κλινικών εκδηλώσεων COVID-19, όπως οι νευρολογικές, δεν μπορεί να αποκλειστεί. Αν και η παρουσία κάθε μεμονωμένου συμπτώματος δεν είναι επιλεκτική της νόσου, ο συνδυασμός τους μπορεί να σχετίζεται με τον COVID-19 λόγω της συνύπαρξης του πάνελ των πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες που ανιχνεύονται εδώ. Η παρουσία αυτών των πεπτιδίων ανοίγει νέα σενάρια σχετικά με την αιτιολογία των κλινικών συμπτωμάτων του COVID-19 που έχουν παρατηρηθεί μέχρι τώρα, συμπεριλαμβανομένων των νευρολογικών εκδηλώσεων.

Λέξεις-κλειδιά: SARS-CoV-2, COVID-19, πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες

Εισαγωγή

Έχουν αναφερθεί πολυάριθμες κλινικές εξωπνευμονικές εκδηλώσεις που συνυπάρχουν με τη νόσο COVID-19 (π.χ. νευρολογικές, αιμορραγικές και θρομβωτικές) και οι ενδείξεις της σοβαρότητας και της εμμονής τους αυξάνονται. Γκούπτα et al . επανεξέτασε την εξωπνευμονική παθοφυσιολογία ασθενών με COVID-19, να βοηθήσει τους κλινικούς γιατρούς και τους επιστήμονες στην αναγνώριση και παρακολούθηση του φάσματος των εκδηλώσεων και στην ανάπτυξη ερευνητικών προτεραιοτήτων και θεραπευτικών στρατηγικών για όλα τα εμπλεκόμενα συστήματα οργάνων . . Liotta et al . χαρακτήρισε τη συχνότητα των νευρολογικών εκδηλώσεων σε μια ομάδα νοσηλευόμενων ασθενών με επιβεβαιωμένο COVID-19: οι πιο συχνές ήταν μυαλγία, πονοκέφαλος, εγκεφαλοπάθεια, ζάλη, δυσγευσία και ανοσμία. η εγκεφαλοπάθεια βρέθηκε να είναι « σχετίζεται με αυξημένη νοσηρότητα και θνησιμότητα, ανεξάρτητα από τη σοβαρότητα της αναπνευστικής νόσου . . Το εάν αυτές οι εκδηλώσεις συνδέονται με διαταραχές που συνυπάρχουν με τη λοίμωξη SARS-CoV-2 είναι υπό συζήτηση, συμπεριλαμβανομένης της ταυτόχρονης εμφάνισής τους, η οποία θα μπορούσε να σχετίζεται έντονα με τη νόσο COVID-19. Frontera et al ., πραγματοποιώντας μια προοπτική, πολυκεντρική, μελέτη παρατήρησης νοσηλευόμενων ενηλίκων με εργαστηριακά επιβεβαιωμένη λοίμωξη SARS-CoV-2, κατέληξαν στο συμπέρασμα ότι «Νευρολογικές διαταραχές εντοπίστηκαν στο 13,5% των ασθενών με COVID-19 κατά τη διάρκεια του χρονικού πλαισίου της μελέτης. Πολλές από αυτές τις νευρολογικές διαταραχές εμφανίζονται συχνά σε ασθενείς με κρίσιμη ασθένεια. Δεν εμφανίστηκε εγκεφαλίτιδα, μηνιγγίτιδα ή μυελίτιδα που να αναφέρεται σε λοίμωξη SARS-CoV-2, αν και εντοπίστηκε μεταμολυσματικό σύνδρομο Guillain-Barre. Συνολικά, οι νευρολογικές διαταραχές στο πλαίσιο της λοίμωξης SARS-CoV-2 ενέχουν υψηλότερο κίνδυνο ενδονοσοκομειακής θνησιμότητας και μειωμένη πιθανότητα εξιτηρίου από το σπίτι ». .

Οι μελέτες σχετικά με τη χρήση της φασματομετρίας μάζας στο πλαίσιο του COVID-19 επικεντρώνονται στην αναζήτηση επαυξημένης φλεγμονώδους μόρια ανθρώπου που θα χρησιμοποιηθούν ως βιοδείκτες για την αξιολόγηση της κατάστασης σοβαρότητας του COVID-19 (βλ. για παράδειγμα την εργασία του Messner και των συναδέλφων). Διαφορετικές μελέτες αναφέρουν τη χρήση πρωτεομικών προσεγγίσεων για τον χαρακτηρισμό των πρωτεϊνών SARS-CoV-2 – . Άλλες μελέτες υπογραμμίζουν τις προκλήσεις στη χρήση τους λόγω της ανάγκης εμπλουτισμού του κλάσματος πρωτεΐνης που πρέπει να αναλυθεί για τη μεγιστοποίηση της ευαισθησίας της τεχνολογίας .

Υγρή Χρωματογραφία Επιφανειακά ενεργοποιημένος Χημικός Ιονισμός – Φασματομετρία μάζας κινητικότητας ιόντων νέφους (LC-SACI-CIMS) αναφέρεται ως τεχνική φασματομετρίας μάζας υψηλής ευαισθησίας ικανή να μεγιστοποιήσει την ένταση του σήματος πεπτιδίου – . Χρησιμοποιήσαμε το LC-SACI-CIMS για να αποκαλύψουμε την παρουσία μεταβολιτών που θα μπορούσαν να εξηγήσουν τις κλινικές περιγραφές νευρολογικών, πηκτικών και φλεγμονωδών συμπτωμάτων και εδώ παρουσιάζουμε τα αποτελέσματα των αναλύσεών μας. Βρήκαμε πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες σε δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από ασθενείς με COVID-19, αλλά όχι σε δείγματα ελέγχου. Καθώς τα ευρήματά μας δεν ανταποκρίνονται στην τρέχουσα σκέψη σχετικά με την αιτιολογία που σχετίζεται με τις παρατηρούμενες κλινικές εκδηλώσεις σε ασθενείς με COVID-19, πιστεύουμε ότι η άμεση κοινοποίησή τους με την επιστημονική κοινότητα είναι κρίσιμη.

Μέθοδοι

Λογική

Ενεργοποιημένος χημικός ιονισμός υγρής χρωματογραφίας-επιφανείας – Η φασματομετρία μάζας κινητικότητας ιόντων νέφους (LC-SACI-CIMS) παρουσιάζει υψηλή επιλεκτικότητα στην ανίχνευση πεπτιδίων χάρη στην ικανότητά της να απομονώνει επιλεκτικά ιόντα πεπτιδίων μέσω ενός φαινομένου κινητικότητας ιόντων στην πηγή (IM). Στην πραγματικότητα, επιτρέπει μια επιλεκτική ρύθμιση της διαφοράς δυναμικού μεταξύ της χαμηλής τάσης της επιφάνειας SACI (47 V) και του φακού εισόδου (-50 / -600 V) και μια επιλεκτική εστίαση σε νέφος ιόντων διαλύτη που περιέχει είδη σε χαμηλή ή υψηλός m/z αναλογία Με την εναλλαγή του φακού τάσης εισόδου μεταξύ -50 και -600 V κατά τη διάρκεια της ανάλυσης, είναι δυνατός ο διαχωρισμός της χαμηλής m/z από ψηλά m/z δυναμικό σήμα, για να αποφευχθεί ο κορεσμός της παγίδας ιόντων και να μεγιστοποιηθεί ο αριθμός των ανιχνευόμενων ενώσεων. Ο χημικός θόρυβος των φασμάτων μάζας μειώνεται επίσης σημαντικά λόγω των χαμηλότερων ποσοτήτων ιόντων συστάδων διαλυτών που παράγονται σε συνθήκες ιονισμού χαμηλής τάσης. Έτσι, η αποτελεσματικότητα ανίχνευσης πεπτιδίου αυξάνεται σημαντικά από την επιλεκτικότητα IM και τον χαμηλότερο χημικό θόρυβο σε σχέση με τις κλασικές προσεγγίσεις ιονισμού υψηλής τάσης. Χάρη στην ιδιαιτερότητα της τεχνολογίας SACI-CIMS στην εστίαση των νεφών ιόντων διαλύτη που περιέχουν m/z (ολιγο-)πεπτιδικό είδος, ήταν δυνατό να αυξηθεί η αποτελεσματικότητα ανίχνευσης.

Κατά τη χρήση του LC-SACI-CIMS, έχουν υιοθετηθεί οι ακόλουθες στρατηγικές:

  • Για να μειωθεί όσο το δυνατόν περισσότερο η παρουσία μόλυνσης και να αποφευχθεί ο σχηματισμός πολυμερών ακετονιτριλίου σε όξινες συνθήκες (όπως αναφέρεται από το Eizo et al . ), μυρμηκικό οξύ δεν προστέθηκε στο CH 3 Χρωματογραφική φάση CN.

  • Να διαχωρίζει το χαμηλό από το υψηλό m/z συστάδες ιόντων διαλυτών μειώνοντας τον κορεσμό της παγίδας ιόντων, το φαινόμενο χώρου/φόρτισης και αυξάνοντας την ανάκτηση των ανιχνευόμενων ενώσεων, η τάση του φακού εισόδου LC-SACI-CIMS άλλαζε μεταξύ -50 και -600 V κάθε 10 ms κατά τη διάρκεια της ανάλυσης .

  • Για την ενίσχυση της απόδοσης ιονισμού SACI, το NH 4 HCO 3 προστέθηκε στα δείγματα. Όπως αναφέρεται στη βιβλιογραφία , , η αποτελεσματικότητα ιοντισμού πεπτιδίου (και κατά συνέπεια η ευαισθησία) ενισχύεται σε συνθήκες SACI όταν υπάρχουν ιοντικά άλατα στο δείγμα, λόγω του ειδικού συντονισμού ιόντων πεπτιδίου.

  • Για να μειωθεί ο συνολικός χρόνος εκτέλεσης, χρησιμοποιήθηκε χρωματογραφική κλίση πυροβόλου όπλου για την αφαλάτωση του δείγματος.

  • Για να αποφευχθεί η αλλαγή του μοριακού προφίλ του δείγματος και για να αξιολογηθούν οι πιθανές βιολογικές δραστηριότητες των κυκλοφορούντων ειδών, δεν εφαρμόστηκε ενζυματική πέψη στα δείγματα.

  • Για την ομαλοποίηση του m/z , 5 μL τυπικού μίγματος συντονισμού ESI (Agilent, USA) προστέθηκαν σε κάθε εκχύλισμα δείγματος.

Χημικά

NH 4 HCO 3 , μεθανόλη, ακετονιτρίλιο και μυρμηκικό οξύ αγοράστηκαν από τη Sigma-Aldrich (Μιλάνο, Ιταλία). Το δι-απεσταγμένο νερό αγοράστηκε από τη VWR (Μιλάνο, Ιταλία).

Σώμα στρατού

Δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν στην παρούσα μελέτη: δείγματα πλάσματος που συλλέχθηκαν από 20 ασθενείς με COVID-19 από διαφορετικές πόλεις της Ιταλίας και από 10 άτομα ελέγχου (δηλαδή αρνητικά σε τεστ SARS-CoV-2 και δεν επηρεάστηκαν από καρκίνο ή αυτοάνοσα νοσήματα). δείγματα ούρων που συλλέχθηκαν από δύο επιπλέον ασθενείς με COVID-19 και από δύο άτομα ελέγχου· δείγματα κοπράνων από τρεις ασθενείς με COVID-19 και από τρία άτομα ελέγχου. Τα ανθρώπινα βιολογικά δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν στον πειραματισμό συλλέχθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν με τη ρητή ελεύθερη και ενημερωμένη γραπτή συγκατάθεση του ατόμου από το οποίο ελήφθη το υλικό, σύμφωνα με την κείμενη νομοθεσία. Η μελέτη έλαβε έγκριση από την «Comitato Etico Campania Sud» (ν.36/2021, αίτημα που υποβλήθηκε στις 06-05-2020). Εκτός από τη θετικότητα στον SARS-CoV-2, δεν δόθηκαν πρόσθετες πληροφορίες (π.χ. ηλικία, φύλο, ορότυπος αίματος, σοβαρότητα της νόσου, χρόνος συλλογής, θνησιμότητα κ.λπ.).

Η προετοιμασία των δειγμάτων

Πλάσμα αίματος. Κάθε δείγμα πλάσματος υποβλήθηκε σε επεξεργασία ως εξής: 5 μL CH 3 CN προστέθηκαν σε 50 μL πλάσματος και στροβιλίστηκαν για ένα λεπτό. Η διαδικασία επαναλήφθηκε 10 φορές. Στη συνέχεια το δείγμα φυγοκεντρήθηκε στα 1.500 g για 10 λεπτά και δύο κλάσματα υπερκειμένου των 100 μL ξηράνθηκαν και επαναιωρήθηκαν σε 70 μL NH 4 HCO 3 50 mmol. Το διάλυμα αναλύθηκε με LC-SACI-CIMS (βλ Σκεπτικό ).

Ούρο. Κάθε δείγμα ούρων υποβλήθηκε σε επεξεργασία ως εξής: προστέθηκε ισοδύναμος όγκος δι-απεσταγμένου νερού, ακολουθούμενος από φυγοκέντρηση στα 1.500 g για 10 λεπτά. 100 μL ξηράνθηκαν και επαναιωρήθηκαν σε 70 μL ΝΗ 4 HCO 3 50 mmol. Το δείγμα αναλύθηκε με LC-SACI-CIMS (βλ Σκεπτικό ).

Σκαμνί. Κάθε δείγμα κοπράνων υποβλήθηκε σε επεξεργασία όπως περιγράφεται από τον Cristoni et al . και αναλύθηκε με LC-SACI-CIMS (βλ Σκεπτικό ).

Υγρή χρωματογραφία

Το Ultimate 3000 LC (από ThermoFisher) χρησιμοποιήθηκε για να επιτευχθεί διαχωρισμός των αναλυτών για κάθε δείγμα πριν από την ανάλυση φασματομετρίας μάζας (MS). Χρησιμοποιήθηκε στήλη Kinetex C-18 LC αντίστροφης φάσης (50 χ 2,1 mm, μέγεθος σωματιδίου, 5 μm, μέγεθος πόρων, 100 Α, από την Phenomenex, ΗΠΑ). Η ροή του εκλούσματος ήταν 0,25 mL/min και ο όγκος ένεσης ήταν 15 μL. Οι κινητές φάσεις ήταν:

  • Α .

    0,2% (v/v) μυρμηκικό οξύ (HCOOH)

  • Β .

    ακετονιτρίλιο (CH 3 ΣΟ)

Η βαθμίδα έκλουσης ήταν: 2% (ν/ν) του Β μεταξύ 0 και 2 λεπτών. 2 έως 30% μεταξύ 2 και 7 λεπτών. 30 έως 80% μεταξύ 7 και 9 λεπτών. 80% μεταξύ 9 και 12 λεπτών. 80-2% μεταξύ 12 και 12,1 λεπτών. Η στήλη εξισορροπήθηκε εκ νέου με 2% Β μεταξύ 12,1 και 17 λεπτών.

Φασματομετρία μάζας

Όλα τα δείγματα αναλύθηκαν για την παρουσία πρωτεϊνών με πιθανή τοξική δράση χρησιμοποιώντας το LC-SACI-CIMS όπως έχει ήδη περιγραφεί στη βιβλιογραφία – . Τα δείγματα αναλύθηκαν με φασματόμετρο μάζας ORBITRAP (Breme, Γερμανία) συζευγμένο με πηγή χημικού ιονισμού ενεργοποιημένου με επιφάνεια (SACI) και λειτούργησε σε λειτουργία θετικού ιόντος.

Η επιφανειακή τάση ήταν 47 V και ο φακός εισόδου άλλαζε μεταξύ -50 και -600 V κάθε 10 ms. Βοηθητικό αέριο: 2 L / min; Αέριο νεφελοποιητή: 80 psi; Θερμοκρασία: 40 °C. Τα φάσματα πλήρους σάρωσης αποκτήθηκαν στα 40-3.500 m/z για μη στοχευμένες αναλύσεις μεταβολομικής/πρωτεϊνικής για την ανίχνευση αναλυτών. Το ίδιο m/z χρησιμοποιήθηκε τόσο για την ανακάλυψη όσο και για την επιλεκτική ταυτοποίηση βιοδεικτών και για την τυποποίηση (κυρίως από την άποψη του ρυθμού σάρωσης) του οργάνου. Το λογισμικό που χρησιμοποιείται για την επεξεργασία δεδομένων είναι το SANIST, μια τροποποιημένη έκδοση του Global Proteome Machine (GPM, https://www.thegpm.org/GPM/ ), εμφυτεύεται όπως περιγράφεται στο – . Τα αρχεία εξόδου SANIST είναι διαθέσιμα ως συμπληρωματικό υλικό (βλ. ενότητα Διαθεσιμότητα δεδομένων ).

Το λογισμικό SANIST που χρησιμοποιείται εδώ είναι ελεύθερα διαθέσιμο, κατόπιν αιτήματος email στην ομάδα CranioMed ( ti.demoinarc@angorb.rid ).

Η φασματομετρία μάζας σε δείγματα πραγματοποιήθηκε με διάσταση που προκαλείται από σύγκρουση χρησιμοποιώντας σάρωση εξαρτώμενη από δεδομένα και ήλιο ως αέριο σύγκρουσης. Η παγίδα ιόντων εφαρμόστηκε για να απομονωθούν και να τεμαχιστούν τα πρόδρομα ιόντα (παράθυρα απομόνωσης, ± 0,3 m/z ; ενέργεια σύγκρουσης, 30% της μέγιστης τιμής της, η οποία ήταν 5V από την κορυφή σε κορυφή), και ο αναλυτής μάζας ORBITRAP χρησιμοποιήθηκε για τη λήψη θραυσμάτων με εξαιρετικά ακριβή m/z (ανάλυση 15.000; m/z <10 ppm).

Επεξεργασία δεδομένων

Εντοπίστηκε ψηλά m/z χρησιμοποιήθηκαν για την αναγνώριση τοξινών χάρη στην εκλεκτικότητα που δόθηκε από τη μακριά τους αλυσίδα.

Το πλήρες σετ UniprotKB με μη αυτόματο έλεγχο πρωτεϊνών και τοξινών δηλητηρίου (UniprotKB, Animal toxin annotation project. https://www.uniprot.org/program/Toxins , Πρόσβαση στις 4 Οκτωβρίου 2020), σε συνδυασμό με ένα υποσύνολο μη δηλητηριωδών πρωτεϊνών και τοξινών από τη βάση δεδομένων UniprotKB χρησιμοποιήθηκε ως πρωτεϊνικό σύνολο δεδομένων αναφοράς προκειμένου να δοθεί στατιστική σημασία στα αποτελέσματα.

TBLASTN εκτελέστηκε στον ιστότοπο του Εθνικού Κέντρου Πληροφοριών Βιοτεχνολογίας (NCBI). με προεπιλεγμένες επιλογές και παραμέτρους, με εξαίρεση τις ακόλουθες: μέγ. αλληλουχίες στόχου = 1.000; αναμενόμενο όριο = 100; μέγεθος λέξης = 3; ύπαρξη κόστους κενού = 9; επέκταση κόστους χάσματος = 1; φίλτρο περιοχών χαμηλής πολυπλοκότητας = Όχι. Έχουν πραγματοποιηθεί αναζητήσεις έναντι: Συλλογή νουκλεοτιδίων (nr/nt); Αλληλουχίες RNA αναφοράς (refseq_rna); Βάση δεδομένων γονιδιώματος RefSeq (refseq_genomes); Κυνηγετικά όπλα ολόκληρου του γονιδιώματος (wgs) από μεταγονιδιωματικά πειράματα. Αλληλουχίες αρχείου ανάγνωσης αλληλουχίας (SRA) από μεταγονιδιωματικά πειράματα. Transcriptome Shotgun Assembly (TSA); Αλληλουχίες διπλωμάτων ευρεσιτεχνίας (pat); Αλληλουχίες Human RefSeqGene (RefSeq_Gene); Δεδομένα σειράς Betacoronavirus Genbank.

Οι πληροφορίες που αναφέρονται στο Πίνακας 1 έχει ανακτηθεί από τη βάση δεδομένων UniprotKB και από τη βάση δεδομένων NCBI Taxonomy , μετά από επιβεβαίωση με ανάλυση σύγκρισης αλληλουχιών BLAST .

Τραπέζι 1.

Επισκόπηση υποψήφιων πρωτεϊνών στις οποίες έχουν χαρτογραφηθεί πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες.

Τριάντα έξι υποψήφιες πρωτεϊνικές αλληλουχίες στις οποίες έχουν χαρτογραφηθεί τα ταυτοποιημένα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες αναφέρονται εδώ, μαζί με πληροφορίες που ανακτήθηκαν από τις βάσεις δεδομένων UniprotKB και NCBI Taxonomy. Ο πίνακας χωρίζεται σε τρεις ενότητες ανάλογα με τη φυλή των αναφερόμενων ειδών: Χορδάτα (πράσινο), Echinodermata (ροζ), Μαλάκιο (γαλάζιο).

ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΥΠΟΨΗΦΙΟΥ UNIPROTKB ΠΛΗΡΟΦΟΡΙΕΣ ΥΠΟΨΗΦΙΟΥ ΤΑΞΟΝΟΜΙΑΣ
ΜΕΤΑ ΧΡΙΣΤΟΝ ταυτότητα Κατάσταση Όνομα πρωτεΐνης ΕΝΖΥΜΟ EC Αλλα ονόματα) Μήκος (aa) ταυτότητα Είδος Phylum – Family Κοινό όνομα(α) οργανισμού
Q8AY46 VKTHB_BUNCA επανεξεταστεί Ομόλογο βήτα αναστολέα πρωτεάσης σερίνης τύπου Kunitz μπουνγαροτοξίνης Β1 ΝΑ – 85 92438 Candidus Bungarus Χορδάτα – Elapidae , Μαλαισιανό κράιτ
A6MEY4 PA2B_BUNFA επανεξεταστεί Βασικός φωσφολιπάση Α2 BFPA EC 3.1.1.4 . Αντιμικροβιακή φωσφολιπάση Α2
. 2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης (svPLA2)
145 8613 Bungarus fasciatus Χορδάτα – Elapidae , Banded Krait
. Pseudoboa fasciata
F5CPF1 PA235_MICAT επανεξεταστεί Φωσφολιπάση A2 MALT0035C EC 3.1.1.4 . Φωσφολιπάση A2 MALT0035C (svPLA2) 142 129457 Micrurus altirostris Χορδάτα – Elapidae . Ουρουγουανό κοραλλιογενές φίδι
. Elaps altirostris
A8QL59 VM3_NAJAT επανεξεταστεί Ψευδάργυρος μεταλλοπρωτεϊνάση -δισιντεγρίνη EC 3.4.24.- . Μεταλλοπρωτεϊνάση δηλητηρίου φιδιού (SVMP) 621 8656 Naja atra Χορδάτα – Elapidae . Κινέζικη κόμπρα
Q9I900 PA2AD_NAJSP επανεξεταστεί Όξινο φωσφολιπάση A2D EC 3.1.1.4 . svPLA2
. APLA
. 2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης
146 33626 Naja sputatrix Χορδάτα – Elapidae . Μαλαισιανή κόμπρα φτύσιμο
. Naja naja sputatrix
Q58L90 FA5V_OXYMI επανεξεταστεί Δηλητήριο ενεργοποιητή προθρομβίνης μη καταλυτική υπομονάδα omicarin-C ΝΑ . vPA
. Πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίουΚόβεται σε 2 αλυσίδες
1460 111177 Oxyuranus microlepidotus Χορδάτα – Elapidae Ταϊπάν ενδοχώρας
. Diemenia microlepidota
Q58L91 FA5V_OXYSU επανεξεταστεί Δηλητήριο ενεργοποιητή προθρομβίνης μη καταλυτική υπομονάδα oscutarin-C ΝΑ . vPA
. Πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίουΚόβεται σε 2 αλυσίδες
1459 8668 Oxyuranus scutellatus Χορδάτα – Elapidae . Παράκτιος τύπος
Q9W7J9 3S34_ΨΕΤΕ επανεξεταστεί Μικρός νευροτοξίνη 4 ΝΑ . SNTX4
. Άλφα-νευροτοξίνη 4
79 8673 Ψευτο-υφαντική Χορδάτα – Elapidae . Ανατολικό καφέ φίδι
P23028 PA2AD_PSETE επανεξεταστεί Όξινο φωσφολιπάσης Α2 Ομόλογη αλυσίδα υφασματοτοξίνης D ΝΑ . svPLA2 ομόλογο 152 8673 Ψευτο-υφαντική Χορδάτα – Elapidae . Ανατολικό καφέ φίδι
Q593B6 FA5_PSETE επανεξεταστεί Παράγοντας πήξης V ΝΑ Κόβεται σε 2 αλυσίδες 1459 8673 Ψευτο-υφαντική Χορδάτα – Elapidae . Ανατολικό καφέ φίδι
Q7SZN0 FA5V_PSETE επανεξεταστεί Δηλητήριο ενεργοποιητή προθρομβίνης μη καταλυτική υπομονάδα ψευδαρίνης-C ΝΑ . PCNS
. vPA
. Πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίουΚόβεται σε 2 αλυσίδες
1460 8673 Ψευτο-υφαντική Χορδάτα – Elapidae . Ανατολικό καφέ φίδι
Q2XXQ3 CRVP1_PSEPL επανεξεταστεί Πλούσια σε κυστεΐνη πρωτεΐνη δηλητηρίου ENH1 ΝΑ . CRVP
. Πλούσια σε κυστεΐνη εκκριτική πρωτεΐνη ENH1 (CRISP-ENH1)
239 338839 Pseudoferania polylepis Χορδάτα – Homalopsidae . Το νερόφιδο του Macleay
. Enhydris polylepis
Q9PW56 BNP2_BOTJA επανεξεταστεί βραδυκινίνη και νατριουρητικά πεπτίδια τύπου C ΝΑ . Εγκεφάλου BPP-CNP
. Evasin-CNPΣτερεωμένο στις 12 αλυσίδες
265 8724 Bothrops pit οχιά Χορδάτα – Viperidae . jararaca
A8YPR6 SVMI_ECHOC επανεξεταστεί Δηλητήριο φιδιού μεταλλοπρωτεάση
ανασταλτικός παράγοντας
ΝΑ . 02D01
. 02Ε11
. 10F07
. Svmpi-Eoc7Κομμένο σε 15 αλυσίδες
308 99586 Echis oceIIatus Χορδάτα – Viperidae . Οχιά οχιά με λέπια πριονιού
Q698K8 VM2L4_GLOBR επανεξεταστεί Ψευδάργυρος μεταλλοπρωτεϊνάση /διισιντεγρίνη [Θραύσμα] EC 3.4.24- Κόβεται σε 3 αλυσίδες 319 259325 Gloydius brevicaudus Χορδάτα – Viperidae . Κορεάτικο φίδι σλαμόζα
. Agkistrodon halys brevicaudus
Q8AWI5 VM3HA_GLOHA επανεξεταστεί Ψευδάργυρος μεταλλοπρωτεϊνάση- δισintegrin EC 3.4.24- . Αλυσάση που μοιάζει με μεταλλοπρωτεϊνάση ψευδαργύρου
. Μεταλλοπρωτεϊνάση δηλητηρίου φιδιού (SVMP)
. Πρωτεΐνη που προκαλεί αγγειακή απόπτωση (VAP)
610 8714 Gloydius halys Χορδάτα – Viperidae . Κινεζικό νερό μοκασίνι
. Agkistrodon halys
P82662 3L26_OPHHA επανεξεταστεί Αλφα- νευροτοξίνη ΝΑ . Άλφα-ελαπιτοξίνη-Oh2b (Alpha-EPTX-Oh2b)
. Άλφα-ελαπιτοξίνη-Oh2b
. LNTX3
. Μακρά νευροτοξίνη OH-6A/OH-6B
. OH-3
91 8665 Οφιοφάγος Χάνα Χορδάτα – Viperidae . Βασιλιάς κόμπρα
. Naja Hannah
Q2PG83 PA2A_PROEL επανεξεταστεί Όξινο φωσφολιπάση A2 PePLA2 EC 3.1.1.4 . 2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης (svPLA2) 138 88086 Protobothrops elegans Χορδάτα – Viperidae . Κομψό pitviper
. Paramecium elegans
P06860 PA2BX_PROFL επανεξεταστεί Βασικός φωσφολιπάση Α2 PL-X EC 3.1.1.4 . 2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης (svPLA2) 122 88087 Protobothrops flavoviridis Χορδάτα – Viperidae . Habu
. Trimeresurus flavoviridis
P0C7P5 BNP_PROFL επανεξεταστεί βραδυκινίνη και νατριουρητικά πεπτίδια τύπου C ΝΑ . BPP-CNP

Κόβεται σε 6 αλυσίδες

193 88087 Protobothrops flavoviridis Χορδάτα – Viperidae . Habu
. Trimeresurus flavoviridis
Q3C2C2 PA21_ACAPL επανεξεταστεί Φωσφολιπάση Α2 AP-PLA2T EC 3.1.1.4 . 2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης (svPLA2) 159 133434 Acanthaster planci Εχινόδερμα – Acanthasteridae . Αστερίας με αγκάθια κορώνα
D6C4M3 CU96_CONCL επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Cl9.6 ΝΑ . Κονοτοξίνη CI9.6 81 1736779 Californiconus californicus μαλάκιο – Conidae . Κώνος Καλιφόρνια – Conus californicus
D2Y488 VKT1A_CONCL επανεξεταστεί Αναστολέας πρωτεάσης σερίνης τύπου Kunitz κονοτοξίνη Cal9.1a ΝΑ – 78 1736779 Californiconus californicus μαλάκιο – Conidae . Κώνος Καλιφόρνια
. Conus californicus
D6C4J8 CUE9_CONCL επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Cl14.9 ΝΑ – 78 1736779 Californiconus californicus μαλάκιο – Conidae . Κώνος Καλιφόρνια
. Conus californicus
P0DPT2 CA1B_CONCT επανεξεταστεί Αλφα- κωνοτοξίνη ClB [Θραύσμα] ΝΑ . C1.2 41 101291 Conus catus μαλάκιο – Conidae . Κώνος γάτας
V5V893 CQG3_CONFL επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Fla16d ΝΑ . Κονοτοξίνη Flal6d

Κόβεται σε 2 αλυσίδες

76 101302 Κώνος μαλάκιο – Conidae . Κίτρινος κώνος Ειρηνικού
P58924 CS8A_CONGE επανεξεταστεί Sigma- κονοτοξίνη GVIIIA ΝΑ . Σίγμα-κωνοτοξίνη GVIIIA 88 6491 Conus geographus μαλάκιο – Conidae . Κώνος γεωγραφίας
. Nubecula geographus
P0DM19 NF2_CONMR επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Mr15.2 ΝΑ . Κονοτοξίνη Mr15.2 (Mr094) 92 42752 Conus marmoreus μαλάκιο – Conidae . Μαρμάρινος κώνος
P0C1N5 M3G_CONMR επανεξεταστεί Κονοτοξίνη mr3g ΝΑ . Κονοτοξίνη mr3g (Mr3.6) 68 42752 Conus marmoreus μαλάκιο – Conidae . Μαρμάρινος κώνος
D2DGD8 I361_CONPL επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Pu6.1 ΝΑ – 83 93154 Conus pulicarius μαλάκιο – Conidae . Κώνος από δάγκωμα ψύλλων
P0C8U9 CA15_CONPL επανεξεταστεί Αλφα- κωνοτοξίνη -όπως Pu1.5 ΝΑ – 81 93154 Conus pulicarius μαλάκιο – Conidae . Κώνος από δάγκωμα ψύλλων
A1X8B8 CAl_CONQU επανεξεταστεί Υποθετικό άλφα- κονοτοξίνη Qc alphaL-1 ΝΑ . QcaL-1 68 101313 Conus quercinus μαλάκιο – Conidae . Κώνος βελανιδιάς
P58786 COW_CONRA επανεξεταστεί Contryphan -R ΝΑ . βρωμοκοντρυφάνη

Κόβεται σε 2 αλυσίδες

63 61198 Κώνος ακτίνα μαλάκιο – Conidae . Rayed κώνος
P58811 CA1A_ ΛΟΓΑΡΙΑΣΜΟΣ επανεξεταστεί Ρο- κωνοτοξίνη TIA ΝΑ . Ρω-ΤΙΑ 58 6495 Conus tulipa μαλάκιο – Conidae . Σαλιγκάρι κώνου κυνηγιού ψαριών
. Κώνος τουλίπας
Q5K0C5 016A_CONVR επανεξεταστεί Κονοτοξίνη 10 ΝΑ – 79 89427 Conus virginum μαλάκιο – Conidae . Παρθένος κώνος
B3FIA5 CVFA_CONVR επανεξεταστεί Κονοτοξίνη Vi15a ΝΑ . Κονοτοξίνη Vi15.l 74 8765 Conus virginum μαλάκιο – Conidae . Παρθένος κώνος

Το SANIST ορίστηκε να πραγματοποιεί την αναζήτηση της βάσης δεδομένων λαμβάνοντας υπόψη όλα τα πιθανά σημεία πρωτεΐνης και τις μετα-μεταφραστικές τροποποιήσεις και να εξετάζει τις αναδιατάξεις πρωτονίων. Δεν καθορίστηκαν κανόνες κοπής ενζύμων, αλλά ελήφθησαν υπόψη όλοι οι συνδυασμοί πρωτεϊνικών υποακολουθιών. Ο υπολογισμός της αναζήτησης στη βάση δεδομένων πραγματοποιήθηκε μέσω Γενικών Μονάδων Επεξεργασίας Γραφικών Επεξεργασίας (GPGPU).

Τα δεδομένα MS είναι διαθέσιμα στην πλατφόρμα ZENODO (βλ. ενότητα Διαθεσιμότητα δεδομένων ).

Αποτελέσματα και συζήτηση

Η παρουσία (ολιγο-)πεπτιδίων που χαρακτηρίζονται ως τοξικά συστατικά των ζωικών δηλητηρίων παρατηρήθηκε σε δείγματα πλάσματος και ούρων από ασθενείς μολυσμένους με SARS-CoV-2 και ποτέ σε δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από άτομα ελέγχου. Παραδείγματα χρωματογραφημάτων SACI-CIMS αναφέρονται στο Εικόνα 1 και Σχήμα 2 (πίνακες α και β), που δείχνει τα φάσματα που αποκτήθηκαν μέσω της τεχνολογίας LC-SACI-CIMS. σχήματα 2c και d δείχνουν τα φάσματα που ελήφθησαν χρησιμοποιώντας ESI που εκχυλίστηκε στον ίδιο χρόνο κατακράτησης. Τα SACI-CIMS προκαλούν υψηλότερες εντάσεις σήματος πιθανώς λόγω του χαμηλού κορεσμού παγίδας ιόντων.

Φιγούρα 1.

Ένα εξωτερικό αρχείο που περιέχει μια εικόνα, μια εικόνα κ.λπ. Το όνομα αντικειμένου είναι f1000research-10-78337-g0000.jpg

( α ) Βασική κορυφή LC Full Scan (MS), χρωματογράφημα διαδοχικής μάζας (MS/MS) ενός εξαγόμενου δείγματος πλάσματος ενός ασθενούς και ενός υποκειμένου ελέγχου και ( β ) μια ανάφλεξη μιας συγκεκριμένης περιοχής χρωματογράμματος (5,713–5,719 λεπτά). Η ανατίναξη δείχνει τις τέσσερις περιοχές απόκτησης δεδομένων: 1) Πλήρης σάρωση φάσματος μάζας που προέρχεται από το σύννεφο που περιέχει χαμηλά m/z μοριακά είδη; 2) Διαδοχικά φάσματα μάζας (MS/MS) φάσμα μάζας που προέρχεται από το νέφος που περιέχει χαμηλά m/z μοριακά είδη; 3) Φάσμα μάζας πλήρους σάρωσης που προέρχεται από το σύννεφο που περιέχει μεσαίο-υψηλό (MedHigh) m/z μοριακά είδη; 4) Διαδοχικά φάσματα μάζας (MS/MS) φάσμα μάζας που προέρχεται από το νέφος που περιέχει μεσαίο-υψηλό (MedHigh) m/z μοριακό είδος αναλογίας

Σχήμα 2.

Ένα εξωτερικό αρχείο που περιέχει μια εικόνα, μια εικόνα κ.λπ. Το όνομα αντικειμένου είναι f1000research-10-78337-g0001.jpg

Παραδείγματα φασμάτων μάζας πλήρους σάρωσης, που ελήφθησαν με ανάλυση δείγματος ούρων θετικών για τον COVID-19 και αποκτήθηκαν είδη νέφους ιόντων εστιακού διαλύτη που περιέχουν α ) χαμηλά, β ) ψηλά m/z που εξήχθησαν στη χρωματογραφική περιοχή 5,713–5,719 λεπτών και το πλήρες φάσμα μάζας σάρωσης ESI λήφθηκε με ανάλυση του ίδιου δείγματος και εξαγωγή του σήματος στον ίδιο χρόνο κατακράτησης εξαγωγής γ ) χαμηλά και δ ) υψηλή αναλογία m/z.

Αρκετά (ολιγο-)πεπτίδια (μεταξύ 70 και 115, ανάλογα με το δείγμα που αναλύθηκε) ταιριάζουν με διαφορετικές πρωτεΐνες ζωικού δηλητηρίου και τοξίνες όπως κωνοτοξίνες, φωσφολιπάσες Α2, μεταλλοπρωτεϊνάσες (86% των αναλογιών έχουν -log(e) υψηλότερο από 25). Αναφέρεται μια επισκόπηση 36 πρωτεϊνών που καλύπτονται από πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που βρέθηκαν στο Πίνακας 1 ; Οι λεπτομέρειες του -log(e) και τα ποσοστά ψευδούς ανακάλυψης αναφέρονται στο Πίνακας 2 . Παραδείγματα χαρακτηρισμού πεπτιδίων φασμάτων μάζας μαζί με τις οδούς κατακερματισμού ιόντων πεπτιδίου φαίνονται στο Εικόνα 3α . Όλα τα σήματα MS/MS αντιστοιχίστηκαν στις διαφορετικές σειρές κατακερματισμού Ν-τερματικού y,z (μπλε και μωβ χρώμα) και c-τερματικού b,c (κόκκινο και κίτρινο χρώμα) (βλ. Σχήμα 3β για λεπτομέρειες της σειράς κατακερματισμού). Στις καθορισμένες συνθήκες SACI-CIMS, διπλή χρέωση m/z πεπτιδικών ειδών μεσαίου-υψηλού μοριακού βάρους, επιτρέποντας υψηλή ακρίβεια ταυτοποίησης, σύμφωνα με ό,τι περιγράφεται ήδη στη βιβλιογραφία ότι επιτυγχάνονται υψηλοί στατιστικοί ρυθμοί ταυτοποίησης αναλύοντας είδη πεπτιδίου διπλά φορτισμένα με μεσαίο υψηλό μοριακό βάρος. Διαφορετικές ανωμαλίες κατακερματισμού με αναδιατάξεις πρωτονίων έχουν επίσης ανιχνευθεί και ληφθούν υπόψη στη φάση της επεξεργασίας δεδομένων. Μόνο φάσματα μάζας που παρουσιάζουν στατιστική – log(e) υψηλότερη από 10 και ένα ποσοστό ψευδούς ανακάλυψης χαμηλότερο από 0,05 λήφθηκαν υπόψη για την αναγνώριση (βλ. Εικόνα 3γ ). Το ποσοστό ψευδούς ανακάλυψης και η στατιστική βαθμολογία υπολογίστηκαν μέσω της προσέγγισης αντίστροφης ακολουθίας.

Πίνακας 2.

Κατάλογος πρωτεϊνών και το σχετικό -log(e) και αναλογία ψευδούς ανακάλυψης (FDR) που εκφράζονται ως τιμή p.
Πρωτεΐνη ταυτότητα Βάση δεδομένων -log(e) Τιμή p FDR
Κονοτοξίνη Pu6.1 D2DGD8 Uniprot 75 0.001
Κονοτοξίνη Vi15a B3FIA5 Uniprot 89 0.005
Υποτιθέμενη άλφα-κωνοτοξίνη Qc alphaL-1 A1X8B8 Uniprot 76 0.005
Κονοτοξίνη 10 Q5K0C5 Uniprot 76 0.001
Rho-conotoxin TIA P58811 Uniprot 54 0.001
Αναστολέας πρωτεάσης σερίνης τύπου Kunitz κωνοτοξίνη Cal9.1a D2Y488 Uniprot 67 0.001
Άλφα-κωνοτοξίνη Pu1.5 P0C8U9 Uniprot 57 0.002
Κονοτοξίνη Fla16d V5V893 Uniprot 67 0.003
Φωσφολιπάση A2 MALT0035C F5CPF1 Uniprot 87 0.003
Φωσφολιπάση Α2 AP-PLA2-I Q3C2C2 Uniprot 81 0.004
Όξινη φωσφολιπάση A2 PePLA2 Q2PG83 Uniprot 66 0.001
Βασική φωσφολιπάση A2 BFPA A6MEY4 Uniprot 69 0.001
Βασική φωσφολιπάση A2 PL-X P06860 Uniprot 70 0.001
Θραύσμα Ba του παράγοντα Β συμπληρώματος Q91900 Uniprot 74 0.001
Αλυσίδα όξινης φωσφολιπάσης Α2 ομόλογη υφασματοτοξίνη D P23028-1 Uniprot 73 0.002
Αλυσίδα όξινης φωσφολιπάσης Α2 ομόλογη υφασματοτοξίνη D P23028-2 Uniprot 65 0.002
Μη καταλυτική υπομονάδα ψευδαρίνης-C ενεργοποιητής προθρομβίνης δηλητηρίου Q7SZN0 Uniprot 60 0.002
Παράγοντας πήξης V Q593B6 Uniprot 61
Μη καταλυτική υπομονάδα oscutarin-C ενεργοποιητής προθρομβίνης δηλητηρίου Q58L91 Uniprot 87 0.001
Σύντομη νευροτοξίνη 4 Q9W7J9 Uniprot 69 0.001
Κονοτοξίνη Cl9.6 D6C4M3 Uniprot 58 0.002
Αλυσάση που μοιάζει με μεταλλοπρωτεϊνάση ψευδαργύρου Q8AWI5 Uniprot 57 0.003
Άλφα-ελαπιτοξίνη-Oh2b P82662 Uniprot 96 0.003
Σίγμα-κωνοτοξίνη GVIIIA P58924 Uniprot 43 0.002
Κονοτοξίνη Mr15.2 P0DM19 Uniprot 47 0.001
Κονοτοξίνη mr3g P0C1N5 Uniprot 74 0.001
Contryphan-R P58786 Uniprot 58 0.002
Αναστολέας μεταλλοπρωτεάσης δηλητηρίου φιδιού 02D01 A8YPR6 Uniprot 43 0.002
Νατριουρητικά πεπτίδια που ενισχύουν τη βραδυκινίνη και τύπου C P0C7P5 Uniprot 51 0.003
Νατριουρητικά πεπτίδια που ενισχύουν τη βραδυκινίνη και τύπου C Q9PW56 Uniprot 51 0.003
Μεταλλοπρωτεϊνάση ψευδαργύρου/αποσυντεγκρίνη Q698K8 Uniprot 49 0.004

Εικόνα 3.

Ένα εξωτερικό αρχείο που περιέχει μια εικόνα, μια εικόνα κ.λπ. Το όνομα αντικειμένου είναι f1000research-10-78337-g0002.jpg

Παραδείγματα χαρακτηρισμού πεπτιδίου φασμάτων μάζας μαζί με τις οδούς κατακερματισμού ιόντων πεπτιδίου.

Παράδειγμα του τρόπου με τον οποίο το σήμα MS/MS αντιστοιχίστηκε στο διαφορετικό Ν-τερματικό y,z (μπλε και μωβ χρώμα στον πίνακα a ) και c-τερματικό b,c (κόκκινο και κίτρινο χρώμα) σειρά κατακερματισμού (αναλυτικά στον πίνακα β ). Μόνο τα φάσματα μάζας που παρουσιάζουν στατιστική βαθμολογία -log(e) υψηλότερη από 10 και ψευδή ρυθμό ανακάλυψης μικρότερη από 0,05 λήφθηκαν υπόψη για την αναγνώριση (αναφέρεται στο πλαίσιο γ ). Το ποσοστό ψευδούς ανακάλυψης και η στατιστική βαθμολογία υπολογίστηκαν μέσω της προσέγγισης αντίστροφης ακολουθίας.

Μερικά από τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που βρέθηκαν χαρτογραφημένα στην ίδια πρωτεΐνη αναφοράς (UniprotKB: D2DGD8 ), αναφέρονται σε Εικόνα 4 : αυτά τα πεπτίδια βρέθηκαν στα πέντε δείγματα πλάσματος και στα τρία δείγματα κοπράνων.

Εικόνα 4.

Ένα εξωτερικό αρχείο που περιέχει μια εικόνα, μια εικόνα κ.λπ. Το όνομα αντικειμένου είναι f1000research-10-78337-g0003.jpg

Ευθυγράμμιση πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες με πρόδρομο Conotoxin Pu6.1.

Πρόδρομος κονοτοξίνης Pu6.1 από Το Conus pulicarius (UniprotKB: D2DGD8 ) είναι ευθυγραμμισμένο με τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που ταυτοποιήθηκαν σε τέσσερα από τα πέντε δείγματα πλάσματος. Όντας η πρωτεΐνη που εκκρίνεται και διασπάται, οι περιοχές πλούσιες σε προπεπτίδιο οδηγού και ώριμης κυστεΐνης επισημαίνονται με πράσινο, κίτρινο και κόκκινο, αντίστοιχα. Τα δεικνυόμενα πεπτίδια αντιστοιχούν στα μακρύτερα παρατηρηθέντα πεπτίδια, καθώς δεν κάναμε κάποια συγκεκριμένη επιλογή για εκκρινόμενες πρωτεΐνες, αναμένεται να υπάρχουν πρόδρομες ουσίες στα δείγματά μας. Κάθε αναγνωρισμένο πεπτίδιο που μοιάζει με τοξίνη ονομάζεται σύμφωνα με το δείγμα προέλευσης και τη μοναδικότητά του. Για καθένα από αυτά, ο αριθμός που αναφέρεται σε αγκύλες υποδεικνύει τον αριθμό των πανομοιότυπων τοξινών πεπτιδίων που προσδιορίζονται στο ίδιο δείγμα.

Οι τύποι των τοξικών πεπτιδίων που βρέθηκαν μοιάζουν με γνωστές κωνοτοξίνες, φωσφολιπάσες Α2, μεταλλοπρωτεϊνάσες, ενεργοποιητές προθρομβίνης, παράγοντες πήξης, που συνήθως υπάρχουν σε ζωικά δηλητήρια, τα οποία είναι γνωστό ότι έχουν υψηλή ειδικότητα και συγγένεια προς τα ανθρώπινα κανάλια ιόντων, τους υποδοχείς και τους μεταφορείς του νευρικού σύστημα, όπως ο νικοτινικός υποδοχέας ακετυλοχολίνης. Cheng et al. ανέφερε την ανακάλυψη ενός μοτίβου που μοιάζει με υπεραντιγόνο στην πρωτεΐνη S1 Spike, καθώς και δύο άλλα μοτίβα που μοιάζουν με νευροτοξίνες που έχουν ομοιότητες πεπτιδίου με τις νευροτοξίνες από Γένος Ophiophagus (κόμπρα) και Bungarus. Συμπεραίνουν ότι μοτίβα που μοιάζουν με νευροτοξίνες υπάρχουν σε προϊόντα πρωτεΐνης SARS-CoV-2, που δρουν ως πεπτίδια που μοιάζουν με νευροτοξίνες. Ελέγξαμε το πλήρες σύνολο πεπτιδίων που λάβαμε (εδώ αναφέρουμε μόνο 36 παραδείγματα) και εντοπίσαμε, σε δείγματα πλάσματος και κοπράνων, πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που χαρτογραφούνται στην κάπα 1α-μπουνγκαροτοξίνη, Κάπα 1β-μπουνγκαροτοξίνη από το Malayan krait, κάπα- 2-bungarotoxin και alpha-bungarotoxin from many-banded krait (Uniprot Accession Numbers Q8AY56 , Q8AY55 , P15816 και P60615 , αντίστοιχα), τα οποία αναφέρθηκαν από τον Cheng και τους συνεργάτες του. Επιπλέον, εξετάσαμε τις αλλαγές αμινοξέων που αναφέρονται επί του παρόντος στα δεδομένα GISAID , αναλύθηκε από CoV-GLUE-Viz (ενημέρωση 15/09/2021) , και εμφανίζεται στο Υ 674 QTQTNSPRRAR 685 αναγνωρίστηκε από αυτούς τους συγγραφείς ως ομόλογο με τα μοτίβα νευροτοξίνης των πρωτεϊνών του ζωικού δηλητηρίου. Παρατηρήσαμε την ύπαρξη παραλλαγών αμινοξέων που κάνει αυτό το μοτίβο ακόμα πιο παρόμοιο με τα μοτίβα νευροτοξίνης των πρωτεϊνών ζωικού δηλητηρίου (όπως οι παραλλαγές Q677S και T676A που παρατηρούνται σε αλληλουχίες που έχουν εκχωρηθεί στο PANGO Lineage B.1.596). Πειράματα για την αξιολόγηση της νευροτοξικότητας αυτών των πεπτιδίων και της πρωτεΐνης ακίδας σε τρισδιάστατο νευρωνικό/γλοιακό μοντέλο («νευροσφαίρες») που ελήφθη από πολυδύναμα νευρωνικά βλαστοκύτταρα που προέρχονται από ανθρώπινα βλαστοκύτταρα (iPS-NSCs) βρίσκονται επί του παρόντος σε εξέλιξη.

Αυτό που ακολουθεί είναι η προσπάθειά μας να αναπτύξουμε μια πιθανή σχέση μεταξύ της παρουσίας τους και της εξωπνευμονικής συμπτωματολογίας του COVID-19.

Κωνοτοξίνες

Οι κωνοτοξίνες είναι νευροτοξικά πεπτίδια που απομονώνονται από το δηλητήριο του θαλάσσιου (γένους Conus ) σαλιγκάρια κώνου. Στην ώριμη μορφή τους, αποτελούνται από 10 έως 30 υπολείμματα αμινοξέων, με συχνά έναν ή περισσότερους δισουλφιδικούς δεσμούς, οι οποίοι χρησιμοποιούνται για την ταξινόμηση τους σε δομικές κατηγορίες (μ-κωνοτοξίνες, ω-κωνοτοξίνες και α-κωνοτοξίνες είναι οι κύριες κατηγορίες). . Ο μηχανισμός δράσης των κωνοτοξινών δεν είναι ακόμη πλήρως κατανοητός . Μελέτες έχουν βρει ότι είναι σε θέση να ρυθμίζουν τη δραστηριότητα αρκετών υποδοχέων, συμπεριλαμβανομένων των καναλιών ιόντων, των υποδοχέων νικοτινικής ακετυλοχολίνης (nAChRs) και των ενζύμων αποδόμησης της ακετυλοχολίνης (ακετυλχολινεστεράσες), με αποτέλεσμα την αλλαγή των επιπέδων της ακετυλοχολίνης και της χολινεργικής μετάδοσης – . Όσον αφορά τις χολινεστεράσες, έχει προταθεί πιθανή συσχέτιση μεταξύ των επιπέδων χολινεστεράσης και της σοβαρότητας της πνευμονίας σε ασθενείς με COVID-19 .

Η παρουσία πεπτιδίων κωνοτοξίνης μπορεί να εξηγήσει την εμφάνιση πολλών συμπτωμάτων (όπως η υποσμία, η υπογευσία και τα τυπικά σημεία του συνδρόμου Guillain-Barre) που παρατηρούνται σε ορισμένους ασθενείς με COVID-19. Η παρουσία τους μπορεί να αλλάξει τη φυσιολογική λειτουργία των διαύλων ιόντων, των υποδοχέων νικοτινικής ακετυλοχολίνης και των επιπέδων ακετυλοχολίνης.

Φωσφολιπάσες Α2

Φωσφολιπάσες Α2 (PLA 2 , EC 3.1.1.4) υδρολύουν τα φωσφολιπίδια και οδηγούν σε απελευθέρωση λυσοφωσφατιδικού οξέος και αραχιδονικού οξέος . Το αραχιδονικό οξύ είναι ο κύριος πρόδρομος πολλών προφλεγμονωδών μεσολαβητών όπως το λευκοτριένιο, η θρομβοξάνη και η προσταγλανδίνη. ως συνέπεια, μη φυσιολογική παρουσία ενεργού PLA 2 μπορεί να προκαλέσει σοβαρή φλεγμονή . Σε δηλητήρια ζώων, PLA 2 δρουν ως νευροτοξικές πρωτεΐνες: υδρολύουν τα φωσφολιπίδια της μεμβράνης του άκρου του κινητικού νεύρου και την πλασματική μεμβράνη των σκελετικών μυών, πυροδοτώντας έτσι μια σοβαρή φλεγμονώδη εκφυλιστική απόκριση, η οποία με τη σειρά της οδηγεί σε εκφυλισμό του νευρικού άκρου και του σκελετικού μυός . Το φάρμακο δεξαμεθαζόνη μπορεί να αναστείλει τη σύνθεση προσταγλανδινών και το σχηματισμό λευκοτριενίων . Καθώς η δεξαμεθαζόνη εξακολουθεί να είναι η μόνη θεραπευτική που έχει αποδειχθεί αποτελεσματική κατά του νέου κοροναϊού σε ασθενείς με σοβαρά συμπτώματα, μπορεί να είναι ότι η θετική επίδραση αυτού του φαρμάκου σε ασθενείς με COVID-19 οφείλεται επίσης στη μείωση του PLA που προσδιορίζεται εδώ 2 -όπως πεπτίδια.

Μεταλλοπρωτεϊνάσες

Το τελευταίο παράδειγμα ταυτοποιημένων πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες είναι εκείνα που αναγνωρίζονται ως μεταλλοπρωτεϊνάσες που υπάρχουν σε ζωικά δηλητήρια, ένζυμα που εξαρτώνται από ψευδάργυρο ποικίλου μοριακού βάρους που έχουν οργάνωση πολλαπλών τομέων. Αυτά τα τοξικά ένζυμα προκαλούν αιμορραγία, τοπική μυονέκρωση, δερματική βλάβη και φλεγμονώδη αντίδραση . Έχει αναφερθεί ότι οι συμπτωματικοί ασθενείς με COVID-19 έχουν σημαντικά χαμηλότερα επίπεδα ψευδαργύρου σε σύγκριση με τους ελέγχους και ότι οι ασθενείς με έλλειψη ψευδαργύρου αναπτύσσουν περισσότερες επιπλοκές . Η παρουσία αυτής της συγκεκριμένης ομάδας πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες, τα οποία δεσμεύουν τον ψευδάργυρο, μπορεί να είναι ένας από τους λόγους για τόσο σημαντικά χαμηλά επίπεδα ψευδαργύρου σε συμπτωματικούς ασθενείς με COVID-19.

Αναζητήσεις ομοιότητας από TBLASTN με χαλαρές παραμέτρους στον ιστότοπο του Εθνικού Κέντρου Πληροφοριών Βιοτεχνολογίας (NCBI) (βλ. Μέθοδοι) αποκάλυψε (επιπλέον των αλληλουχιών mRNA από τα ζωικά είδη που αναφέρονται στο Πίνακας 1 ) σχεδόν πανομοιότυπες μικρές εκτάσεις (μέχρι 10 αμινοξέα) αυτών των πεπτιδίων σε πιθανές κωδικεύουσες περιοχές πολλών βακτηριακών και ιικών αλληλουχιών, αλλά δεν βρέθηκε κανένα μακρό δυναμικό κωδικοποιητικό πλαίσιο που να καλύπτει εξ ολοκλήρου κανένα από αυτά. Κατά συνέπεια, τη στιγμή της σύνταξης δεν έχουμε ακόμη εντοπίσει τη «γενετική πηγή» αυτών των πεπτιδίων, η οποία θα μπορούσε να είναι:

  • Το γονιδίωμα RNA SARS-CoV-2 με το σετ ανάγνωσης πρωτεϊνών, όπως προτείνεται από την Brogna , ο οποίος ανέφερε την ταυτοποίηση στο RNA του SARS-CoV-2 πολλών περιοχών που κωδικοποιούν ολιγοπεπτίδια (μήκους τεσσάρων-πέντε αμινοξέων) πανομοιότυπα με πεπτίδια νευροτοξίνης τυπικά των ζωικών δηλητηρίων.

  • Το γονιδίωμα SARS-CoV-2 διαβάζεται απευθείας από βακτήρια, με την προϋπόθεση ότι το γονιδίωμα SARS-CoV-2, ή μέρη του, είναι ικανό να αναπαραχθεί με έναν πιθανό τρόπο δράσης που μοιάζει με βακτηριοφάγο, όπως περιγράφηκε προηγουμένως .

  • Γονιδιώματα βακτηρίων, τα οποία, ως αντίδραση στην παρουσία του ιού, εκκρίνουν αυτά τα πεπτίδια. Αυτό θα μπορούσε να συμβεί χρησιμοποιώντας ακόμη άγνωστους και συζητημένους μηχανισμούς, όπως η εναλλακτική ανάγνωση λόγω ετερογένειας αλληλουχίας rRNA (όπως περιγράφεται στο , ), ή τη συμμετοχή μικρών βακτηριακών ncRNA (sRNAs), που είναι γνωστό ότι είναι βασικοί παράγοντες της γονιδιακής ρύθμισης υπό συνθήκες όπως η απόκριση στο στρες, η αίσθηση απαρτίας ή η λοιμογόνος δύναμη (σε αυτό το πλαίσιο, το 1984 Coleman et al . ανέφερε το micF μη κωδικοποιητικό RNA ως λειτουργικό βακτηριακό sRNA ).

  • Ένας συνδυασμός των παραπάνω π.χ. ο γενετικός κώδικας της «τοξίνης» υπάρχει στα βακτήρια και η έκφραση μπορεί να πυροδοτηθεί από τον SARS-CoV-2, ο οποίος δρα σαν εύκρατοι βακτηριοφάγοι, οι οποίοι είναι γνωστό ότι αλληλεπιδρούν με βακτήρια, έτσι ώστε να εκφράζουν (ή όχι) ορισμένα γονίδια, όπως περιγράφεται από τον Carey et al . .

Δεν έχει διεξαχθεί ακόμη μια λεπτομερής τρισδιάστατη ανάλυση δομικής ομοιότητας μεταξύ των πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες που βρέθηκαν και των πρωτεϊνών αναφοράς. Ως εκ τούτου, τη στιγμή της σύνταξης, μπορούμε μόνο να υποθέσουμε ότι αυτά τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες εμπλέκονται στις κλινικές εξωπνευμονικές εκδηλώσεις σε συμπτωματικούς ασθενείς με COVID-19. Σύμφωνα με τις γνώσεις μας, αυτά τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες δεν έχουν ποτέ ερευνηθεί σε ζώα που θεωρούνται δεξαμενές του SARS-CoV.

συμπεράσματα

Έχει παρατηρηθεί η παρουσία (ολιγο-)πεπτιδίων σχεδόν πανομοιότυπων με τοξικά συστατικά δηλητηρίων από ζώα. Τα δεδομένα και τα αποτελέσματα που αναφέρονται εδώ υποδηλώνουν μια συσχέτιση μεταξύ της νόσου COVID-19 και της απελευθέρωσης αυτών στο σώμα και εγείρουν μια σειρά ερωτημάτων:

  • Συμφωνούν αυτά τα ευρήματα με αυτά που προτάθηκαν από τον Tizabi et al . , δηλαδή ένας πιθανός θεραπευτικός ρόλος για τη νικοτίνη, τους νικοτινικούς αγωνιστές ή τους θετικούς αλλοστερικούς ρυθμιστές των νικοτινικών χολινεργικών υποδοχέων στον COVID-19;

  • Εάν προκληθεί από το SARS-CoV-2, μπορεί η παραγωγή πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες να εμπλέκεται στις νευρολογικές διαταραχές και τραυματισμούς που παρατηρούνται σε νοσηλευόμενους ασθενείς με COVID-19;

  • Εάν προκληθεί από το SARS-CoV-2, μπορεί η παραγωγή πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες να επηρεάσει σύνθετες ασθένειες που προφανώς προκαλούνται ή ενισχύονται από το COVID-19, όπως π.χ. το σύνδρομο Guillain-Barré ή τη νόσο του Πάρκινσον ?

  • Τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες σχετίζονται με τη μόλυνση από SARS-CoV-2 ή με άλλες ιογενείς λοιμώξεις ή, γενικότερα, η παρουσία τους σχετίζεται με την ασθένεια;

  • Τα ευρήματά μας υποστηρίζουν την πρόταση της Κοινοπραξίας iVAMP σχετικά με τις σχέσεις μεταξύ των ζωικών αδένων δηλητηρίου και του μικροπεριβάλλοντος των μικροοργανισμών;

Θεωρούμε ότι η άμεση κοινοποίηση αυτών των αποτελεσμάτων μπορεί να συμβάλει στο ξεμπλέξιμο του πολύπλευρου συνόλου κλινικών εκδηλώσεων σε συμπτωματικούς ασθενείς με COVID-19 και στην περαιτέρω κατανόηση των μηχανισμών που εμπλέκονται.

Διαθεσιμότητα δεδομένων

Υποκείμενα δεδομένα

Uniprot: Ομόλογος αναστολέας πρωτεάσης σερίνης τύπου Kunitz αλυσίδα βήτα-βουγαροτοξίνης Β1 [ Bungarus candidus (Μαλαϊανό krait)]. Αριθμός Q8AY46 , https://identifiers.org/uniprot: Q8AY46

Uniprot: Βασική φωσφολιπάση A2 BFPA, svPLA2, EC 3.1.1.4 (Αντιμικροβιακή φωσφολιπάση A2) (Φωσφατιδυλοχολίνη 2-ακυλυδρολάση) [ Bungarus fasciatus (Banded krait) (Pseudoboa fasciata)]. Αριθμός A6MEY4 , https://identifiers.org/Uniprot: A6MEY4

Uniprot: Φωσφολιπάση A2 MALT0035C, svPLA2, EC 3.1.1.4 [ Micrurus altirostris (Ουρουγουανό κοραλλιογενές φίδι) (Elaps altirostris)]. Αριθμός F5CPF1 , https://identifiers.org/Uniprot: F5CPF1

Uniprot: ψευδάργυρος μεταλλοπρωτεϊνάση-διισιντεγρίνης NaMP, EC 3.4.24.- (Snake venom metalloproteinase, SVMP) [ Naja atra (κινεζική κόμπρα)]. Αριθμός A8QL59 , https://identifiers.org/Uniprot: A8QL59

Uniprot: Όξινη φωσφολιπάση A2 D, svPLA2, EC 3.1.1.4 (APLA) (2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης) [ Naja sputatrix (Malayan spitting cobra) (Naja naja sputatrix)]. Αριθμός Q9I900 , https://identifiers.org/Uniprot:A9I900

Uniprot: Μη καταλυτική υπομονάδα omicarin-C ενεργοποιητής δηλητηρίου προθρομβίνης, vPA (πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίου) [Διάσπαση σε: βαριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας Omicarin-C. Ελαφριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας Omicarin-C] [ Oxyuranus microlepidotus (Inland taipan) (Diemenia microlepidota)]. Αριθμός πρόσβασης A58L90, https://identifiers.org/Uniprot: Q58L90

Uniprot: Μη καταλυτική υπομονάδα οσκουταρίνης-C ενεργοποιητής δηλητηρίου προθρομβίνης, vPA (πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίου) [Διάσπαση σε: βαριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας Oscutarin-C. Ελαφριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας Oscutarin-C] [ Oxyuranus scutellatus (Παράκτιο ταϊπάν)]. Αριθμός Q58L91 , https://identifiers.org/Uniprot: Q58L91

Uniprot: Short neurotoxin 4, SNTX4 (Alpha-neurotoxin 4) [ Pseudonaja textilis (Ανατολικό καφέ φίδι)]. Αριθμός Q9W7J9 , https://identifiers.org/Uniprot: Q9W7J9

Uniprot: Ομόλογη όξινη φωσφολιπάση Α2 αλυσίδα textilotoxin D, ομόλογο svPLA2 [ Pseudonaja textilis (Ανατολικό καφέ φίδι)]. Αριθμός P23028 , https://identifiers.org/Uniprot: P23028

Uniprot: Παράγοντας πήξης V [Διάσπαση σε: βαριά αλυσίδα παράγοντα πήξης V. Ελαφρά αλυσίδα παράγοντα πήξης V] [ Pseudonaja textilis (Ανατολικό καφέ φίδι)]. Αριθμός Q593B6 , https://identifiers.org/Uniprot: Q593B6

Uniprot: Μη καταλυτική υπομονάδα ψευδαρίνης-C ενεργοποιητής δηλητηρίου προθρομβίνης, PCNS, vPA (πρωτεΐνη παρόμοια με τον παράγοντα πήξης του δηλητηρίου) [Διάσπαση σε: βαριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας Pseutarin-C. Ελαφριά αλυσίδα μη καταλυτικής υπομονάδας ψευδαρίνης-C] [ Pseudonaja textilis (Ανατολικό καφέ φίδι)]. Αριθμός Q7SZN0 , https://identifiers.org/Uniprot: Q7SZN0

Uniprot: πρωτεΐνη δηλητηρίου πλούσια σε κυστεΐνη ENH1, CRVP (πλούσια σε κυστεΐνη εκκριτική πρωτεΐνη ENH1, CRISP-ENH1) [ Pseudoferania polylepis (νεροφίδι του Macleay) (Enhydris polylepis)]. Αριθμός Q2XXQ3 , https://identifiers.org/Uniprot: Q2XXQ3

Uniprot: Νατριουρητικά πεπτίδια που ενισχύουν τη βραδυκινίνη και τύπου C (Brain BPP-CNP, bBPP-CNP) (Evasin-CNP) [Διάσπαση σε 12 αλυσίδες] [ Bothrops jararaca (Jararaca)]. Αριθμός Q9PW56 , https://identifiers.org/Uniprot: Q9PW56

Uniprot: Αναστολέας μεταλλοπρωτεάσης δηλητηρίου φιδιού 02D01 (02E11) (10F07) (Svmpi-Eoc7) [Διαχωρίζεται σε 15 αλυσίδες] [ Echis ocellatus (Ocellated πριονιδωτή οξιά)]. Αριθμός A8YPR6 , https://identifiers.org/Uniprot: A8YPR6

Uniprot: Μεταλλοπρωτεϊνάση ψευδαργύρου/δισεντερίνη [Διάσπαση σε: Snake venom metalloproteinase brevilysin L4, SVMP (Snake venom metalloproteinase hxl-1, EC 3.4.24.-) ; Disintegrin brevicaudin-1a; Disintegrin brevicaudin-1b (Disintegrin adinbitor) (Disintegrin halystatin)] [Gloydius brevicaudus (κορεατικό φίδι slamosa) (Agkistrodon halys brevicaudus)]. Αριθμός Q698K8 , https://identifiers.org/Uniprot: Q698K8

Uniprot: Χαλυσάση παρόμοια με μεταλλοπρωτεϊνάση ψευδαργύρου, EC 3.4.24.- (Μεταλλοπρωτεϊνάση δηλητηρίου φιδιού, SVMP) (Πρωτεΐνη που προκαλεί αγγειακή απόπτωση, VAP) [ Gloydius halys (κινεζική υδάτινη μοκασίνα) (Agkistrodon halys)]. Αριθμός Q8AWI5 , https://identifiers.org/Uniprot: Q8AWI5

Uniprot: Alpha-elapitoxin-Oh2b, Alpha-EPTX-Oh2b (Alpha-neurotoxin) (LNTX3) (Long neurotoxin OH-6A/OH-6B) (OH-3) [ Ophiophagus hannah (King cobra) (Naja hannah)]. Αριθμός P82662 , https://identifiers.org/Uniprot: P82662

Uniprot: Όξινη φωσφολιπάση A2 PePLA2, svPLA2, EC 3.1.1.4 (2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης) [ Protobothrops elegans (Elegant pitviper) (Trimeresurus elegans)]. Αριθμός Q2PG83 , https://identifiers.org/Uniprot: Q2PG83

Uniprot: Βασική φωσφολιπάση A2 PL-X, svPLA2, EC 3.1.1.4 (2-ακυλυδρολάση φωσφατιδυλοχολίνης) [ Protobothrops elegans (Elegant pitviper) (Trimeresurus elegans)]. Αριθμός P06860 , https://identifiers.org/Uniprot: P06860

Uniprot: Νατριουρητικά πεπτίδια που ενισχύουν τη βραδυκινίνη και τύπου C (BPP-CNP) [Διαχωρισμένα σε έξι αλυσίδες] [ Protobothrops flavoviridis (Habu) (Trimeresurus flavoviridis)]. Αριθμός P0C7P5 , https://identifiers.org/Uniprot: P0C7P5

Uniprot: Φωσφολιπάση A2 AP-PLA2-I, PLA2, EC 3.1.1.4 (Φωσφατιδυλοχολίνη 2-ακυλυδρολάση 2) ​​[ Acanthaster planci (αστερίας με αγκάθια στέμμα)]. Αριθμός Q2C2C2 , https://identifiers.org/Uniprot: Q3C2C2

Uniprot: Κονοτοξίνη Cl9.6 [ Californiconus californicus (California cone) (Conus californicus)]. Αριθμός D6C4M3 , https://identifiers.org/Uniprot: D6C4M3

Uniprot: Αναστολέας πρωτεάσης σερίνης τύπου Kunitz κωνοτοξίνη Cal9.1a [ Californiconus californicus (California cone) (Conus californicus)]. Αριθμός D2Y488 , https://identifiers.org/Uniprot: D2Y488

Uniprot: Κονοτοξίνη Cl14.9 [ Californiconus californicus (California cone) (Conus californicus)]. Αριθμός D6C4J8 , https://identifiers.org/Uniprot: D6C4J8

Uniprot: Άλφα-κωνοτοξίνη CIB (C1.2) [ Conus catus (Κώνος γάτας)]. Αριθμός P0DPT2 , https://identifiers.org/Uniprot: P0DPT2

Uniprot: Conotoxin Fla16d (Conotoxin Fla16.1) [Διάσπαση σε: Conotoxin fla16a; Κονοτοξίνη fla16b; Κονοτοξίνη fla16c] [ Conus flavidus (Κίτρινος κώνος Ειρηνικού)], Αριθμός V5V893 , https://identifiers.org/Uniprot: V5V893

Uniprot: Sigma-conotoxin GVIIIA [ Conus geographus (Κώνος Γεωγραφίας) (Nubecula geographus)]. Αριθμός P58924 , https://identifiers.org/Uniprot: P58924

Uniprot: Conotoxin Mr15.2 (Mr094) [ Conus marmoreus (Μαρμάρινος κώνος)]. Αριθμός P0DM19 , https://identifiers.org/Uniprot: P0DM19

Uniprot: Conotoxin mr3g (Mr3.6) [ Conus marmoreus (Μαρμάρινος κώνος)]. Αριθμός P0C1N5 , https://identifiers.org/Uniprot: P0C1N5

Uniprot: Conotoxin Pu6.1 [ Conus pulicarius (Κώνος που τσιμπήθηκε από ψύλλους)]. Αριθμός D2DGD8 , https://identifiers.org/Uniprot: D2DGD8

Uniprot: Pu1.5 τύπου άλφα-κωνοτοξίνης [ Conus pulicarius (Κώνος που τσιμπήθηκε από ψύλλους)]. Αριθμός P0C8U9 , https://identifiers.org/Uniprot: P0C8U9

Uniprot: Υποθετική άλφα-κωνοτοξίνη Qc alphaL-1, QcaL-1 [ Conus quercinus (Κώνος βελανιδιάς)]. Αριθμός A1X8B8 , https://identifiers.org/Uniprot: A1X8B8

Uniprot: Contryphan-R (Bromocontryphan) [Διάσπαση σε: [Des-Gly1]-contryphan-R] [ Conus radiatus (Rayed cone)]. Αριθμός P58786 , https://identifiers.org/Uniprot: P58786

Uniprot: Rho-conotoxin TIA, Rho-TIA [ Conus tulipa (Σαλιγκάρι κώνου κυνηγιού ψαριών) (Κώνος τουλίπας)]. Αριθμός P58811 , https://identifiers.org/Uniprot: P58811

Uniprot: Conotoxin 10 [ Conus virgo (Παρθένος κώνος)]. Αριθμός Q5K0C5 , https://identifiers.org/Uniprot: Q5K0C5

Uniprot: Conotoxin Vi15a (Vi15.1) [ Conus virgo (Παρθένος κώνος)]. Αριθμός B3FIA5 , https://identifiers.org/Uniprot: B3FIA5

Zenodo: Υποκείμενα δεδομένα για «Πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες σε δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από ασθενείς με COVID-19», https://doi.org/10.5281/zenodo.4903154

Αυτό το έργο περιέχει τα ακόλουθα υποκείμενα δεδομένα:

  • Αρχείο δεδομένων 1: Toxins.fasta

  • Αρχείο δεδομένων 2: Toxins.mgf

Τα δεδομένα είναι διαθέσιμα σύμφωνα με τους όρους του Creative Commons Attribution 4.0 International License (CC-BY4.0)

Συγκατάθεση

Τα ανθρώπινα βιολογικά δείγματα που χρησιμοποιήθηκαν στον πειραματισμό συλλέχθηκαν και χρησιμοποιήθηκαν με τη ρητή ελεύθερη και ενημερωμένη γραπτή συγκατάθεση του ατόμου από το οποίο ελήφθη το υλικό, σύμφωνα με την ισχύουσα νομοθεσία.

Ευχαριστίες

Οι συγγραφείς ευχαριστούν τη Martina Larini και τη Simone Madama για την αναθεώρηση του χαρτιού.

Σημειώσεις

[έκδοση 2; αξιολόγηση από ομοτίμους: 2 εγκεκριμένα]

Δήλωση Χρηματοδότησης

Η χρηματοδότηση χορηγήθηκε από το Κοινό Κέντρο Ερευνών της Ευρωπαϊκής Επιτροπής. Οι χρηματοδότες δεν είχαν κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, στη συλλογή και ανάλυση δεδομένων, στην απόφαση για δημοσίευση ή στην προετοιμασία του χειρογράφου.

Οι χρηματοδότες δεν είχαν κανένα ρόλο στο σχεδιασμό της μελέτης, στη συλλογή και ανάλυση δεδομένων, στην απόφαση για δημοσίευση ή στην προετοιμασία του χειρογράφου.

Δηλώσεις

Το επιστημονικό αποτέλεσμα που εκφράζεται δεν συνεπάγεται μια πολιτική θέση της Ευρωπαϊκής Επιτροπής. Ούτε η Ευρωπαϊκή Επιτροπή ούτε οποιοδήποτε πρόσωπο που ενεργεί για λογαριασμό της Επιτροπής είναι υπεύθυνο για τη χρήση που μπορεί να γίνει αυτής της δημοσίευσης.

βιβλιογραφικές αναφορές

1. Gupta Α, Madhavan MV, Sehgal Κ, et αϊ. : Εξωπνευμονικές εκδηλώσεις του COVID-19. Nat Med. 2020; 26 ( 7 ):1017–1032. 10.1038/s41591-020-0968-3 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
2. Liotta EM, Batra A, Clark JR, et al. : Συχνές νευρολογικές εκδηλώσεις και νοσηρότητα που σχετίζεται με την εγκεφαλοπάθεια σε ασθενείς με Covid-19. Ann Clin Transl Neurol. 2020; 7 ( 11 ):2221–2230. 10.1002/acn3.51210 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
3. Frontera JA, Sabadia S, Lalchan R, et al. : Μια προοπτική μελέτη νευρολογικών διαταραχών σε νοσηλευόμενους ασθενείς με COVID-19 στην πόλη της Νέας Υόρκης. Νευρολογία. 2021; 96 ( 4 ):e575–e586. 10.1212/WNL.0000000000010979 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
4. Messner CB, Demichev V, Wendisch D, et al. : Η Clinical Proteomics Ultra-High-Throughput αποκαλύπτει ταξινομητές της λοίμωξης COVID-19. Cell Syst. 2020; 11 ( 1 ):11–24.e4. 10.1016/j.cels.2020.05.012 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
5. Shajahan Α, Supekar NT, Gleinich AS, et al. : Συναγωγή του προφίλ Ν- και Ο-γλυκοζυλίωσης της πρωτεΐνης ακίδας του νέου κοροναϊού SARS-CoV-2. Γλυκοβιολογία. 2020; 30 ( 12 ):981–988. 10.1093/glycob/cwaa042 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
6. Terracciano R, Preianò M, Fregola A, et al. : Χαρτογράφηση της αλληλεπίδρασης πρωτεΐνης-ξενιστή SARS-CoV-2 με φασματομετρία μάζας καθαρισμού συγγένειας και επισήμανση βιοτίνης εξαρτώμενης από την εγγύτητα: Μια ορθολογική και απλή διαδρομή για την ανακάλυψη θεραπειών κατά του SARS-CoV-2 που κατευθύνονται από τον ξενιστή. Int J Mol Sci. 2021; 22 ( 2 ):532. 10.3390/ijms22020532 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
7. Gouveia D, Grenga L, Gaillard JC, et al. : Σύντομη λίστα πεπτιδίων SARS-CoV-2 για Στοχευμένες Μελέτες από Πειραματικά Δεδομένα Διαδοχικής Φασματομετρίας Μαζικής Απόκτησης Δεδομένων. Proteomics. 2020; 20 ( 14 ):e2000107. 10.1002/pmic.202000107 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
8. Gouveia D, Miotello G, Gallais F, et al. : Πρωτοτυποποίηση του ιού SARS-CoV-2 από ρινοφαρυγγικά επιχρίσματα: Μια απόδειξη της ιδέας που επικεντρώνεται σε ένα παράθυρο φασματομετρίας μάζας 3 λεπτών. J Proteome Res. 2020; 19 ( 11 ):4407–4416. 10.1021/acs.jproteome.0c00535 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
9. Arzoni A, Bernardi LR, Cristoni S: Φασματομετρία μάζας κινητικότητας ιόντων νέφους στην πηγή. Φάσμα μάζας Rapid Commun. 2015; 29 ( 7 ):690–694. 10,1002/cm.7136 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
10. Cristoni S, Dusi G, Brambilla P, et al. : SANIST: βελτιστοποίηση τεχνολογίας για την ταυτοποίηση των ενώσεων με βάση την οδηγία της Ευρωπαϊκής Ένωσης με εφαρμογές σε εγκληματολογικές, φαρμακευτικές και αναλύσεις τροφίμων. J Mass Spectrom. 2017; 52 ( 1 ):16–21. 10.1002/jms.3895 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
11. Cristoni S, Rossi Bernardi L, Larini M, et al. : Πρόβλεψη και πρόληψη της εντερικής δυσβίωσης με βάση τον φαρμακολογικό μεταβολισμό της μικροχλωρίδας του εντέρου. Φάσμα μάζας Rapid Commun. 2019; 33 ( 14 ):1221–1225. 10.1002/cm.8461 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
12. Albini A, Briga D, Conti M, et al. : SANIST: μια πλατφόρμα ταχείας φασματομετρίας μάζας SACI/ESI συλλογής και επεξεργασίας δεδομένων για την επαλήθευση πιθανών υποψήφιων βιοδεικτών. Φάσμα μάζας Rapid Commun. 2015; 29 ( 19 ):1703–1710. 10,1002/cm.7270 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
13. Eizo O, Kyoichi M, Goro S: Ο πολυμερισμός του ακετονιτριλίου παρουσία όξινων και βασικών ουσιών. Bull Chem Soc Jpn. 1966; 39 ( 6 ):1182–1185. 10.1246/bcsj.39.1182 [ CrossRef ] [ ]
14. Cristoni S, Rubini S, Bernardi LR: Ανάπτυξη και εφαρμογές επιφανειακά ενεργοποιημένου χημικού ιονισμού. Mass Spectrom Rev. 2007; 26 ( 5 ):645–56. 10.1002/μαζ.20143 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
15. Cristoni S, Zingaro L, Canton C, et al. : Επιφανειακά ενεργοποιημένος χημικός ιονισμός και χρωματογραφία ανταλλαγής κατιόντων για την ανάλυση της εντεροτοξίνης A. J Mass Spectrom. 2009; 44 ( 10 ):1482–8. 10.1002/jms.1636 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
16. Brogna C, Cristoni S, Petrillo Μ, et al. : Υποκείμενα δεδομένα για: Πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες σε δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων από ασθενείς με COVID-19. Zenodo. 2021. 10.5281/zenodo.4903154 [ CrossRef ] [ ]
17. Κοινοπραξία UniProt: UniProt: ένας παγκόσμιος κόμβος γνώσης πρωτεϊνών. Nucleic Acids Res. 2019; 47 ( D1 ):D506–D515. 10.1093/nar/gky1049 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
18. Altschul SF, Gish W, Miller W, et al. : Βασικό εργαλείο αναζήτησης τοπικής ευθυγράμμισης. J ΜοΙ ΒίοΙ. 1990; 215 ( 3 ):403–410. 10.1016/S0022-2836(05)80360-2 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
19. Johnson Μ, Zaretskaya Ι, Raytselis Y, et al. : NCBI BLAST: καλύτερη διεπαφή ιστού. Nucleic Acids Res. 2008; 36 ( Πρόβλημα διακομιστή Web ):W5–W9. 10.1093/nar/gkn201 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
20. Schoch CL, Ciufo S, Domrachev Μ, et al. : NCBI Taxonomy: μια ολοκληρωμένη ενημέρωση για την επιμέλεια, τους πόρους και τα εργαλεία. Βάση δεδομένων (Οξφόρδη). 2020; 2020 : baaa062. 10.1093/βάση δεδομένων/baaa062 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
21. Cheng MH, Zhang S, Porritt RA, et al. : Υπεραντιγονικός χαρακτήρας ενός ένθετου μοναδικού για την ακίδα SARS-CoV-2 που υποστηρίζεται από λοξό ρεπερτόριο TCR σε ασθενείς με υπερφλεγμονή. Proc Natl Acad Sci US A. 2020; 117 ( 41 ):25254–25262. 10.1073/πνας.2010722117 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
22. Shu Y, McCauley J: GISAID: Παγκόσμια πρωτοβουλία για την κοινή χρήση όλων των δεδομένων για τη γρίπη – από το όραμα στην πραγματικότητα. Euro Surveill. 2017; 22 ( 13 ):30494. 10.2807/1560-7917.ES.2017.22.13.30494 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
23. Singer J, Gifford R, Cotten M, et al. : CoV-GLUE: Μια διαδικτυακή εφαρμογή για την παρακολούθηση της γονιδιωματικής παραλλαγής SARS-CoV-2. Preprints.org. 2020; 4 :100016. 10.20944/προεκτυπώσεις202006.0225.v1 [ CrossRef ] [ ]
24. Layer RT, McIntosh JM: Κονοτοξίνες: Θεραπευτική Δυνατότητα και Εφαρμογή. Mar Drugs. 2006; 4 ( 3 ):119–142. 10,3390/md403119 [ CrossRef ] [ ]
25. Cestèle S, Catterall WA: Μοριακοί μηχανισμοί δράσης νευροτοξίνης σε κανάλια νατρίου που καλύπτονται από τάση. Biochimie. 2000; 82 ( 9–10 ):883–892. 10.1016/s0300-9084(00)01174-3 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
26. Lebbe EK, Peigneur S, Wijesekara I, et al. : Κονοτοξίνες που στοχεύουν στους υποδοχείς νικοτινικής ακετυλοχολίνης: Μια επισκόπηση. Mar Drugs. 2014; 12 ( 5 ):2970–3004. 10,3390/md12052970 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
27. Prasasty V, Radifar M, Istyastono E: Φυσικά πεπτίδια στην ανακάλυψη φαρμάκων που στοχεύουν την ακετυλοχολινεστεράση. Μόρια. 2018; 23 ( 9 ):2344. 10,3390/μόρια23092344 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
28. Nakajima K, Abe T, Saji R, et al. : Η χολινεστεράση του ορού σχετίζεται με τη σοβαρότητα και τη θνησιμότητα από πνευμονία COVID-19. J Infect. 2021; 82 ( 2 ):282–327. 10.1016/j.jinf.2020.08.021 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
29. Harris JB, Scott-Davey T: Εκκρινόμενες φωσφολιπάσες Α 2 of Snake Venoms: Effects on the Peripheral Neuromuscular System with Comments on the Role of Phospholipases A 2 στις Διαταραχές του ΚΝΣ και τις χρήσεις τους στη βιομηχανία. Τοξίνες (Βασιλεία). 2013; 5 ( 12 ):2533–2571. 10,3390/τοξίνες5122533 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
30. Teixeira C, Fernandes CM, Leiguez E, et al. : Φλεγμονή που προκαλείται από δηλητήρια οχιών φιδιών που ενεργοποιούν τα αιμοπετάλια: Προοπτικές για τη θρομβοφλεγμονή. Front Immunol. 2019; 10 :2082. 10.3389/fimmu.2019.02082 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
31. Goppelt-Struebe M, Wolter D, Resch K: Τα γλυκοκορτικοειδή αναστέλλουν τη σύνθεση προσταγλανδινών όχι μόνο στο επίπεδο της φωσφολιπάσης Α 2 αλλά και σε επίπεδο κυκλο-οξυγενάσης/ισομεράσης PGE. Br J Pharmacol. 1989; 98 ( 4 ):1287–1295. 10.1111/j.1476-5381.1989.tb12676.x [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
32. RECOVERY Collaborative Group; Horby P, Lim WS, et al. : Δεξαμεθαζόνη σε νοσηλευόμενους ασθενείς με Covid-19 . – Προκαταρκτική αναφορά. N Engl J Med. 2021; 384 ( 8 ):693–704. 10.1056/NEJMoa2021436 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
33. Teixeira Cde F, Fernandes CM, Zuliani JP, et al. : Φλεγμονώδεις επιδράσεις μεταλλοπρωτεϊνασών δηλητηρίου φιδιών. Mem Inst Oswaldo Cruz. 2005; 100 Suppl 1 :181–184. 10.1590/s0074-02762005000900031 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
34. Jothimani D, Kailasam E, Danielraj S, et al. : COVID-19: Κακή έκβαση σε ασθενείς με ανεπάρκεια ψευδαργύρου. Int J Infect Dis. 2020; 100 :343–349. 10.1016/j.ijid.2020.09.014 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
35. Brogna C: Ο διπλός παθογόνος μηχανισμός του ιού Covid-19. Μια νέα προοπτική .2020. 10.20944/preprints202004.0165.v2 [ CrossRef ] [ ]
36. Petrillo Μ, Brogna C, Cristoni S, et al. : Η αύξηση του φορτίου RNA του SARS-CoV-2 σε δείγματα κοπράνων προτρέπει την επανεξέταση της βιολογίας του SARS-CoV-2 και της επιδημιολογίας του COVID-19 [έκδοση 1. αξιολόγηση από ομοτίμους: 1 εγκεκριμένο, 1 εγκεκριμένο με επιφυλάξεις]. F1000 Res. 2021; 10 :370. 10.12688/f1000research.52540.1 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
37. Lilleorg S, Reier K, Volõnkin P, et al. : Φαινοτυπικές επιδράσεις των παράλογων ριβοσωμικών πρωτεϊνών bL31A και bL31B σε Ε. coli . Sci Rep. 2020; 10 ( 1 ):11682. 10.1038/s41598-020-68582-2 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
38. Chen YX, Xu ZY, Ge X, et al. : Επιλεκτική μετάφραση από εναλλακτικά βακτηριακά ριβοσώματα. Proc Natl Acad Sci US A. 2020; 117 ( 32 ):19487–19496. 10.1073/πνας.2009607117 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
39. Coleman J, Green PJ, Inouye M: Η χρήση RNA συμπληρωματικών σε συγκεκριμένα mRNA για τη ρύθμιση της έκφρασης μεμονωμένων βακτηριακών γονιδίων. Κύτταρο. 1984; 37 ( 2 ):429–436. 10.1016/0092-8674(84)90373-8 [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
40. Carey JN, Mettert EL, Fishman-Engel DR, et al. : Η ενσωμάτωση του φάγου αλλάζει την αναπνευστική στρατηγική του ξενιστή του. eLife. 2019; 8 : e49081. 10.7554/eLife.49081 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
41. Tizabi Y, Getachew B, Copeland RL, et al. : Η νικοτίνη και το νικοτινικό χολινεργικό σύστημα στον COVID-19. FEBS J. 2020; 287 ( 17 ):3656–3663. 10.1111/φεβ.15521 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
42. Toscano G, Palmerini F, Ravaglia S, et al. : Σύνδρομο Guillain–Barré που σχετίζεται με τον SARS-CoV-2. N Engl J Med. 2020; 382 ( 26 ):2574–2576. 10.1056/NEJMc2009191 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
43. Pavel A, Murray DK, Stoessl AJ: COVID-19 και επιλεκτική ευαισθησία στη νόσο του Πάρκινσον. Lancet Neurol. 2020; 19 ( 9 ):719. 10.1016/S1474-4422(20)30269-6 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]
44. Ul-Hasan S, Rodríguez-Román Ε, Reitzel AM, et al. : Το αναδυόμενο πεδίο της μικροβιωμικής του δηλητηρίου για την εξερεύνηση του δηλητηρίου ως μικροπεριβάλλοντος και η αντίστοιχη Πρωτοβουλία για τα Μικροβιολογικά και Παράσιτα που σχετίζονται με το Δηλητήριο (iVAMP). Τοξικόν Χ. 2019; 4 :100016. 10.1016/j.toxcx.2019.100016 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]

Απάντηση αναθεωρητή για την έκδοση 2

Moshe Arditi , Διαιτητής 1
1 Τμήμα Παιδιατρικής, Τμήμα Παιδιατρικών Λοιμωδών Νοσημάτων και Ανοσολογίας, Cedars-Sinai Medical Center, Los Angeles, CA, USA
Ανταγωνιστικά συμφέροντα: Δεν αποκαλύφθηκαν ανταγωνιστικά συμφέροντα.
Ημερομηνία επανεξέτασης: 29 Οκτωβρίου 2021. Κατάσταση: Εγκρίθηκε. doi: 10.5256/f1000research.78337.r96937

Εγκρίνω το χαρτί όπως είναι τώρα – το χαρτί είναι εξαιρετικό τώρα.

Παρουσιάζεται το έργο με σαφήνεια και ακρίβεια και παραθέτει την τρέχουσα βιβλιογραφία;

Εν μέρει

Εάν ισχύει, είναι κατάλληλη η στατιστική ανάλυση και η ερμηνεία της;

Ναί

Είναι διαθέσιμα όλα τα δεδομένα πηγής στα οποία βασίζονται τα αποτελέσματα για να διασφαλιστεί η πλήρης αναπαραγωγιμότητα;

Εν μέρει

Είναι ο σχεδιασμός της μελέτης κατάλληλος και η εργασία είναι τεχνικά ορθή;

Ναί

Τα συμπεράσματα που εξάγονται υποστηρίζονται επαρκώς από τα αποτελέσματα;

Ναί

Παρέχονται επαρκείς λεπτομέρειες μεθόδων και αναλύσεων ώστε να επιτρέπεται η αναπαραγωγή από άλλους;

Ναί

Εμπειρογνωμοσύνη κριτικού:

ΝΑ

Επιβεβαιώνω ότι έχω διαβάσει αυτήν την υποβολή και πιστεύω ότι έχω το κατάλληλο επίπεδο εμπειρογνωμοσύνης για να επιβεβαιώσω ότι είναι αποδεκτού επιστημονικού επιπέδου.

    Απάντηση αναθεωρητή για την έκδοση 2

    Paolo Grumati , Διαιτητής 1
    1 Telethon Institute of Genetics and Medicine (TIGEM), Pozzuoli, Ιταλία
    Ανταγωνιστικά συμφέροντα: Δεν αποκαλύφθηκαν ανταγωνιστικά συμφέροντα.
    Ημερομηνία επανεξέτασης: 2021 Οκτ. 18. Κατάσταση: Εγκρίθηκε. doi: 10.5256/f1000research.78337.r96936

    Ο συγγραφέας αναφέρθηκε στα ζητούμενα σημεία.

    Παρουσιάζεται το έργο με σαφήνεια και ακρίβεια και παραθέτει την τρέχουσα βιβλιογραφία;

    Ναί

    Εάν ισχύει, είναι κατάλληλη η στατιστική ανάλυση και η ερμηνεία της;

    Οχι

    Είναι διαθέσιμα όλα τα δεδομένα πηγής στα οποία βασίζονται τα αποτελέσματα για να διασφαλιστεί η πλήρης αναπαραγωγιμότητα;

    Εν μέρει

    Είναι ο σχεδιασμός της μελέτης κατάλληλος και η εργασία είναι τεχνικά ορθή;

    Εν μέρει

    Τα συμπεράσματα που εξάγονται υποστηρίζονται επαρκώς από τα αποτελέσματα;

    Οχι

    Παρέχονται επαρκείς λεπτομέρειες μεθόδων και αναλύσεων ώστε να επιτρέπεται η αναπαραγωγή από άλλους;

    Εν μέρει

    Εμπειρογνωμοσύνη κριτικού:

    βιολογία

    Επιβεβαιώνω ότι έχω διαβάσει αυτήν την υποβολή και πιστεύω ότι έχω το κατάλληλο επίπεδο εμπειρογνωμοσύνης για να επιβεβαιώσω ότι είναι αποδεκτού επιστημονικού επιπέδου.

      Απάντηση αναθεωρητή για την έκδοση 1

      Moshe Arditi , Διαιτητής 1
      1 Τμήμα Παιδιατρικής, Τμήμα Παιδιατρικών Λοιμωδών Νοσημάτων και Ανοσολογίας, Cedars-Sinai Medical Center, Los Angeles, CA, USA
      Ανταγωνιστικά συμφέροντα: Δεν αποκαλύφθηκαν ανταγωνιστικά συμφέροντα.
      Ημερομηνία αξιολόγησης: 2021 Οκτ. 5. Κατάσταση: Εγκρίθηκε με κρατήσεις. doi: 10.5256/f1000research.57783.r93677

      Οι ερευνητές αναφέρουν την ταυτοποίηση πεπτιδίων που μοιάζουν με τοξίνες σε δείγματα ασθενών με COVID-19 (δείγματα πλάσματος, ούρων και κοπράνων) χρησιμοποιώντας φασματομετρία μάζας κινητικότητας ιόντων νέφους με υγρή χρωματογραφία. Οι ερευνητές χρησιμοποίησαν μια κοόρτη μελέτης (για το πλάσμα) 15 ασθενών με COVID 19 από διαφορετικές πόλεις της Ιταλίας και από 5 μη μολυσμένα άτομα ελέγχου. Συνέλεξαν δείγματα ούρων από 2 ασθενείς με COVID19 και 2 μάρτυρες και δείγματα κοπράνων από 3 ασθενείς με COVID19 και 3 μάρτυρες. Αναφέρουν ότι πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες, σχεδόν πανομοιότυπα με τοξικά συστατικά όπως κωνοτοξίνες, φωσφολιπάσες, φωσφοδιεστεράσες κ.λπ. εντοπίστηκαν από ασθενείς με COVID19, αλλά όχι σε δείγματα ελέγχου. Αναφέρουν μια επισκόπηση 36 πρωτεϊνών που καλύπτονται από πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που έχουν βρει στο πλάσμα ασθενών με COVID1. Αυτά τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που ανακάλυψαν μοιάζουν πολύ με διάφορες νευροτοξίνες, όπως οι άλφα κονοτοξίνες, οι άλφα κομπρατοξίνες ή παρόμοιες με τις μπουνγαροτοξίνες, όλες γνωστές ως νευροτοξίνες.

      Αυτές είναι πολύ σημαντικές παρατηρήσεις, οι συγγραφείς θέτουν το ερώτημα ότι η μόλυνση από τον COVID-19 προκαλεί κατά κάποιον τρόπο αυτά τα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες στον ξενιστή και αν ναι, εάν αυτά τα πεπτίδια που μοιάζουν με νευροτοξίνες ίσως παίζουν λειτουργικό ρόλο στα νευρολογικά ευρήματα που είναι συσχετίζεται συχνά με μόλυνση από COVID-19. Ένα πολύ σημαντικό και δυνητικά κρίσιμο άρθρο που πρέπει να αναφερθεί στη συζήτηση και που οι συγγραφείς έχουν χάσει δημοσιεύτηκε πρόσφατα από τη Mary Hongying Cheng et al . (2020 ) όπου οι ερευνητές ανακάλυψαν ένα μοτίβο που μοιάζει με υπεραντιγόνο στην πρωτεΐνη S1 Spike, καθώς και δύο άλλες νευροτοξίνες που έχουν πεπτιδικές ομοιότητες με την άλφα κομπρατοξίνη και την άλφα μπουνγκαροτοξίνη, την άλφα κομπρατοξίνη κ.λπ. Δεδομένου αυτού του εγγράφου PNAS, είναι πλέον σαφές ότι το SARS -Ο ιός CoV2 περιέχει ήδη πεπτίδια που μοιάζουν με νευροτοξίνες. Θα ήταν απίστευτα ενδιαφέρον να δούμε εάν τα πεπτίδια που μοιάζουν με νευροτοξίνες που περιγράφονται και ανακαλύφθηκαν σε αυτό το έγγραφο PNAS υπάρχουν στα πεπτίδια που μοιάζουν με τοξίνες που περιγράφονται σε αυτή τη συγκεκριμένη μελέτη. Θα κάνει αυτό το έγγραφο και τη συζήτησή του πολύ πιο αποτελεσματικό. Τουλάχιστον το έγγραφο PNAS θα πρέπει να συζητείται και να αναφέρεται.

      Παρουσιάζεται το έργο με σαφήνεια και ακρίβεια και παραθέτει την τρέχουσα βιβλιογραφία;

      Εν μέρει

      Εάν ισχύει, είναι κατάλληλη η στατιστική ανάλυση και η ερμηνεία της;

      Ναί

      Είναι διαθέσιμα όλα τα δεδομένα πηγής στα οποία βασίζονται τα αποτελέσματα για να διασφαλιστεί η πλήρης αναπαραγωγιμότητα;

      Εν μέρει

      Είναι ο σχεδιασμός της μελέτης κατάλληλος και η εργασία είναι τεχνικά ορθή;

      Ναί

      Τα συμπεράσματα που εξάγονται υποστηρίζονται επαρκώς από τα αποτελέσματα;

      Ναί

      Παρέχονται επαρκείς λεπτομέρειες μεθόδων και αναλύσεων ώστε να επιτρέπεται η αναπαραγωγή από άλλους;

      Ναί

      Εμπειρογνωμοσύνη κριτικού:

      Ανοσολογία, Λοιμώδη Νοσήματα, Έμφυτες Ανοσολογικές Αποκρίσεις

      Επιβεβαιώνω ότι διάβασα αυτήν την υποβολή και πιστεύω ότι διαθέτω το κατάλληλο επίπεδο εμπειρογνωμοσύνης για να επιβεβαιώσω ότι είναι αποδεκτού επιστημονικού επιπέδου, ωστόσο διατηρώ σημαντικές επιφυλάξεις, όπως περιγράφεται παραπάνω.

      Βιβλιογραφικές αναφορές

      1. : Υπεραντιγονικός χαρακτήρας ενός ένθετου μοναδικού για την ακίδα SARS-CoV-2 που υποστηρίζεται από λοξό ρεπερτόριο TCR σε ασθενείς με υπερφλεγμονή . Πρακτικά της Εθνικής Ακαδημίας Επιστημών .2020; 117 ( 41 ): 10.1073/πνας.2010722117 25254-25262 10.1073/πνας.2010722117 [ δωρεάν άρθρο PMC ] [ PubMed ] [ CrossRef ] [ ]

      Απάντηση αναθεωρητή για την έκδοση 1

      Paolo Grumati , Διαιτητής 1
      1 Telethon Institute of Genetics and Medicine (TIGEM), Pozzuoli, Ιταλία
      Ανταγωνιστικά συμφέροντα: Δεν αποκαλύφθηκαν ανταγωνιστικά συμφέροντα.
      Ημερομηνία κριτικής: 2021 9 Αυγούστου. Κατάσταση: Εγκρίθηκε με κρατήσεις. doi: 10.5256/f1000research.57783.r90696

      12 Αυγούστου 2021: Αυτή η αναφορά αξιολόγησης από ομοτίμους δημοσιεύτηκε αρχικά με την κατάσταση Μη Εγκεκριμένη, αλλά ο κριτικός έχει ειδοποιήσει έκτοτε τη συντακτική ομάδα ότι αυτό δεν είχε σκοπό και ότι θα έπρεπε να είναι Εγκεκριμένο με επιφυλάξεις. Η κατάσταση έγκρισης της αναφοράς έχει ενημερωθεί για να αντικατοπτρίζει αυτό.

      Στο παρόν χειρόγραφο οι συγγραφείς πρότειναν μια ενδιαφέρουσα συνέπεια της μόλυνσης από τον COVID 19. Η ιδέα είναι ότι η μόλυνση από τον COVID προκαλεί την παραγωγή τοξινών που είναι υπεύθυνες για τις συγκεκριμένες κλινικές εκδηλώσεις. Παρά το γεγονός ότι η προέλευση των τοξινών δεν είναι ξεκάθαρη. Οι συγγραφείς αναγνώρισαν μέσω φασματομετρίας μάζας πεπτίδια που ταιριάζουν με τις αλληλουχίες συστατικών τοξινών των δηλητηρίων από ζώα. Αυτές οι παρατηρήσεις είναι εκπληκτικές και προκλητικές. Ωστόσο, υπάρχουν πολλά σημεία που πρέπει να λάβουν υπόψη οι συγγραφείς:

      1. Το ξέσπασμα του COVID-19 είναι πανδημία, επομένως ο αριθμός των προσβεβλημένων ατόμων είναι εξαιρετικά υψηλός. Ο αριθμός των δειγμάτων που αναλύονται πρέπει να είναι πολύ μεγαλύτερος. Οι συγγραφείς θα πρέπει να θεωρούν ότι έχουν τουλάχιστον τρεις διαφορετικές ομάδες. Μη μολυσμένος έλεγχος, μολυσμένος χωρίς κλινικά συμπτώματα, προσβεβλημένος με σοβαρά συμπτώματα. Για κάθε ομάδα θα πρέπει να αναλύονται τουλάχιστον 10 δείγματα για κάθε ανάλυση (αίμα, ούρα) ώστε να υπάρχει πιο αξιόπιστη στατιστική ανάλυση. Επιπλέον, η ποσότητα των τοξινών συσχετίζεται με τη σοβαρότητα του φαινοτύπου;

      2. Οι συγγραφείς θα πρέπει να παρέχουν ορισμένα βιολογικά δεδομένα ότι οι τοξίνες που εντόπισαν είναι υπεύθυνες για τον κλινικό φαινότυπο. Θα πρέπει να εκτελέσουν κάποια πειράματα in vitro μολύνοντας κύτταρα (τα CALU είναι τα πιο χρησιμοποιούμενα) με COVID ή θεραπεύοντάς τα με τοξίνες. Το αποτέλεσμα πρέπει να είναι παρόμοιο.

      3. Είναι δύσκολη η πρόσβαση στα αρχικά δεδομένα. Θα ήταν ενδιαφέρον να δούμε τις πεπτιδικές αλληλουχίες που ταυτοποιούνται από τη φασματομετρία μάζας. Στο Σχήμα 4 οι συγγραφείς ανέφεραν ένα παράδειγμα, αλλά δεν μοιάζει με το ότι μια εκκρινόμενη τοξίνη περιέχει το προπεπτίδιο της περιοχής οδηγό.

      4. Το κείμενο χρειάζεται κάποια επεξεργασία. Η παραπομπή άλλων ερευνητικών εργασιών θα πρέπει να είναι σύμφωνη με το πρότυπο.

       

      Παρουσιάζεται το έργο με σαφήνεια και ακρίβεια και παραθέτει την τρέχουσα βιβλιογραφία;

      Ναί

      Εάν ισχύει, είναι κατάλληλη η στατιστική ανάλυση και η ερμηνεία της;

      Οχι

      Είναι διαθέσιμα όλα τα δεδομένα πηγής στα οποία βασίζονται τα αποτελέσματα για να διασφαλιστεί η πλήρης αναπαραγωγιμότητα;

      Εν μέρει

      Είναι ο σχεδιασμός της μελέτης κατάλληλος και η εργασία είναι τεχνικά ορθή;

      Εν μέρει

      Τα συμπεράσματα που εξάγονται υποστηρίζονται επαρκώς από τα αποτελέσματα;

      Οχι

      Παρέχονται επαρκείς λεπτομέρειες μεθόδων και αναλύσεων ώστε να επιτρέπεται η αναπαραγωγή από άλλους;

      Εν μέρει

      Εμπειρογνωμοσύνη κριτικού:

      βιολογία

      Επιβεβαιώνω ότι διάβασα αυτήν την υποβολή και πιστεύω ότι διαθέτω το κατάλληλο επίπεδο εμπειρογνωμοσύνης για να επιβεβαιώσω ότι είναι αποδεκτού επιστημονικού επιπέδου, ωστόσο διατηρώ σημαντικές επιφυλάξεις, όπως περιγράφεται παραπάνω.

      ΠΗΓΗ άρθρου:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8772524/#

      Αν ενδιαφέρεστε να μάθετε αλήθειες για το ρωσο-ουκρανικό που ο φιλοπόλεμος δυτικός καπιταλισμός σύμπας κρύβει…

      Ο Όλιβερ Στόουν εξηγεί το τι προηγήθηκε, τι συμβαίνει και τι θα ακολουθήσει στην Ουκρανία

      Μία μεγάλη ανάλυση για τον πόλεμο στην Ουκρανία

      Ένα tweet του κορυφαίου Αμερικανού σκηνοθέτη και ερευνητή Oliver Stone, ξεσήκωσε θύελλα αντιδράσεων. Και όμως, δεν πρόκειται για δικό του άρθρο, αλλά για έρευνα πρώην στελέχους των μυστικών υπηρεσιών, ο οποίος μάλιστα υπηρέτησε σε νευραλγική θέση στον ΟΗΕ και έχει εκπαιδευτεί από τις δυτικές μυστικές υπηρεσίες. Λόγω θέσης, παρακολούθησε στενά την κρίση στην Ουκρανία από την αρχή. Κυρίως όμως, για λογαριασμό του ΝΑΤΟ εκπόνησε έρευνα για τον εκσυγχρονισμό του ουκρανικού στρατού. 

      Με αποτέλεσμα, να γνωρίζει από πρώτο χέρι τις καταστάσεις.

      Πρόκειται για τον Ελβετό Jacques Baud και την έρευνα που δημοσιεύθηκε στο Γαλλικό Κέντρο Έρευνας του Παρισιού.

      Να σημειωθεί ότι ο Όλιβερ Στόουν είχε ασχοληθεί διεξοδικά με τα γεγονότα στην Ουκρανία, γυρνώντας ένα ντοκιμαντέρ του 2018 το οποίο προκάλεσε μεγάλες συζητήσεις. Η Δύση όμως το υποτίμησε και σήμερα προσπαθεί να το εξαφανίσει.

      Η συγκεκριμένη έρευνα δίνει απαντήσεις σε πάρα πολλά θέματα, εξηγώντας τόσο τα γεγονότα που οδήγησαν στην ρωσική εισβολή, όσο και στο τι συμβαίνει αυτή τη στιγμή στην Ουκρανία καθώς και μία εκτίμηση για την κατάληξη των πολεμικών επιχειρήσεων. Ο συγγραφέας φαίνεται να είναι αμερόληπτος, αν και πολλά από αυτά που γράφει δεν θα αρέσουν στις ΗΠΑ, πιθανότατα και στη Ρωσία.

      Η στρατιωτική κατάσταση στην Ουκρανία

      από τον Jacques Baud*

      Μέρος πρώτο: Τα γεγονότα που οδήγησαν στον πόλεμο

      Για χρόνια, από το Μάλι μέχρι το Αφγανιστάν, εργάστηκα για την ειρήνη και ρισκάρω τη ζωή μου γι’ αυτήν. Επομένως, δεν είναι ζήτημα αιτιολόγησης του πολέμου στην Ουκρανία, αλλά κατανόησης του τι μας οδήγησε σε αυτόν.

      Ας προσπαθήσουμε να εξετάσουμε τις ρίζες της ουκρανικής σύγκρουσης. Ξεκινά με αυτούς που τα τελευταία οκτώ χρόνια μιλούν για «αποσχιστές» ή «ανεξάρτητους» από το Ντονμπάς. Αυτή είναι μια εσφαλμένη ονομασία. Τα δημοψηφίσματα που διενήργησαν οι δύο αυτοαποκαλούμενες Δημοκρατίες του Ντόνετσκ και του Λουγκάνσκ τον Μάιο του 2014, δεν ήταν δημοψηφίσματα «ανεξαρτησίας» (независимость), όπως ισχυρίστηκαν ορισμένοι αδίστακτοι δημοσιογράφοι, αλλά δημοψηφίσματα «αυτοδιάθεσης» ή «αυτονομίας» (самостоятельность). ). Ο χαρακτηρισμός “φιλορώσος” υποδηλώνει ότι η Ρωσία ήταν συμβαλλόμενο μέρος στη σύγκρουση, κάτι που δεν συνέβη, και ο όρος “Ρωσόφωνοι” θα ήταν πιο ειλικρινής. Επιπλέον, αυτά τα δημοψηφίσματα διεξήχθησαν ενάντια στις συμβουλές του Βλαντιμίρ Πούτιν.

      Στην πραγματικότητα, αυτές οι Δημοκρατίες δεν επιδίωκαν να διαχωριστούν από την Ουκρανία, αλλά να αποκτήσουν ένα καθεστώς αυτονομίας, που τους εγγυάται τη χρήση της ρωσικής γλώσσας ως επίσημης γλώσσας — επειδή η πρώτη νομοθετική πράξη της νέας κυβέρνησης που προέκυψε από την ανατροπή που υποστηρίχθηκε από την Αμερική του [δημοκρατικά εκλεγμένου] Προέδρου Γιανουκόβιτς, ήταν η κατάργηση, στις 23 Φεβρουαρίου 2014, του νόμου Kivalov-Kolesnichenko του 2012 που έκανε τα ρωσικά επίσημη γλώσσα στην Ουκρανία. Σαν να αποφάσιζαν Γερμανοί πραξικοπηματίες ότι τα γαλλικά και τα ιταλικά δεν θα ήταν πλέον επίσημες γλώσσες στην Ελβετία.

      Η απόφαση αυτή προκάλεσε θύελλα στον ρωσόφωνο πληθυσμό. Το αποτέλεσμα ήταν η σκληρή καταστολή των ρωσόφωνων περιοχών (Οδησσός, Ντνεπροπετρόφσκ, Χάρκοβο, Λούγκανσκ και Ντόνετσκ) που διεξήχθη από τον Φεβρουάριο του 2014 και οδήγησε σε στρατιωτικοποίηση της κατάστασης και σε ορισμένες φρικτές σφαγές του ρωσικού πληθυσμού (στην Οδησσό και Μαριούπολη, η πιο αξιοσημείωτη).

      Σε αυτό το στάδιο, πολύ άκαμπτο και απορροφημένο σε μια δογματική προσέγγιση των επιχειρήσεων, το ουκρανικό γενικό επιτελείο υπέταξε τον εχθρό αλλά χωρίς να καταφέρει να επικρατήσει. Ο πόλεμος που διεξήγαγαν οι «αυτόνομοι» συνίστατο σε επιχειρήσεις υψηλής κινητικότητας που διεξάγονταν με ελαφρά μέσα. Με μια πιο ευέλικτη και λιγότερο δογματική προσέγγιση, οι αντάρτες κατάφεραν να εκμεταλλευτούν την αδράνεια των ουκρανικών δυνάμεων για να τους «παγιδεύουν» επανειλημμένα.

      Το 2014, όταν ήμουν στο ΝΑΤΟ, ήμουν υπεύθυνος για την καταπολέμηση της διάδοσης φορητών όπλων και προσπαθούσαμε να εντοπίσουμε τις παραδόσεις ρωσικών όπλων στους αντάρτες, για να δούμε αν εμπλέκεται η Μόσχα. Οι πληροφορίες που λάβαμε τότε προέρχονταν σχεδόν εξ ολοκλήρου από υπηρεσίες πληροφοριών της Πολωνίας και δεν «ταίριαζαν» με τις πληροφορίες που προέρχονταν από τον ΟΑΣΕ [Οργανισμός για την Ασφάλεια και τη Συνεργασία στην Ευρώπη] — και παρά τους μάλλον ωμούς ισχυρισμούς, δεν υπήρχαν παραδόσεις όπλων και στρατιωτικού εξοπλισμού από τη Ρωσία.

      Οι αντάρτες ήταν οπλισμένοι χάρη στην αποστασία των ρωσόφωνων ουκρανικών μονάδων που πέρασαν στην πλευρά των ανταρτών. Καθώς οι ουκρανικές αποτυχίες συνεχίζονταν, τα τάγματα αρμάτων μάχης, πυροβολικού και αντιαεροπορικών πλήθυναν στις τάξεις των αυτόνομων. Αυτό ώθησε τους Ουκρανούς να δεσμευτούν στις Συμφωνίες του Μινσκ.

      Σχόλιο: Αυτό είναι εκπληκτικό. Όλοι στην Δύση υποθέσαμε ότι οι αυτονομιστές έπαιρναν τουλάχιστον μερικά ρωσικά όπλα. Εξάλλου, τα δυτικά μέσα ενημέρωσης μίλησαν για τη «ρωσική εισβολή στην Ουκρανία» από την πρώτη μέρα της «αντιτρομοκρατικής επιχείρησης» του Κιέβου στο Ντονμπάς. Αν θέλεις όμως πραγματικά την ελευθερία, πρέπει να παλέψεις πραγματικά για αυτήν, και μόνος σου, ως επί το πλείστον…

      Αλλά αμέσως μετά την υπογραφή των Συμφωνιών Μινσκ 1, ο Ουκρανός Πρόεδρος Πέτρο Ποροσένκο ξεκίνησε μια μαζική «αντιτρομοκρατική επιχείρηση» (ATO/Антеристична операція) κατά του Ντονμπάς. Με κακή συμβουλή από αξιωματικούς του ΝΑΤΟ, οι Ουκρανοί υπέστησαν μια συντριπτική ήττα στο Ντεμπάλτσεβο, η οποία τους ανάγκασε να συμμετάσχουν στις Συμφωνίες Μινσκ 2.

      Είναι σημαντικό να υπενθυμίσουμε εδώ ότι οι συμφωνίες του Μινσκ 1 (Σεπτέμβριος 2014) και Μινσκ 2 (Φεβρουάριος 2015) δεν προέβλεπαν το διαχωρισμό ή την ανεξαρτησία των Δημοκρατιών, αλλά την αυτονομία τους στο πλαίσιο της Ουκρανίας. Όσοι έχουν διαβάσει τις Συμφωνίες (είναι ελάχιστοι αυτοί που το έχουν κάνει πραγματικά) θα σημειώσουν ότι αναφέρουν ρητά ότι το καθεστώς των Δημοκρατιών επρόκειτο να διαπραγματευθεί μεταξύ του Κιέβου και των εκπροσώπων των Δημοκρατιών, για μια εσωτερική λύση εντός της Ουκρανίας.

      Γι’ αυτό, από το 2014, η Ρωσία απαιτεί συστηματικά την εφαρμογή των Συμφωνιών του Μινσκ, ενώ αρνείται να είναι μέρος στις διαπραγματεύσεις, επειδή ήταν εσωτερικό ζήτημα της Ουκρανίας. Από την άλλη πλευρά, η Δύση — με επικεφαλής τη Γαλλία — προσπάθησε συστηματικά να αντικαταστήσει τις Συμφωνίες του Μινσκ με το «μορφότυπο της Νορμανδίας», το οποίο έφερε Ρώσους και Ουκρανούς αντιμέτωπους. Ωστόσο, ας θυμηθούμε ότι δεν υπήρχαν ποτέ ρωσικά στρατεύματα στο Ντονμπάς πριν από τις 23-24 Φεβρουαρίου 2022. Επιπλέον, οι παρατηρητές του ΟΑΣΕ δεν είχαν παρατηρήσει ποτέ το παραμικρό ίχνος ρωσικών μονάδων που δρούσαν στο Ντονμπάς μέχρι τότε. Για παράδειγμα, ο χάρτης των πληροφοριών των ΗΠΑ που δημοσιεύτηκε από την Washington Post στις 3 Δεκεμβρίου 2021 δεν δείχνει ρωσικά στρατεύματα στο Donbass.

      Τον Οκτώβριο του 2015, ο Vasyl Hrytsak, διευθυντής της Ουκρανικής Υπηρεσίας Ασφαλείας (SBU), ομολόγησε ότι μόνο 56 Ρώσοι μαχητές είχαν εντοπιστεί στο Donbass. Αυτό ήταν ακριβώς συγκρίσιμο με τους Ελβετούς που πήγαιναν να πολεμήσουν στη Βοσνία τα Σαββατοκύριακα, τη δεκαετία του 1990, ή με τους Γάλλους που πηγαίνουν να πολεμήσουν στην Ουκρανία σήμερα.

      Ο ουκρανικός στρατός ήταν τότε σε άθλια κατάσταση. Τον Οκτώβριο του 2018, μετά από τέσσερα χρόνια πολέμου, ο γενικός στρατιωτικός εισαγγελέας της Ουκρανίας, Ανατόλι Μάτιος, δήλωσε ότι η Ουκρανία έχασε 2.700 άνδρες στο Donbass: 891 από ασθένειες, 318 από τροχαία ατυχήματα, 177 από άλλα ατυχήματα, 175 από δηλητηριάσεις (αλκοόλ, ναρκωτικά), 172 από απρόσεκτο χειρισμό όπλων, 101 από παραβάσεις των κανονισμών ασφαλείας, 228 από δολοφονίες και 615 από αυτοκτονίες.

      Στην πραγματικότητα, ο ουκρανικός στρατός υπονομεύτηκε από τη διαφθορά των στελεχών του και δεν απολάμβανε πλέον την υποστήριξη του πληθυσμού. Σύμφωνα με έκθεση του βρετανικού υπουργείου Εσωτερικών, στην ανάκληση εφέδρων Μαρτίου/Απριλίου 2014, το 70 τοις εκατό δεν εμφανίστηκε στην πρώτη συνεδρία, το 80 τοις εκατό για τη δεύτερη, το 90 τοις εκατό για την τρίτη και το 95 τοις εκατό για την τέταρτη. Τον Οκτώβριο/Νοέμβριο 2017, το 70% των στρατευσίμων δεν εμφανίστηκε στην εκστρατεία ανάκλησης «Φθινόπωρο 2017». Αυτό δεν συμπεριλαμβάνει τις αυτοκτονίες και τις λιποταξίες (συχνά στους αυτόνομους), οι οποίες έφτασαν έως και το 30% του δυναμικού στην περιοχή ATO. Οι νεαροί Ουκρανοί αρνήθηκαν να πάνε να πολεμήσουν στο Ντονμπάς και προτίμησαν τη μετανάστευση, γεγονός που εξηγεί, τουλάχιστον εν μέρει, το δημογραφικό έλλειμμα της χώρας.

      Το ουκρανικό υπουργείο Άμυνας στράφηκε στη συνέχεια στο ΝΑΤΟ για να βοηθήσει να γίνουν οι ένοπλες δυνάμεις του πιο «ελκυστικές». Έχοντας ήδη εργαστεί σε παρόμοια έργα στο πλαίσιο των Ηνωμένων Εθνών, μου ζητήθηκε από το ΝΑΤΟ να συμμετάσχω σε ένα πρόγραμμα για την αποκατάσταση της εικόνας των ουκρανικών ενόπλων δυνάμεων. Αλλά αυτή είναι μια μακροπρόθεσμη διαδικασία και οι Ουκρανοί ήθελαν να προχωρήσουν γρήγορα.

      Έτσι, για να αντισταθμίσει την έλλειψη στρατιωτών, η ουκρανική κυβέρνηση κατέφυγε σε παραστρατιωτικές πολιτοφυλακές. Το 2020, αποτελούσαν περίπου το 40% των ουκρανικών δυνάμεων και αριθμούσαν περίπου 102.000 άνδρες, σύμφωνα με το Reuters. Οπλίστηκαν, χρηματοδοτήθηκαν και εκπαιδεύτηκαν από τις Ηνωμένες Πολιτείες, τη Μεγάλη Βρετανία, τον Καναδά και τη Γαλλία. Υπήρχαν περισσότερες από 19 εθνικότητες.

      Αυτές οι πολιτοφυλακές δρούσαν στο Ντονμπάς από το 2014, με δυτική υποστήριξη. Ακόμα κι αν μπορεί κανείς να διαφωνήσει για τον όρο «ναζί», το γεγονός παραμένει ότι αυτές οι πολιτοφυλακές είναι βίαιες, μεταφέρουν μια ενοχλητική ιδεολογία και είναι αντισημιτικές…[και] αποτελούνται από φανατικά και βάναυσα άτομα. Το πιο γνωστό από αυτά είναι το Σύνταγμα Αζόφ, το έμβλημα του οποίου θυμίζει τη 2η Μεραρχία Πάντσερ SS Das Reich, η οποία τιμάται στην Ουκρανία για την απελευθέρωση του Χάρκοφ από τους Σοβιετικούς το 1943, πριν πραγματοποιήσει τη σφαγή του 1944 στο Oradour-sur-Glane. Γαλλία.

      Ο χαρακτηρισμός των ουκρανικών παραστρατιωτικών ως «ναζί» ή «νεοναζί» θεωρείται ρωσική προπαγάνδα. Αλλά αυτή δεν είναι η άποψη των Times of Israel ή του Κέντρου Αντιτρομοκρατικής της Ακαδημίας West Point. Το 2014 το περιοδικό Newsweek φαινόταν να τους συνδέει περισσότερο με το… Ισλαμικό Κράτος!

      Έτσι, η Δύση υποστήριξε και συνέχισε να εξοπλίζει πολιτοφυλακές που έχουν διαπράξει πολυάριθμα εγκλήματα κατά του άμαχου πληθυσμού από το 2014: βιασμούς, βασανιστήρια και σφαγές…

      Η ενσωμάτωση αυτών των παραστρατιωτικών δυνάμεων στην Ουκρανική Εθνοφρουρά δεν συνοδεύτηκε καθόλου από «αποναζοποίηση», όπως ισχυρίζονται ορισμένοι.

      Ανάμεσα στα πολλά παραδείγματα, αυτό με τα διακριτικά του Συντάγματος Αζόφ είναι ενδεικτικό:

      ναζιστικά σύμβολα στην Ουκρανία

      Το 2022, πολύ συνοπτικά, οι ουκρανικές ένοπλες δυνάμεις που αντιστέκονται στη ρωσική επίθεση οργανώθηκαν ως:

      Ο Στρατός, υπαγόμενος στο Υπουργείο Άμυνας. Είναι οργανωμένο σε 3 σώματα στρατού και αποτελείται από σχηματισμούς ελιγμών (άρματα μάχης, βαρύ πυροβολικό, βλήματα κ.λπ.).

      Η Εθνική Φρουρά, η οποία εξαρτάται από το Υπουργείο Εσωτερικών και είναι οργανωμένη σε 5 διοικήσεις.

      Η Εθνοφρουρά είναι επομένως μια εδαφική αμυντική δύναμη που δεν ανήκει στον ουκρανικό στρατό. Περιλαμβάνει παραστρατιωτικές πολιτοφυλακές, που ονομάζονται «εθελοντικά τάγματα» (добровольчі батальйоні), επίσης γνωστά με το υποβλητικό όνομα «τάγματα αντίποινων» και αποτελούνται από πεζικό. Κατά κύριο λόγο εκπαιδευμένοι για μάχες στις πόλεις, υπερασπίζονται πλέον πόλεις όπως το Χάρκοβο, η Μαριούπολη, η Οδησσός, το Κίεβο κ.λπ.

      Μέρος δεύτερο: Ο πόλεμος

      Ως πρώην επικεφαλής ανάλυσης των δυνάμεων του Συμφώνου της Βαρσοβίας στην ελβετική υπηρεσία στρατηγικής πληροφοριών, παρατηρώ με λύπη —αλλά όχι έκπληξη— ότι οι υπηρεσίες μας δεν είναι πλέον σε θέση να κατανοήσουν τη στρατιωτική κατάσταση στην Ουκρανία. Οι αυτοαποκαλούμενοι «ειδικοί» που παρελαύνουν στις τηλεοπτικές μας οθόνες μεταδίδουν ακούραστα τις ίδιες πληροφορίες που διαμορφώνονται από τον ισχυρισμό ότι η Ρωσία, ο Βλαντιμίρ Πούτιν για την ακρίβεια, είναι σχιζοφρενής. Ας πάμε ένα βήμα πίσω.

      1. Το ξέσπασμα του πολέμου

      Από τον Νοέμβριο του 2021, οι Αμερικανοί προειδοποιούν συνεχώς για ρωσική εισβολή στην Ουκρανία. Ωστόσο, οι Ουκρανοί στην αρχή δεν έδειχναν να συμφωνούν. Γιατί;

      Πρέπει να επιστρέψουμε στις 24 Μαρτίου 2021. Εκείνη την ημέρα, ο Volodymyr Zelensky εξέδωσε διάταγμα για την ανακατάληψη της Κριμαίας και άρχισε να αναπτύσσει τις δυνάμεις του στα νότια της χώρας. Παράλληλα, πραγματοποιήθηκαν πολλές ασκήσεις του ΝΑΤΟ μεταξύ της Μαύρης Θάλασσας και της Βαλτικής, συνοδευόμενες από σημαντική αύξηση των αναγνωριστικών πτήσεων κατά μήκος των ρωσικών συνόρων. Στη συνέχεια, η Ρωσία πραγματοποίησε αρκετές ασκήσεις για να δοκιμάσει την επιχειρησιακή ετοιμότητα των στρατευμάτων της και να δείξει ότι παρακολουθούσε την εξέλιξη της κατάστασης.

      Τα πράγματα ηρέμησαν μέχρι τον Οκτώβριο-Νοέμβριο με το τέλος των ασκήσεων ZAPAD 21, οι κινήσεις των στρατευμάτων των οποίων ερμηνεύτηκαν ως ενίσχυση για επίθεση κατά της Ουκρανίας. Ωστόσο, ακόμη και οι ουκρανικές αρχές διέψευσαν την ιδέα της ρωσικής προετοιμασίας για πόλεμο και ο Oleksiy Reznikov, υπουργός Άμυνας της Ουκρανίας, δηλώνει ότι δεν υπήρξε καμία αλλαγή στα σύνορά της από την άνοιξη.

      Κατά παράβαση των Συμφωνιών του Μινσκ, η Ουκρανία διεξήγαγε αεροπορικές επιχειρήσεις στο Ντονμπάς χρησιμοποιώντας drones, συμπεριλαμβανομένου τουλάχιστον ενός χτυπήματος σε αποθήκη καυσίμων στο Ντόνετσκ τον Οκτώβριο του 2021. Ο αμερικανικός Τύπος δημοσίευσε το συγκεκριμένο χτύπημα, αλλά όχι οι Ευρωπαίοι. και κανείς δεν καταδίκασε αυτές τις παραβιάσεις.

      Τον Φεβρουάριο του 2022, τα γεγονότα ήρθαν στο προσκήνιο. Στις 7 Φεβρουαρίου, κατά την επίσκεψή του στη Μόσχα, ο Εμανουέλ Μακρόν επιβεβαίωσε στον Βλαντιμίρ Πούτιν τη δέσμευσή του στις Συμφωνίες του Μινσκ, δέσμευση που θα επαναλάμβανε μετά τη συνάντησή του με τον Βολοντίμιρ Ζελένσκι την επόμενη μέρα. Όμως, στις 11 Φεβρουαρίου, στο Βερολίνο, μετά από εννέα ώρες εργασίας, η συνάντηση των πολιτικών συμβούλων των ηγετών του «μορφότυπου της Νορμανδίας» τελείωσε χωρίς κανένα συγκεκριμένο αποτέλεσμα: οι Ουκρανοί εξακολουθούσαν να αρνούνται να εφαρμόσουν τις Συμφωνίες του Μινσκ, προφανώς υπό την πίεση των Ηνωμένων Πολιτειών. Ο Βλαντιμίρ Πούτιν σημείωσε ότι ο Μακρόν είχε δώσει κενές υποσχέσεις και ότι η Δύση δεν ήταν έτοιμη να επιβάλει τις συμφωνίες, που η ίδια είχε στηρίξει επί οκτώ χρόνια.

      Οι προετοιμασίες της Ουκρανίας στη πρώτη γραμμή συνεχίστηκαν. Το ρωσικό κοινοβούλιο θορυβήθηκε και στις 15 Φεβρουαρίου ζήτησε από τον Βλαντιμίρ Πούτιν να αναγνωρίσει την ανεξαρτησία των Δημοκρατιών, κάτι που αρχικά αρνήθηκε να κάνει.

      Στις 17 Φεβρουαρίου, ο πρόεδρος Τζο Μπάιντεν ανακοίνωσε ότι η Ρωσία θα επιτεθεί στην Ουκρανία τις επόμενες ημέρες. Πώς το ήξερε αυτό; Είναι ένα μυστήριο. Όμως από τις 16 οι βομβαρδισμοί του πληθυσμού του Ντονμπάς είχαν αυξηθεί δραματικά, όπως δείχνουν οι καθημερινές εκθέσεις των παρατηρητών του ΟΑΣΕ. Όπως ήταν φυσικό, ούτε τα ΜΜΕ, ούτε η Ευρωπαϊκή Ένωση, ούτε το ΝΑΤΟ, ούτε καμία δυτική κυβέρνηση αντέδρασαν ούτε παρενέβησαν. Θα ειπωθεί αργότερα ότι αυτή ήταν «ρωσική παραπληροφόρηση». Μάλιστα, φαίνεται ότι η Ευρωπαϊκή Ένωση και ορισμένες χώρες έχουν σιωπήσει εσκεμμένα για τη σφαγή του πληθυσμού του Donbass, γνωρίζοντας ότι κάτι τέτοιο θα προκαλούσε ρωσική επέμβαση.

      Την ίδια ώρα, υπήρξαν αναφορές για δολιοφθορές στο Ντονμπάς. Στις 18 Ιανουαρίου, οι μαχητές του Ντονμπάς αναχαίτησαν σαμποτέρ, οι οποίοι μιλούσαν πολωνικά και ήταν εξοπλισμένοι με δυτικό εξοπλισμό και προσπαθούσαν να δημιουργήσουν προβοκάτσια με χημικά στην Γκορλίβκα. Θα μπορούσαν να ήταν μισθοφόροι της CIA, με επικεφαλής ή «συμβούλους» Αμερικανούς και αποτελούμενους από Ουκρανούς ή Ευρωπαίους μαχητές, για να πραγματοποιήσουν ενέργειες δολιοφθοράς στις αυτοανακηρυχθείσες Δημοκρατίες του Ντονμπάς.

      Στην πραγματικότητα, ήδη από τις 16 Φεβρουαρίου, ο Τζο Μπάιντεν γνώριζε ότι οι Ουκρανοί είχαν αρχίσει να βομβαρδίζουν έντονα τον άμαχο πληθυσμό του Ντονμπάς, αναγκάζοντας τον Βλαντιμίρ Πούτιν να κάνει μια δύσκολη επιλογή: να βοηθήσει στρατιωτικά το Ντονμπάς και να δημιουργήσει ένα διεθνές πρόβλημα ή να μείνει απαθής και να παρακολουθήσει. τους ρωσόφωνους του Ντονμπάς να συνθλίβονται.

      Εάν αποφάσιζε να παρέμβει, ο Πούτιν θα μπορούσε να επικαλεστεί τη διεθνή υποχρέωση της «Ευθύνης Προστασίας» (R2P). Όμως ήξερε ότι όποια και αν ήταν η φύση ή η κλίμακα της, η παρέμβαση θα πυροδοτούσε θύελλα κυρώσεων. Επομένως, είτε η ρωσική παρέμβαση περιοριζόταν στο Ντονμπάς είτε προχωρούσε παραπέρα για να ασκήσει πίεση στη Δύση σχετικά με το καθεστώς της Ουκρανίας, το τίμημα θα ήταν το ίδιο. Αυτό εξήγησε στην ομιλία του στις 21 Φεβρουαρίου. Εκείνη την ημέρα, συμφώνησε με το αίτημα της Δούμας και αναγνώρισε την ανεξαρτησία των δύο Δημοκρατιών του Ντονμπάς και, ταυτόχρονα, υπέγραψε συμβάσεις φιλίας και βοήθειας μαζί τους.

      Ο βομβαρδισμός του ουκρανικού πυροβολικού κατά του πληθυσμού του Ντονμπάς συνεχίστηκε και, στις 23 Φεβρουαρίου, οι δύο Δημοκρατίες ζήτησαν στρατιωτική βοήθεια από τη Ρωσία. Στις 24 Φεβρουαρίου, ο Βλαντιμίρ Πούτιν επικαλέστηκε το άρθρο 51 του Χάρτη των Ηνωμένων Εθνών, το οποίο προβλέπει αμοιβαία στρατιωτική βοήθεια στο πλαίσιο μιας αμυντικής συμμαχίας.

      Για να κάνουν τη ρωσική επέμβαση να φαίνεται εντελώς παράνομη στα μάτια του κοινού, οι δυτικές δυνάμεις απέκρυψαν εσκεμμένα το γεγονός ότι ο πόλεμος ξεκίνησε στις 16 Φεβρουαρίου. Ο ουκρανικός στρατός ετοιμαζόταν να επιτεθεί στο Ντονμπάς ήδη από το 2021, γεγονός που ορισμένοι Ρώσοι αλλά και Οι ευρωπαϊκές υπηρεσίες πληροφοριών γνώριζαν καλά.

      Στην ομιλία του στις 24 Φεβρουαρίου, ο Βλαντιμίρ Πούτιν δήλωσε τους δύο στόχους της επιχείρησής του: «αποστρατικοποίηση» και «απαναζοποίηση» της Ουκρανίας. Άρα, δεν επρόκειτο για την κατάκτηση της Ουκρανίας, ούτε καν, πιθανώς, για την κατάληψη της. και σίγουρα όχι της καταστροφής της.

      Από εκεί και πέρα, οι γνώσεις μας για την πορεία της επιχείρησης είναι περιορισμένες: οι Ρώσοι έχουν απόλυτη μυστικότητα για τις επιχειρήσεις τους (OPSEC) και οι λεπτομέρειες του σχεδιασμού τους δεν είναι γνωστές. Αλλά σχετικά γρήγορα, η πορεία της επιχείρησης μας επιτρέπει να κατανοήσουμε πώς υλοποιήθηκαν οι στρατηγικοί στόχοι σε επιχειρησιακό επίπεδο.

      Αποστρατιωτικοποίηση: καταστροφή της ουκρανικής αεροπορίας, των συστημάτων αεράμυνας και των μέσων αναγνώρισης

      Εξουδετέρωση των δομών διοίκησης και πληροφοριών (C3I), καθώς και των κύριων υλικοτεχνικών διαδρομών στο βάθος της επικράτειας·
      Περικύκλωση του μεγαλύτερου μέρους του ουκρανικού στρατού που συγκεντρώθηκε στα νοτιοανατολικά της χώρας.

      Αποναζοποίηση: καταστροφή ή εξουδετέρωση ταγμάτων εθελοντών που δρούσαν στις πόλεις Οδησσό, Χάρκοβο και Μαριούπολη, καθώς και σε διάφορες εγκαταστάσεις στην επικράτεια.

      2. Αποστρατιωτικοποίηση

      Η ρωσική επίθεση διεξήχθη με πολύ «κλασικό» τρόπο. Αρχικά —όπως είχαν κάνει οι Ισραηλινοί το 1967— με την καταστροφή (στο έδαφος) της αεροπορίας τις πρώτες κιόλας ώρες. Στη συνέχεια, γίναμε μάρτυρες μιας ταυτόχρονης εξέλιξης κατά μήκος πολλών αξόνων σύμφωνα με την αρχή του «ρέοντος νερού»: Προχωρήστε παντού όπου η αντίσταση ήταν αδύναμη και αφήστε τις πόλεις (πολύ απαιτητικές από άποψη στρατευμάτων) για αργότερα. Στο βορρά, ο σταθμός ηλεκτροπαραγωγής του Τσερνομπίλ καταλήφθηκε αμέσως για να αποφευχθούν πράξεις δολιοφθοράς. Οι εικόνες των Ουκρανών και Ρώσων στρατιωτών που φρουρούν μαζί το εργοστάσιο φυσικά δεν εμφανίζονται.

      Η ιδέα ότι η Ρωσία προσπαθεί να καταλάβει το Κίεβο, την πρωτεύουσα, για να εξαλείψει τον Ζελένσκι, προέρχεται χαρακτηριστικά από τη Δύση. Όμως ο Βλαντιμίρ Πούτιν δεν σκόπευε ποτέ να δολοφονήσει ή να ανατρέψει τον Ζελένσκι. Αντίθετα, η Ρωσία επιδιώκει να τον κρατήσει στην εξουσία πιέζοντάς τον να διαπραγματευτεί, περικυκλώνοντας το Κίεβο. Οι Ρώσοι θέλουν να εξασφαλίσουν την ουδετερότητα της Ουκρανίας.

      Πολλοί δυτικοί σχολιαστές εξεπλάγησαν που οι Ρώσοι συνέχισαν να αναζητούν μια λύση μέσω διαπραγματεύσεων κατά τη διεξαγωγή στρατιωτικών επιχειρήσεων. Η εξήγηση βρίσκεται στη ρωσική στρατηγική από τη σοβιετική μάλιστα εποχή. Για τη Δύση, ο πόλεμος αρχίζει όταν τελειώνει η πολιτική. Ωστόσο, η ρωσική προσέγγιση ακολουθεί μια έμπνευση τύπου Κλαούζεβιτς: ο πόλεμος είναι η συνέχεια της πολιτικής και μπορεί κανείς να κινηθεί ρευστά από το ένα στο άλλο, ακόμη και κατά τη διάρκεια της μάχης. Αυτό επιτρέπει σε κάποιον να ασκήσει πίεση στον αντίπαλο και να τον ωθήσει να διαπραγματευτεί.

      Από επιχειρησιακή άποψη, η ρωσική επίθεση ήταν παράδειγμα προηγμένης στρατιωτικής δράσης και σχεδιασμού: σε έξι ημέρες, οι Ρώσοι κατέλαβαν μια περιοχή τόσο μεγάλη όσο το Ηνωμένο Βασίλειο, με ταχύτητα προέλασης μεγαλύτερη από αυτή που είχε πετύχει η Βέρμαχτ το 1940 .

      Το μεγαλύτερο μέρος του ουκρανικού στρατού αναπτύχθηκε στα νότια της χώρας στο πλαίσιο της προετοιμασίας για μια μεγάλη επιχείρηση κατά του Ντονμπάς. Αυτός είναι ο λόγος για τον οποίο οι ρωσικές δυνάμεις μπόρεσαν να το περικυκλώσουν από τις αρχές Μαρτίου στο «καζάνι» μεταξύ Σλαβιάνσκ, Κραματόρσκ και Σεβεροντόνετσκ, με ώθηση από την Ανατολή μέσω του Χάρκοβο και μια άλλη από το Νότο από την Κριμαία. Στρατεύματα από τις αυτοαποκαλούμενες δημοκρατίες του Ντόνετσκ (DPR) και του Λούγκανσκ (LPR) συμπληρώνουν τις ρωσικές δυνάμεις με ώθηση από την Ανατολή.

      Σχόλιο: Η μπλε περιοχή στην ανατολική Ουκρανία είναι οι παγιδευμένες δυνάμεις των ΗΑ.
      Ουκρανία

      Η Στρατιωτική κατάσταση Ουκρανία, 4 Απριλίου 2022

      © Readovka

      Σε αυτό το στάδιο, οι ρωσικές δυνάμεις σφίγγουν σιγά σιγά τον κλοιό, αλλά δεν βρίσκονται πλέον υπό χρονική πίεση ή χρονοδιάγραμμα. Ο στόχος αποστρατικοποίησής τους έχει επιτευχθεί και οι εναπομείνασες ουκρανικές δυνάμεις δεν έχουν πλέον επιχειρησιακή και στρατηγική δομή διοίκησης.

      Η «επιβράδυνση» που αποδίδουν οι «ειδικοί» μας στα κακά logistics είναι μόνο η συνέπεια της επίτευξης των στόχων τους. Η Ρωσία δεν θέλει να εμπλακεί σε κατοχή ολόκληρου του ουκρανικού εδάφους. Μάλιστα, φαίνεται ότι η Ρωσία προσπαθεί να περιορίσει την προέλασή της στα «γλωσσικά σύνορα» της χώρας.

      Τα μέσα ενημέρωσης μας κάνουν λόγο για αδιάκριτους βομβαρδισμούς κατά του άμαχου πληθυσμού, ειδικά στο Χάρκοβο, και μεταδίδονται ευρέως φρικτές εικόνες. Ωστόσο, ο Gonzalo Lira, ένας ανταποκριτής της Λατινικής Αμερικής που ζει εκεί, μας παρουσιάζει μια ήρεμη πόλη στις 10 Μαρτίου και στις 11 Μαρτίου. Είναι αλήθεια ότι είναι μια μεγάλη πόλη και δεν τα βλέπουμε όλα. Όσο για τις «Δημοκρατίες του Ντονμπάς», έχουν «απελευθερώσει» τα δικά τους εδάφη και πολεμούν στην πόλη της Μαριούπολης.

      3. «Αποναζοποίηση»

      Σε πόλεις όπως το Χάρκοβο, η Μαριούπολη και η Οδησσός, η ουκρανική άμυνα παρέχεται από τις παραστρατιωτικές πολιτοφυλακές. Γνωρίζουν ότι ο στόχος της «αποναζοποίησης» στοχεύει πρωτίστως σε αυτούς. Για έναν επιτιθέμενο σε μια αστικοποιημένη περιοχή, οι πολίτες αποτελούν πρόβλημα. Αυτός είναι ο λόγος που η Ρωσία επιδιώκει να δημιουργήσει ανθρωπιστικούς διαδρόμους για να αδειάσει πόλεις από αμάχους και να αφήσει μόνο τις πολιτοφυλακές, για να τους πολεμήσει πιο εύκολα.

      Αντίθετα, αυτές οι πολιτοφυλακές επιδιώκουν να εμποδίσουν τους αμάχους στις πόλεις να εκκενώσουν προκειμένου να αποτρέψουν τον ρωσικό στρατό να πολεμήσει εκεί. Αυτός είναι ο λόγος που διστάζουν να εφαρμόσουν αυτούς τους διαδρόμους και κάνουν τα πάντα για να διασφαλίσουν ότι οι ρωσικές προσπάθειες είναι ανεπιτυχείς — χρησιμοποιούν τον άμαχο πληθυσμό ως «ανθρώπινες ασπίδες». Βίντεο που δείχνουν πολίτες να προσπαθούν να εγκαταλείψουν τη Μαριούπολη και ξυλοκοπούνται από μαχητές του συντάγματος Αζόφ λογοκρίνονται φυσικά από τα δυτικά μέσα ενημέρωσης.

      Στο Facebook, η ομάδα Azov θεωρούνταν στην ίδια κατηγορία με το Ισλαμικό Κράτος [ISIS] και υπόκειται στην «πολιτική της πλατφόρμας για επικίνδυνα άτομα και οργανισμούς». Απαγορευόταν λοιπόν να δημοσιοποιεί τις δραστηριότητές της και απαγορεύονταν συστηματικά «αναρτήσεις» που ήταν ευνοϊκές για αυτήν. Αλλά στις 24 Φεβρουαρίου, το Facebook άλλαξε την πολιτική του και επέτρεψε δημοσιεύσεις ευνοϊκές για την συγκεκριμένη πολιτοφυλακή. Με το ίδιο πνεύμα, τον Μάρτιο, αναρτήσεις στο Facebook στις πρώην ανατολικές χώρες, καλούν για τη δολοφονία Ρώσων στρατιωτών και ηγετών, χωρίς να λογοκρίνονται.

      Τα μέσα ενημέρωσης διαδίδουν μια ρομαντική εικόνα λαϊκής αντίστασης από τον ουκρανικό λαό. Αυτή η εικόνα είναι που οδήγησε την Ευρωπαϊκή Ένωση να χρηματοδοτήσει τη διανομή όπλων στον άμαχο πληθυσμό. Υπό την ιδιότητά μου ως επικεφαλής της διατήρησης της ειρήνης στον ΟΗΕ, εργάστηκα στο θέμα της πολιτικής προστασίας. Διαπιστώσαμε ότι η βία κατά αμάχων σημειώθηκε σε πολύ συγκεκριμένα πλαίσια. Ειδικότερα, όταν τα όπλα είναι άφθονα και δεν υπάρχουν δομές διοίκησης.

      Αυτές οι δομές διοίκησης είναι η ουσία των στρατών: η λειτουργία τους είναι να διοχετεύουν τη χρήση βίας προς έναν στόχο. Εξοπλίζοντας τους πολίτες με τυχαίο τρόπο, όπως συμβαίνει σήμερα, η ΕΕ τους μετατρέπει σε μαχητές, με συνέπεια να τους καθιστά δυνητικούς στόχους. Επιπλέον, χωρίς διοίκηση, χωρίς επιχειρησιακούς στόχους, η διανομή όπλων οδηγεί αναπόφευκτα σε εκκαθάριση, ληστείες και ενέργειες που είναι περισσότερο θανατηφόρες παρά αποτελεσματικές. Ο πόλεμος γίνεται θέμα συναισθημάτων. Η δύναμη γίνεται βία. Αυτό συνέβη στην Ταβάργκα (Λιβύη) από τις 11 έως τις 13 Αυγούστου 2011, όπου 30.000 μαύροι Αφρικανοί σφαγιάστηκαν με όπλα που έπεσαν με αλεξίπτωτα (παράνομα) από τη Γαλλία. Παρεμπιπτόντως, το Βρετανικό Βασιλικό Ινστιτούτο Στρατηγικών Μελετών (RUSI) δεν βλέπει καμία προστιθέμενη αξία σε αυτές τις παραδόσεις όπλων.

      Επιπλέον, παραδίδοντας όπλα σε μια χώρα που βρίσκεται σε πόλεμο, εκτίθεται κανείς ότι θεωρείται εμπλεκόμενος στον συγκεκριμένο πόλεμο. Τα ρωσικά χτυπήματα της 13ης Μαρτίου 2022 κατά της αεροπορικής βάσης Mykolayev επιβεβαιώνουν τις ρωσικές προειδοποιήσεις ότι οι δυτικές αποστολές όπλων θα αντιμετωπίζονταν ως εχθρικοί στόχοι.
      ΠΗΓΗ:https://www.pronews.gr/amyna-asfaleia/enoples-sygkroyseis/o-oliver-stooun-eksigei-to-ti-proigithike-ti-symvainei-kai-ti-tha-akolouthisei-stin-oukrania/

      Οι αρχαίοι θεοί των Ελλήνων προστάτευαν τους Αθηναίους στο Μαραθώνα;

      Τα ανεξήγητα φαινόμενα της μάχης του Μαραθώνα!

      Ιστορίες για τη μάχη του Μαραθώνα που δεν είδαν ποτέ το φως της δημοσιότητας

      Ο Πλούταρχος στο έργο του «Θησεύς», αναφέρει ότι πολλοί Αθηναίοι είδαν να ανοίγει η γη μπροστά τους και να ξεπροβάλει ο Θησέας από μέσα της κυνηγώντας τους Πέρσες. Ακόμα πολλοί είδαν τον ημίθεο Ηρακλή με το ρόπαλό του να ανοίγει τις σειρές των Ανατολιτών.

      Ο Παυσανίας στα “ΑΤΤΙΚΑ” (Ι, 15,3) αναφέρει ότι πολλοί Αθηναίοι είδαν ανθρώπους άγνωστης ταυτότητας να πολεμούν δίπλα τους και μας δίνει μια παραστατική εικόνα για την μάχη που διεξήχθη.

      Αναφέρει ότι ο Θησέας παριστάνεται να βγαίνει από την γη. Επίσης αναφέρεται και ο ημίθεος Ηρακλής να λαμβάνει μέρος στην μάχη. Μας μιλάει επίσης για την θεά Αθηνά η οποία επίσης έπαιρνε μέρος στην μάχη πάνοπλη, και οδηγούσε ένα άρμα με τέσσερα άλογα. Ακόμα στο πλευρό των Αθηναίων ήταν και ο θεός Πάνας ο οποίος μαζί με τους Πανίσκους του σκόρπισαν τον τρόμο και τον πανικό στους Πέρσες και οι τελευταίοι τράπηκαν σε φυγή. Ο Ηρόδοτος γράφει (ΣΤ ‘, 105) ότι ο Φειδιππίδης (δρομέας μεγάλων αποστάσεων) κατά την διαδρομή του προς την Σπάρτη, λίγο πριν την μάχη, είδε στο Παρθένιον όρος τον θεό Πάνα.

      Σύμφωνα λοιπόν με αυτά που διηγήθηκε ο Φειδιππίδης στους Αθηναίους, τον συνάντησε ο Πάνας στην περιοχή του Παρθένιου όρους παραπάνω από τον Τεγέα. Τον φώναξε με το όνομά του και τον ρώτησε γιατί δεν φροντίζουν οι Αθηναίοι γι ‘αυτόν, ενώ ο ίδιος τους είχε βοηθήσει κατά το παρελθόν και ότι το ίδιο θα κάνει και στο μέλλον.

      Οι Αθηναίοι μετά την νίκη τους λοιπόν του αφιέρωσαν ένα σπήλαιο που βρίσκεται στην βόρεια πλευρά της ακρόπολης και ο στρατηγός της μάχης του Μαραθώνα, ο Μιλτιάδης, μερίμνησε για την κατασκευή αγάλματος του θεού, το οποίο έφερε την επιγραφή “Τον τραγόπουν εμέ Πάνα, τον Αρκάδα , τον κατά Μήδων, τον μετ ‘Αθηναίων, στήσατο Μιλτιάδης “.

      Τέλος η εμφάνιση ενός χωρικού με επίμηκες όπλο (όχι δόρυ ή κάτι άλλο γνωστό) έρχεται να ολοκληρώσει το πέπλο των μυστηρίων που συνέβησαν στην ιστορική εκείνη μάχη. Ο συγκεκριμένος «χωρικός» λοιπόν εθεάθη να φονεύει πολλούς από τους βαρβάρους και μετά το πέρας της μάχης εξαφανίστηκε. Οι έλληνες που μάχονταν δίπλα του αδυνατούσαν να τον κοιτάξουν κατάματα.

      Ένας που τόλμησε, τυφλώθηκε. Μετά την μάχη, οι Αθηναίοι έσπευσαν να ρωτήσουν το μαντείο των Δελφών γι ‘αυτόν και έλαβαν την απάντηση: «Να τιμήσετε τον ήρωα Εχετλαίο» μετά από αυτό ανήγειραν μνημείο με λευκό μάρμαρο. Κανείς δεν είναι σε θέση να πει με βεβαιότητα, ότι όλα αυτά συνέβησαν πραγματικά ή όχι. Λέμε μόνο τι γράφουν τα αρχαία κείμενα και οι πηγές. (Πλούταρχος, Παυσανίας-Ηρόδοτος)

      Μια φωτογραφία χίλιες λέξεις: Ακολούθησε το pronews.gr στο Instagram για να «δεις» τον πραγματικό κόσμο!

      Ίσως να ήταν φαινόμενα που αδυνατεί να ερμηνεύσει ο άνθρωπος με τις περιορισμένες γνώσεις του, ακόμη και σήμερα. Και για να απαλλαχτεί από προβληματισμούς και σκέψεις, καταφεύγει στην προσφιλή του μέθοδο να τα χώνει σαν σκουπίδια κάτω από το χαλί και να τα απορρίπτει ως παραμύθια.Ακόμη και παραμύθια να είναι, είναι δικά μας.

      ΠΗΓΗ:pronews.gr

      και 2ος αξιόλογος επιστήμονας αποδίδει την ηπατίτιδα στα lockdown, στις μάσκες και στους εμβολιασμούς των ενηλίκων

      Α.Ζέρβας: «Lockdown και εμβολιασμός μπορούν να προκαλέσουν ηπατίτιδα – Η μάσκα δηλώνει την υποταγή μας»

      «Η χρήση της μάσκας στην εκκλησία μας ντροπιάζει όλους»

      Ο παιδίατρος Απόστολος Ζέρβας μίλησε για τα κρούσματα ηπατίτιδας στα παιδιά και στο που μπορεί να οφείλονται, αλλά και στην υποχρεωτική μασκοφορία. 

      «Όταν μιλάμε για ηπατίτιδα, εννοούμε μια φλεγμονή του ήπατος, που μπορεί να είναι οξεία ή και χρόνια» ανέφερε ο παιδίατρος Απόστολος Ζέρβας.

      «Τα αίτια μπορεί να είναι πολλά, με βασικότερα τους ιούς. Σε αυτή την καινούργια περίπτωση, οφείλεται σε αδενοιό και συγκεκριμένα τον 41, ο οποίος μέχρι πρόσφατα ήταν υπεύθυνος για λοιμώξεις του ανώτερου αναπνευστικού, δηλαδή για κοινό

      Σύμφωνα με τον κο Ζέρβα, τρεις είναι οι μηχανισμοί που αποτελούν το αίτιο της εμφάνισης αυτής της νέας μορφής ηπατίτιδας. «Μπορεί η αιτία να είναι ο κορωνοϊός, ή άλλες λοιμώξεις, λόγω πτώσης του ανοσοποιητικού συστήματος. Ο μακροχρόνιος εγκλεισμός, επίσης μπορεί να θεωρηθεί ως αίτιο. Ή ο εμβολιασμός μπορεί να προκαλέσει ηπατίτιδα», σημείωσε.

      «Τα συμπτώματα είναι η κόπωση, πυρετός, διάρροια, κοιλιακά άλγη κυρίως όμως η ικτερική χροιά στα μάτια ή και στο δέρμα, ο χρωματισμός των ούρων και ο αποχρωματισμός των κοπράνων», ανέφερε.

      «Νομίζω ότι όλες οι αποφάσεις που έχουν παρθεί, ήταν αποφάσεις “στο γόνατο”. Για τις μάσκες οι πολλές μελέτες που έχουν γίνει, λένε ότι η μακροχρόνια χρήση προκαλεί υποξυγοναιμία και υπερκαπνία. Η μάσκα, δεν είναι για προστασία, δηλώνει την υποταγή μας, όσο για τη χρήση της στην εκκλησία, μας ντροπιάζει όλους», κατέληξε.

      Ο Α.Ζέρβας με ανάρτηση του αναφέρθηκε αναλυτικά στην οξεία ηπατίτιδα και στα αίτια τα οποία την προκαλούν. 

      «Προσωπική δικαίωση: 

      • Από τις αρχές Μαρτίου 2020 μαζί με εκλεκτούς εκλεκτούς συναδέλφους έχουμε τοποθετηθεί με αναρτήσεις στο Facebook και συνεντεύξεις ραδιοφωνικές και τηλεοπτικές στο φλέγον ζήτημα της πανδημίας και έχουμε δικαιωθεί για την ορθότητα των επιστημονικών μας απόψεων…
      • Δυστυχώς ευρισκόμενα ξανά σε ένα νέο κίνδυνο για την υγεία μας , ο οποίος καλείται οξεία ηπατίτιδα…
      • Με τον όρο αυτό εννοούμε την φλεγμονή του ήπατος , η οποία ως αίτια έχει:

      1. Ιογενείς λοιμώξεις (κυρίως ιοί ηπατίτιδος A-B-C ) ή ιός Epstein – Barr -μεγαλοκυτταροϊός κ.α.
      2. Φάρμακα
      3. Ηπατοτοξικές_ουσίες ( βρώσις δηλητηριωδών μανιταριών ) και
      4. Υπερβολική χρόνια κατανάλωση αλκοόλ ..

      Οι πιθανοί λόγοι για την εμφάνιση της οξείας ηπατίτιδος στα παιδιά είναι :

      1. Εξασθένηση του ανοσοποιητικού συστήματος λόγω νόσησης από κορωνοϊό ..
      2. Μακροχρόνιος εγκλεισμός (lockdown) και
      3. Εμβολιασμός κατά του κορωνοιού…»

      Μια φωτογραφία χίλιες λέξεις: Ακολούθησε το pronews.gr στο Instagram για να «δεις» τον πραγματικό κόσμο!

       

      Αμαρτίες (εμβολιασμένων) γονέων και παππούδων πληρώνουσι τέκνα

      Εν άκρα σιωπή των πληρωμένων αρχιπροδοτών αρχιεκδοτών των ΜΜΕ.

      Μόνο ΦΡΙΚΗ προκαλεί η αποκάλυψη του Καθηγητή Κωνσταντίνου Αρβανίτη για την οξεία ηπατίτιδα στα παιδιά.

      21 Απριλίου, 2022 12 Από Καλλιόπη Σουφλή

       

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης: “Η ηπατίτιδα αυτή είναι βαρύτατη, αφού ήδη τα 7 από τα παιδάκια χρειάστηκαν μεταμόσχευση ήπατος, γεγονός που μειώνει σημαντικά το προσδόκιμο επιβίωσης τους…”

       

      Μόνο ΦΡΙΚΗ μπορεί να προκαλέσει η αποκάλυψη του Καθηγητή Κωνσταντίνου Αρβανίτη.

      Ακόμα και χωρίς να είναι εμβολιασμένα τα παιδιά, αρκεί να είναι εμβολιασμένοι οι γονείς… οι γιαγιάδες… οι παππούδες…

      Η ΑΚΙΔΑ ΠΡΟΚΑΛΕΙ ΑΥΤΟΑΝΑΣΑ… ΔΟΛΟΦΟΝΕΙ…

      Αντιλαμβάνεστε για τι πρόκειται;;;

      ΑΝΤΙΛΑΜΒΑΝΕΣΤΕ ΠΟΣΕΣ ΤΡΑΓΩΔΙΕΣ ΕΡΧΟΝΤΑΙ ΣΕ ΖΕΥΓΑΡΙΑ ΠΟΥ Ο ΕΝΑΣ ΕΙΝΑΙ ΕΜΒΟΛΙΑΣΜΕΝΟΣ;;;

      Ο ΑΛΛΟΣ, Ή ΘΑ ΑΠΟΚΤΗΣΕΙ ΑΥΤΟΑΝΟΣΟ, Ή ΘΑ ΠΕΘΑΝΕΙ.

      ΤΟ ΙΔΙΟ ΣΥΜΒΑΙΝΕΙ ΚΑΙ ΜΕ ΤΑ ΠΑΙΔΙΑ ΤΟΥΣ.

      ΓΟΝΕΙΣ ΔΟΛΟΦΟΝΟΙ!!!

       

      Καλλιόπη Σουφλή

       

      Υ.Γ. Παραθέτω σχόλια και απαντήσεις στους σχολιαστές του κ. Αρβανίτη, με ιδιαίτερη βαρύτητα.

       

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης

      Η ηπατίτιδα αυτή είναι βαρύτατη, αφου ηδη τα 7 απο τα παιδακια χρειαστηκαν μεταμοσχευση ηπατος, γεγονος που μειωνει σημαντικα το προσδοκιμο επιβιωσης τους…

       

      Argyro Pikou

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης Πρόκειται για πραγματική γενοκτονία…. πόσο λυπηρό!!!! .. εκτός από αυτοάνοση ηπατίτιδα τί άλλο μπορεί να προκαλέσει η ακίδα γιατρέ ? Πρέπει κάτι να γίνει άμεσα απ όλους εμάς που έχουμε ακόμα ενσυναισθηση…

      Ioanna Nikolaidoy

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης δηλαδή θα πρέπει να φοβόμαστε τις γιαγιάδες και τους παππούδες των παιδιών που έχουν κάνει το εμβόλιο ;

       

      Georgia Basta

      Επίσης το ότι είναι ανεμβολίαστα, είναι έγκυρο σαν πληροφορία; Δεν πιστεύω τίποτα από αυτά που λένε μέχρι να δείξει τι ακριβώς συμβαίνει

       

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης

      Ναι, τουλαχιστον τα περισσοτερα, που ειναι απο 2-5 ειναι ανεμβολιαστα, αφου ακομη δεν εχει δοθει εγκριση για κατω των 5 ετων.
      Υπαρχουν ομως και 10χρονα και 14χρονα.
      Για αυτα δεν μπορω να ξερω σιγουρα, αλλα οι Βρετανοι ειπαν οτι ΚΑΝΕΝΑ απο τα 72 παιδιά δεν ηταν εμβολιασμενο για Covid.

      Chryssa Koutoulaki

      Μπορεί να μεταδοθεί από παιδάκι σε παιδάκι;

      Κωνσταντίνος Αρβανίτης

      Δυσκολα. Απο εμβολιασμενο περναει σε ανεμβολιαστο, που οσο μικροτερη η μαζα σωματος, τοσο σημαντικοτερη η ποσοτητα που μευαφερθηκε.

      Πηγή:https://attikanea.info/%CE%BC%CF%8C%CE%BD%CE%BF-%CF%86%CF%81%CE%B9%CE%BA%CE%B7-%CF%80%CF%81%CE%BF%CE%BA%CE%B1%CE%BB%CE%B5%CE%AF-%CE%B7-%CE%B1%CF%80%CE%BF%CE%BA%CE%AC%CE%BB%CF%85%CF%88%CE%B7-%CF%84%CE%BF%CF%85-%CE%BA%CE%B1/

      Ας ελπίσουμε ότι η νεκρόφιλη Ελίτ πήρε το μάθημά της (και δεν θα το επιχειρήσει πάλι εις βάρος των λαών).

      Το Reuters αναφέρει ότι η Ευρωπαϊκή Ετοιμάζεται να περάσει σε μια νέα φάση διαχείρισης της πανδημίας του κορωνοϊού, καθώς πλέον θα τον αντιμετωπίζει ως γρίπη. 

      Το πρακτορείο επικαλείται έγγραφο που θα κατατεθεί άμεσα προς ψήφιση από την αρμόδια Επίτροπο, Στέλλα Κυριακίδου.

      Όπως αναφέρει το Reuters, στο προσχέδιο του εγγράφου το οποίο αναμένεται να κατατεθεί σήμερα (27/4) προς ψήφιση στα όργανα της Ένωσης, η Επίτροπος Υγείας της ΕΕ αναφέρει πως το ευρωπαϊκό μπλοκ έχει ξεπεράσει την φάση έκτακτης ανάγκης της πανδημίας, ενώ στο εξής θα δίνεται μεγαλύτερο βάρος στους διαγνωστικούς ελέγχους, ενώ η επιτήρηση της COVID-19 θα είναι παρόμοια με αυτή που γίνεται στην κοινή εποχική γρίπη.

      Σύμφωνα με το δημοσίευμα, το γεγονός πως τα κρούσματα της νόσου ελαττώνονται σε συνδυασμό με τη μείωση των θανάτων και της επιβάρυνσης των συστημάτων υγείας ενισχύουν την θέση της ΕΕ αναφορικά με τον τερματισμό της κατάστασης έκτακτης ανάγκης στην οποία βρίσκονται τα κράτη-μέλη εδώ και περισσότερα από δύο χρόνια. Παράλληλα τα υψηλά ποσοστά εμβολιασμών -άνω του 70% για τις δύο δόσεις και άνω του 50% για την ενισχυτική- εντείνουν την αισιοδοξία των ευρωπαϊκών αρχών.

      «Προτείνεται μία διαφορετική προσέγγιση στο ζήτημα της διαχείρισης της πανδημίας, περνώντας από το στάδιο της έκτακτης ανάγκης σε μία πιο βιώσιμη διαχείριση της κατάστασης», αναφέρεται χαρακτηριστικά στο προσχέδιο του εγγράφου της ΕΕ που περιήλθε σε γνώση του Reuters. Η Κομισιόν αρνήθηκε να σχολιάσει το δημοσίευμα.

      Μια φωτογραφία χίλιες λέξεις: Ακολούθησε το pronews.gr στο Instagram για να «δεις» τον πραγματικό κόσμο!

      Ωστόσο, το Reuters τονίζει πως οι όποιες ανακοινώσεις δεν θα είναι δεσμευτικές για τις κυβερνήσεις των κρατών-μελών και θα συνοδεύονται από τη σαφή προειδοποίηση πως «ο COVID-19 ήρθε για να μείνει», πιθανότατα μέσω της εμφάνισης νέων παραλλαγών, και ως εκ τούτου «η επαγρύπνηση και η ετοιμότητα παραμένουν απαραίτητες».

      ΠΗΓΗ:https://www.pronews.gr/ygeia/reuters-i-ee-anakoinonei-to-telos-tis-pandimias-tou-koronoio-tha-antimetopizetai-pleon-os-gripi/

      Ας ελπίσουμε πως πλησιάζει το τέλος του κορωνοφόβου και της κορωνοτρομοκρατίιας!

      Από πολιτικούς χωρίς προσωπικότητα και πνευματικότητα, χωρίς συνταγματικό δικαστήριο να τους ζητά ευθύνες, θα μας μπλέξουν σίγουρα σε πόλεμο

      Αν οι ηγέτες μας δεν δίνουν λογαριασμό σε καμιά αρχή και εξουσία πάνω από αυτούς, οι μαριονέτες που δήθεν κατευθύνουν δημοκρατικά τους λαούς μόνο θανάτους και καταστροφές θα γεμίζουν τον τόπο και θα συσσωρεύουν στη γη.
      Τα ανδρείκελα που διοικούν τους λαούς σαν όργανα του Διαβόλου που κατέχει ουσιαστικά τις εξουσίες του κόσμου με τους εγωισμούς τους και τις δήθεν δικαιολογίες πως θέλουν η δικαιοσύνη και η δημοκρατία να επικρατήσει,   δεν πρόκειται κανένα δίλημμα, πρόβλημα ή βλάβη να αποκαταστήσουν.
      27 Απριλιου

       

      Μόσχα: «Δεν θα διστάσουμε να χτυπήσουμε χώρες του ΝΑΤΟ που στέλνουν όπλα στο Κίεβο» – Η Ελλάδα ανάμεσα τους

      Μόσχα: «Δεν θα διστάσουμε να χτυπήσουμε χώρες του ΝΑΤΟ που στέλνουν όπλα στο Κίεβο» – Η Ελλάδα ανάμεσα τους

      Κλιμακώνεται η ένταση – Η δήλωση της εκπροσώπου του ρωσικού ΥΠΕΞ Μ.Ζαχάροβα

       

      Κλιμακώνεται η ένταση ανάμεσα σε Ρωσία και Δύση, λόγω της απόφασης των δυτικών να στείλουν ακόμη περισσότερα όπλα στο καθεστώς του Κιέβου (η Ελλάδα είναι ανάμεσα στις χώρες που αναμένεται να στείλει και άλλα όπλα), καθώς η εκπρόσωπος του υπουργείου Εξωτερικών της Ρωσίας, Μαρία Ζαχάροβα μιλά ανοιχτά πλέον για χτύπημα σε νατοϊκή χώρα! 

      Κοιτάζοντας πίσω στο 2021 _ Greenpeace

      Η Μαρία Ζαχάροβα, εκπρόσωπος του ρωσικού υπουργείου Εξωτερικών, δήλωσε χαρακτηριστικά ότι θα μπορούσαν να επιτραπούν επιδρομές εναντίον κρατών- μελών του ΝΑΤΟ που παρέχουν όπλα στην Ουκρανία, όπως αναφέρει η βρετανική εφημερίδα «Daily Mail».

      «Καταλαβαίνουμε σωστά ότι, για χάρη της διατάραξης της επιμελητείας των στρατιωτικών προμηθειών, η Ρωσία μπορεί να χτυπήσει στρατιωτικούς στόχους στο έδαφος εκείνων των χωρών του ΝΑΤΟ που προμηθεύουν όπλα στο καθεστώς του Κιέβου; Σε τελική ανάλυση, αυτό οδηγεί άμεσα σε θανάτους και αιματοχυσία στο ουκρανικό έδαφος. Από όσο καταλαβαίνω, η Βρετανία είναι μια από αυτές τις χώρες», πρόσθεσε η Ζαχάροβα.

      Η Ζαχάροβα τα είπε αυτά μετά την δήλωση του υπουργού Άμυνας της Βρετανίας, Τζέιμς Χίπι ότι η χώρα του στηρίζει τις αεροπορικές επιδρομές σε ρωσικούς στόχους.

      Τζορτζ Σόρος: «Αυτό που συμβαίνει στην Ουκρανία είναι το καλύτερο έργο μου» (upd)Παράδοση υπό όρους ζητά το Τάγμα Αζόφ: «Δεν εμπιστευόμαστε τον Β.Ζελένσκι – Αφήστε μας να πάμε στην Τουρκία»Βίντεο: Οι Ουκρανοί παραδίδονται μαζικά στο Ντονμπάς αλλά το Κίεβο στέλνει τρεις νέες Ταξιαρχίες με δυτικά όπλαΡώσοι δείχνουν χάρτες με το Λονδίνο στο στόχαστρο – Ο Σ.Λαβρόφ μιλά για «σοβαρό κίνδυνο πυρηνικού πολέμου»Η Φινλανδία μπαίνει στο ΝΑΤΟ ενώ η Ρωσία «αιμορραγεί»: Γεωστρατηγικός «στραγγαλισμός» της Μόσχας εν όψειΜεγάλο πλήγμα στο εσωτερικό της Ρωσίας πέτυχαν οι Ουκρανοί: Χτυπήθηκαν αποθήκες όπλων, καυσίμων & σιδηροδρομικός σταθμόςΡωσία: Χρησιμοποίησε τα αόρατα UAV ZALA 421-16E HD και ραδιοθερμικό καμουφλάζ στην ΟυκρανίαΑμερικανικός πακτωλός όπλων στο ουκρανικό καθεστώς για να νικήσει ή να «πληγώσει» τη Ρωσία: Iδού τι στέλνουνΗ κυβέρνηση ετοιμάζεται να στείλει ξανά όπλα στο Κίεβο – ΗΠΑ: «Στείλτε A/K πυροβόλα M109 και άρματα μάχης»Oι ΗΠΑ ζήτησαν A/K πυροβόλα M109 & άρματα μάχης M60A3 & Leopard 1A5 από την Ελλάδα για την Ουκρανία – Τι γράφουν οι ΝΥΤ

      Oι ΗΠΑ ζήτησαν A/K πυροβόλα M109 & άρματα μάχης M60A3 & Leopard 1A5 από την Ελλάδα για την

      Ουκρανία – Τι γράφουν οι ΝΥΤ

      ΠΗΓΗ:https://www.pronews.gr/

      ΜΙΛΟΥΝ ΓΙΑ ΕΙΡΗΝΗ ΑΛΛΑ ΑΠΕΡΓΑΖΟΝΤΑΙ ΤΟΝ ΠΟΛΕΜΟ!

      ΧΡΙΣΤΟΣ ΑΝΕΣΤΗ

       

      Ο Απόστολος Παύλος στην προς Κορινθίους πρώτη του επιστολή έγραψε μεταξύ
      άλλων: «Οι Ιουδαίοι σημείο ζητούν, και οι Έλληνες σοφία ζητούν· εμείς, όμως, κηρύττουμε
      Χριστό σταυρωμένο, για μεν τους Ιουδαίους σκάνδαλο, για δε τους Έλληνες μωρία· στους
      ίδιους, όμως, τους προσκαλεσμένους, και τους Ιουδαίους και τους Έλληνες, τον Χριστό, Θεού
      δύναμη και Θεού σοφία». Άξιο παρατήρησης είναι ότι γράφει για Χριστό σταυρωμένο και όχι
      αναστημένο. Ίσως η σταύρωση του Χριστού (Θεού) να προβληματίζει διαχρονικά τους
      ανθρώπους περισσότερο από την ανάστασή Του.
      Οι Ιουδαίοι Εβραίοι ήταν ο μόνος λαός του πλανήτη, που λάτρευε ένα Θεό, δημιουργό
      ουρανού και γης. Όχι βέβαια σταθερά και με σεβασμό προς τον νόμο Του, τον οποίο πίστευαν
      ότι είχε παραδώσει ο ίδιος ο Θεός στον προφήτη Μωυσή. Κατά περιόδους παρέβησαν την
      πρώτη και πλέον σημαντική εντολή: «Εγώ ειμί Κύριος ο Θεός σου, ουκ έσονται σοι θεοί έτεροι
      πλην εμού». Επιπόλαια εξετάζοντας κάποιοι τα ιστορικά συμβάντα, κατά τη νεωτερικότητα, σταnπλαίσια της υλιστικής φιλοσοφίας, παρέρχονται το μοναδικό στην προ Χριστού ιστορία
      φαινόμενο μονοθεϊσμού χαρακτηρίζοντας την Παλαιά Διαθήκη εβραϊκή μυθολογία! Αν
      συγκρίνουμε τη διδασκαλία αυτής με την όντως μυθολογία των αρχαίων προγόνων μας, θα
      διαπιστώσουμε την τρομακτική διαφορά μεταξύ τους. Η ελληνική μυθολογία, ιδίως στο περί
      θεών κεφάλαιο είναι παιδαριώδης. Ήταν όντως κατά πολύ ανώτερος ο εβραϊκός λαός από τον
      ελληνικό, ώστε να αρθεί μόνος του στο ύψος να μας προσφέρει το κείμενο της Παλαιάς
      Διαθήκης; Ασφαλώς όχι. Το κείμενο δεν πρόσφερε ο λαός αυτός στους λοιπούς, το πρόσφερε οΘεός, δια των προφητών Του, στον εβραϊκό λαό. Παραβλέποντας τα όσα σημαντικά είναι
      γραμμένα στο βιβλίο αυτό, οι αρνητές και επικριτές εστιάζουν την προσοχή τους στις σκηνές
      βίας, που είναι εκεί καταγεγραμμένες. Κάνουν πως αγνοούν ποια ήταν η κατάσταση στις
      κοινωνίες των λαών που γειτνίαζαν με τον εβραϊκό. Παραβλέπουν τη διαρκή ροπή προς την
      ειδωλολατρεία και του εβραϊκού λαού, που χλευαστικά αποκαλούν εκλεκτό, με την έννοια του
      προνομιούχου. Αλλά αυτός υπέφερε τα πάνδεινα υπό πλήθος κατακτητών, μάλιστα επί έξι
      αιώνες, μέχρι την έλευση του Χριστού ήταν συνεχώς υποδουλωμένος σε διάφορους
      κατακτητές, μεταξύ των οποίων και σε Έλληνες. Και όμως δεν αφανίστηκε, όπως πλήθος άλλων λαών της Μέσης Ανατολής, γιατί ζούσε με την άσβηστη ελπίδα της έλευσης του μεσσία
      (χριστού). Παρερμηνεύοντας όμως τα κείμενα των προφητών, είχε διαπλάσει αυτόν κατά
      απόλυτα κοσμικό τρόπο. Τον ανέμενε όχι απλά ως απελευθερωτή, αλλά ως ηγεμόνα κραταιό, ο οποίος θα έθετε υπό την εξουσία Του όλα τα έθνη με τον εκλεκτό του λαό συμπαραστάτη Του.
      Γι’ αυτό και η όλη βιωτή του όντος Χριστού του Θεού ήταν ανυπόφορη στους άρχοντες του
      λαού, φιλόδοξους, φιλάργυρους και συμβιβασμένους με τους κατακτητές, παρά το μίσος που
      έτρεφαν προς αυτούς. Η όλη Του στάση σκανδάλιζε και απογοήτευε. Και ο σκανδαλισμός
      κορυφώθηκε στον σταυρό. Τον προκάλεσαν να κάνει το θαύμα, για να πιστέψουν. Αγνοούσαν
      ότι ο Θεός πρωτίστως σέβεται το μεγαλύτερο δώρο Του στον άνθρωπο, την ελευθερία. Πριν
      από αυτούς είχε προκαλέσει τον Χριστό και ο διάβολος ζητώντας Του να πέσει από τη στέγη
      του ναού. Άραγε θα μετανοούσε, αν ο Χριστός του έκανε τη χάρη; Πόσοι μάρτυρες θαυμάτων
      κατά τους τρεις πρώτους μαρτυρικούς αιώνες της Εκκλησίας παρέμειναν σκληροί και
      συνέχισαν το έργο του δημίου!

      Οι πρόγονοί μας, ζώντες στο βαθύ σκοτάδι της ειδωλολατρείας, ανέδειξαν αρκετές
      σημαντικές μορφές αναζητητών της αλήθειας, τους φιλοσόφους. Ο στοχασμός τους προκαλεί
      τον θαυμασμό όλων των διανοητών και όχι μόνο των μετεχόντων στον δυτικό λεγόμενο
      πολιτισμό. Βέβαια μεγάλο μέρος της ερευνητικής δια του νου προσπάθειας έχει απολεσθεί,
      ιδιαίτερα των προσωκρατικών φιλοσόφων. Και τα σπαράγματα όμως μας δίνουν εικόνα
      υψηλής διανόησης. Οι εμπαθείς εχθροί του Χριστού αποδίδουν την απώλεια στον
      «σκοταδισμό» των μαθητών του Χριστού, γι’ αυτό και με περισσό πάθος, που ίσως να
      υπερβαίνει εκείνο των ιουδαίων, τον ξανασταυρώνουν. Όμως κάποιοι πρόγονοί μας, κατά την
      τουρκοκρατία, δεν δίστασαν να αποτυπώσουν τις μορφές τους στους τοίχους ναρθήκων
      κάποιων ναών, όπου διασώζονται μέχρι σήμερα. Σε αντίθεση όμως προς τους Εβραίους, οι
      οποίοι είχαν δεχθεί, μέσω του γενάρχη τους Αβραάμ, την αποκάλυψη του Θεού, οι προγονοί
      μας αντιμετώπισαν στην διανοητική τους προσπάθεια ανυπέρβλητες δυσκολίες. Αν ο
      μεταπτωτικός άνθρωπος μπορούσε μόνος του να φθάσει στην αποκάλυψη του Θεού, η
      ενανθρώπισή Του θα ήταν περιττή. Πάντως το απόφθεγμα «ο συ μισείς ετέρω μη ποιήσεις»
      του Κλεοβούλου του Ροδίου μαρτυρεί το θαυμαστό επίπεδο της ηθικής ανάτασης κάποιου
      προγόνου μας. Την αρνητική διατύπωση ο Χριστός αναδιατύπωσε με την παρότρυνση «Πάντα ουν ὅσα εὰν θέλητε ίνα ποιώσιν υμίν οι άνθρωποι, ούτως και υμείς ποιείτε αυτοίς»· Και όμως οι εμπαθείς εχθροί Του τον κατηγορούν για το πλήθος των απαγορεύσεων! Σε κανένα όμως κοσμικό δικαιικό σύστημα δεν έχει ποινικοποιηθεί η αποφυγή πράξης του καλού ούτε στις «χριστιανικές» κοινωνίες! Γιατί οι Έλληνες θεωρούσαν μωρία τη σταύρωση; Επειδή δεν επέτυχαν την υπέρβαση από τη θεώρηση του ηγεμόνα, όπως ακριβώς και σήμερα εν πολλοίς εξακολουθεί να γίνεται αποδεκτή ως φιλάρχου, αλαζόνα, απλήστου, χωρίς διάθεση θυσίας για τον λαό, που, υποτίθεται ότι, διακονεί! Βέβαια οδηγίες θαυμαστές για τον τρόπο άσκησης της εξουσίας έχουν καταθέσει (τραγικός Αγάθων και άλλοι)! Το πλέον σημαντικό όμως εμπόδιο για τους φιλοσοφούντες προγόνους μας υπήρξε το κήρυγμα της υπέρβασης του θανάτου, σε αντίθεση με τους Ιουδαίους, για τους οποίους θεμελιώδης ήταν η πίστη σε μετά θάνατο ζωή.
      Βέβαια και οι πρόγονοί μας είχαν ψηλαφίσει το θέμα αυτό άλλοτε με την άκρα απαισιοδοξία
      της παρουσίασης του κάτω κόσμου ή του αριστοτελικού τέλους και άλλοτε με την κάπως
      ψευδώς αισιόδοξη παρουσίαση του κόσμου των μακάρων η την ιδεαλιστική περί ψυχής
      πλατωνική διδασκαλία. Η βασιλεία του Θεού, την οποία κήρυξε ο Χριστός πόρω απέχει από τις συλλήψεις της ελληνικής διανοητικής προσπάθειας. Ο Χριστός με τη διδασκαλία Του
      καθιστούσε μάταιη πλέον τη διανοητική προσπάθεια σε δύο τομείς: Τη διερεύνηση του θείου
      και την ηθική διδασκαλία. Κατά την Αναγέννηση οι διανοητές επανέφεραν στο προσκήνιο την
      αρχαία ελληνική φιλοσοφία, απαλλαγμένη από την οχληρή περί ύβρεως (αλαζονείας) δοξασία, και πορεύθηκαν προς την άρνηση του Θεού («διαφωτιστές») και της ηθικής (Νίτσε), για να καταπέσουν οι σύγχρονοι στον άθεο υπαρξισμό, που όμως αδυνατεί να δικαιώσει την ύπαρξη, και στο βάραθρο του μηδενισμού!
      Ο Απόστολος Παύλος, που διαλέχθηκε με τους Αθηναίους διανοούμενους, μικρό
      χρονικό διάστημα παρέμεινε στην πόλη τους και δεν έστειλε σ’ εκείνους επιστολή. Απεναντίας στην Κόρινθο των «διεφθαρμένων» και «ακολάστων» πολιτών παρέμεινε επί έτος και πλέον και είχε στη συνέχεια διαρκή επαφή. Μάλιστα δύο επιστολές του προς Κορινθίους
      περιλαμβάνονται στην Καινή Διαθήκη. Ο Χριστός δεν ενανθρώπισε, για να διαλεχθεί με τους φιλοσοφούντες, αλλά για ζητήσει και σώσει το απολωλός. Οι διανοητές του ελληνικού και
      εξελληνισμένου κόσμου ζητούσαν σοφία, γι’ αυτό και η σταύρωση του Θεού αποτελούσε για
      εκείνους μωρία. Ο Απόστολος Παύλος επισήμανε ότι η γνώσις (η κοσμική) φυσιοί (φουσκώνει
      τα μυαλά) και στην αλαζονεία ο άνθρωπος επιχειρεί να καταλάβει τη θέση του Θεού. Γίνεται
      ψευτοθεός ερήμην του Θεού, ενώ ο Χριστός μας κάλεσε να γίνουμε όλοι θεοί κατά χάριν Θεού.
      Σήμερα, που οι φυσικές γνώσεις έχουν τρομακτικά πολλαπλασιασθεί ο πειρασμός της θέωσης ερήμην Θεού έχει γίνει κατά πολύ εντονότερος. Η άρνηση της Ανάστασης του Χριστού είναι απόρροια της ανθρώπινης αλαζονείας. Όμως αυτή θα είναι το πλέον σημαντικό συμβάν στην ανθρώπινη ιστορία, μέχρι το τέλος αυτής. Και θα υπάρξει τέλος σύμφωνα με τη διδασκαλία του Χριστού.

      Ο φίλος μου ο «ΜΑΚΡΥΓΙΑΝΝΗΣ»

      Κάθε παιδί χρειάζεται μια κυρία Πάτον στη ζωή. Ιδιαίτερα αν είναι άτομο ειδικής φροντίδας (ΑΜΕΑ} που λένε οι πρωτόγονοι ειδικοί στην Ελλάδα)

       

      Ανθρωποι

      Κάθε παιδί χρειάζεται μια κυρία Πάτον: Ο δάσκαλος βοηθά το αγόρι με καθυστερήσεις που βασίζονται στον εγκέφαλο Excel ακαδημαϊκά

      Οι δάσκαλοι είναι η «ραχοκοκαλιά κάθε σχολείου στην Αμερική», λέει η μαμά

      Αυτό πιστεύει η Τρέισι Ρος, μητέρα και μυθιστοριογράφος από το Σινσινάτι του Οχάιο. Ο γιος της, ο Καμράν, 17 ετών, γεννήθηκε με αναπτυξιακές καθυστερήσεις που βασίζονται σε οργανική διαταραχή στον εγκέφαλο. Ωστόσο, είχε μια κυρία Πάτον—μια στοργική, περιποιητική και δοτική δασκάλα— και αυτό άλλαξε την πορεία της ζωής του Κάμραν.

      Κάτω από την ανιδιοτελή φροντίδα της κυρίας Πάτον, ο Kamran διέπρεψε. παρέλειψε έναν βαθμό και αποφοίτησε από το λύκειο με άριστα σε ηλικία 17 ετών. Τώρα σπουδάζει μετεωρολογία, «το πάθος του», στο Πανεπιστήμιο του Οχάιο.

      «[Οι δάσκαλοι] είναι η ραχοκοκαλιά κάθε σχολείου στην Αμερική . Είναι οι άνθρωποι στους οποίους βασίζονται τα παιδιά μας για την επιτυχία», είπε η Ρος στους The Epoch Times.

      Epoch Times Photo
      Ο Kamran αποφοίτησε από το γυμνάσιο με άριστα σε ηλικία 17 ετών. (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )

      Ο Κάμραν γεννήθηκε στο Φέρφιλντ του Οχάιο, στις 11 Σεπτεμβρίου 2002—στην επέτειο ενός έτους από τις επιθέσεις της 11ης Σεπτεμβρίου. Η γέννησή του έφερε χαρά και ελπίδα στη μητέρα του.

      «Την πρώτη φορά που τον είδα με συνεπήρε πόσο όμορφος ήταν. Είχε ένα κοντό στέμμα με θολά μαλλιά που σηκώθηκε από το κεφάλι του. Για μένα, ήταν σύμβολο ελπίδας και αναγέννησης στον απόηχο της τραγωδίας που αντιμετώπισε το έθνος μας μετά τις τρομοκρατικές επιθέσεις μόλις ένα χρόνο πριν», είπε η Ρος.

      Προς απογοήτευσή της, την επομένη της γέννησης του Κάμραν, ο Ρος παρατήρησε ότι δυσκολευόταν να θηλάσει. Λίγους μήνες αργότερα, συνειδητοποίησε ότι πολλά από τα θεμελιώδη στοιχεία (fundamental milestones) της ανάπτυξής του δεν είχαν εκπληρωθεί: «να γυρίζει, να σέρνεται, να μιλάει, να περπατά… όλα καθυστέρησαν πολύ».

      Epoch Times Photo
      Μωρό Καμράν. (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )
      Epoch Times Photo
      H Ρος με το μωρό Κάμραν. (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )

      Τελικά, η Ross πήγε τον γιο της στο Νοσοκομείο Παίδων του Σινσινάτι και μετά από μια σειρά εξετάσεων, το μόνο πράγμα που της έδωσαν ήταν η διάγνωση ότι το παιδί είχε «αναπτυξιακή καθυστέρηση με βάση τον εγκέφαλο».

      Αν και η Ρος δεν καταλάβαινε τι ακριβώς είχε ο γιος της, ήξερε ότι ο Κάμραν αντιμετώπιζε προκλήσεις που δεν είχαν τα άλλα παιδιά της. Η καθυστέρησή του ήταν εμφανής σε καθημερινή βάση. Για παράδειγμα, πάλεψε να μάθει να περπατάει. Στη συνέχεια, μόλις πέτυχε αυτό το κατόρθωμα, παρατήρησε καθυστερήσεις αλλού.

      «Οι αδρές ​​και λεπτές του κινητικές δεξιότητες δεν αναπτύχθηκαν», θυμάται. «Δυσκολεύτηκε πολύ να διαχειριστεί τον εαυτό του στο διάστημα, έτσι τα γυμναστήρια στη ζούγκλα της πόλης ήταν ιδιαίτερα δύσκολα. Δεν ήξερε πώς να τοποθετήσει τα χέρια και τα πόδια του για να μπορεί να σκαρφαλώσει.

      «Δεν ήξερε πώς να ντυθεί ή να τραφεί. Δυσκολευόταν να μιλήσει και απογοητευόταν τόσο πολύ με όλο αυτό που έβγαζε θυμό. Όλα ήταν ένα βουνό που έπρεπε να ξεπεραστεί».

      Epoch Times Photo
      Ο Κάμραν σε ένα από τα μαθήματα θεραπείας (ειδικής αγωγής). (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )

      Η Ρος βοήθησε τον βοσκό Κάμραν να περάσει τα βουνά δυσκολίας του όσο καλύτερα μπορούσε, λαμβάνοντας βοήθεια από την εγγραφή του στη σωματική άσκηση, την λογοπαιδεία και την εργοθεραπεία. Ο Καμράν φοίτησε στο νηπιαγωγείο για δύο χρόνια και στη συνέχεια τοποθετήθηκε σε ένα Ανεξάρτητο Εκπαιδευτικό Πρόγραμμα (ΕΕΠ) στο Νηπιαγωγείο.

      Στη συνέχεια, συνάντησε την κυρία Πάτον.

      Ήταν στο Meet the Teacher Night στο Fairfield Central Elementary School. Με την πρώτη ματιά, η Ρος ήταν ανήσυχη. Ελπίζοντας για έναν νεότερο δάσκαλο που θα μπορούσε να έχει την «υπομονή και την ανοχή για ένα αγόρι που είχε τόσα πολλά προβλήματα», η Ρος δεν ήταν σίγουρη ότι η κυρία Πάτον θα είχε την ενέργεια να αντιμετωπίσει τις προκλήσεις του Κάμραν. Όμως, οι υποθέσεις της Ρος αποδείχθηκαν πολύ εσφαλμένες.

      “Η κυρία, Πάτον ήταν ένα από τα καλύτερα πράγματα που μπορούσα να φανταστώ. Ήξερε πώς να τον χειριστεί: πώς να δείχνει σταθερότητα ενώ εξακολουθούσε να νοιάζεται, έστω κι αν  αποτύγχανε στις εντολές, έχοντας στο μυαλό της ότι το αγόρι μου ήταν ένα άτομο που χρειαζόταν λίγη περισσότερη καθοδήγηση», είπε η Ρος. «Κάτω από την ανατροφή της, ο Κάμραν ευδοκίμησε και απελευθερώθηκε από τους περιορισμούς αυτού του σωματικού κουκουλιού που τον περιέβαλε για να αναδυθεί αυτό το όμορφο πράγμα που του άρεσε να μαθαίνει και να μιλά για όλα όσα έμαθε».

      Epoch Times Photo
      Η κυρία Πάτον. (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )

      Η κυρία Πάτον εργάστηκε υπομονετικά και με προσήλωση με τον Κάμραν και ο καρπός της δουλειάς της άρχισε να φαίνεται. Ξαφνικά, ο Κάμραν είχε αυτοέλεγχο, λεκτική επικοινωνία και ευκολία στη μάθηση. Η μητέρα του τον κοίταξε με ευγνωμοσύνη καθώς μεταβαλλόταν από ένα άτομο ειδικής φροντίδας (ΑΕΦ) σε ένα Πρόγραμμα Χαρισματικών στην πέμπτη τάξη.

      «Η πρόοδος που είδα μου έδωσε ελπίδα. Μπόρεσε να ελέγχει καλύτερα τις απογοητεύσεις του, να διατυπώνει λεκτικά τα θέλω και τις ανάγκες του και να διαπρέψει σε ένα περιβάλλον που θα μπορούσε εύκολα να τον είχε απορρίψει. Με έκανε να νιώθω πολύ χαρούμενη που είδα ένα αγόρι που είχε ταλαιπωρηθεί τόσο πολύ να γίνεται τόσο έξυπνο και γεμάτο αυτοπεποίθηση», είπε η Ρος.

      Ο χρόνος που η κυρία Πάτον επένδυσε στη ζωή του Κάμραν έθεσε τα θεμέλια για την επιτυχία που βλέπει σήμερα ο Κάμραν.

      Η Ross, ο οποία είναι ξανά σε επαφή με την κυρία Patton μετά από τόσα χρόνια, λέει ότι ο Kamran εξακολουθεί να διαπρέπει στις σπουδές του, λατρεύει να μαθαίνει και έχει υποδειγματική μνήμη. Σε μια πρόσφατη καλοκαιρινή δουλειά, έδειξε ειλικρίνεια, σκληρή δουλειά και πίστη στην ομάδα του, όλα τα οποία θαύμαζε ο διευθυντής προσλήψεώς του. Ενώ εξακολουθεί να παλεύει με την κοινωνική αλληλεπίδραση κατά καιρούς, έχει την υποστήριξη της οικογένειάς του και ο Ross λέει «είναι ανοιχτός στο να μάθει να είναι καλύτερος κάθε μέρα».

      Epoch Times Photo
      Η κυρία Πάτον. (Ευγενική προσφορά της Tracy Ross )

      Οι άνθρωποι δεν προορίζονται να ζουν απομονωμένοι σε νησιά, λέει η Ross. Πιστώνει την επιτυχία του γιου της στις συνεισφορές πολλών στοργικών ανθρώπων που έδωσαν τον εαυτό τους για να βοηθήσουν τον Kamran να φτάσει τα επιτεύγματά του.

      «Ό,τι αξίζει να έχεις, πρέπει να δουλέψεις σκληρά για να το πετύχεις. Θυσίες έγιναν στο δρόμο ‘ωσπου να φτάσει προς το σημείο που βρίσκεται σήμερα ο Καμράν, θυσίες χρόνου, χρημάτων και ενέργειας έγιναν από εμένα, τον πατέρα του και τον ίδιο τον Καμράν. Θυσίες χρόνου έκαναν οι γονείς και οι στενοί μου φίλοι. Οι θυσίες του εαυτού μου έγιναν κυρία Πάτον», είπε η Ρος.

      Αυτή η θυσία είναι το σημάδι ενός αληθινού δασκάλου, ενός αληθινού ηγέτη. Η κυρία Πάτον έδωσε τον εαυτό της στην υπηρεσία προς όφελος ενός άλλου. Και ο Kamran είναι ζωντανή απόδειξη.

      «Οι δάσκαλοι είναι το μέλλον των παιδιών μας. Είναι μέσω της στοργικής καθοδήγησής τους που τα παιδιά μας συνεχίζουν, χρόνο με το χρόνο, στις σπουδές τους», είπε η περήφανη μαμά. «Οι δάσκαλοι δίνουν όλο τον εαυτό τους, συχνά χωρίς τις επαίνους που τους αξίζουν, γιατί οδηγούνται από αυτό που βρίσκεται στην καρδιά και την ψυχή τους. Δεν είναι «απλώς» δάσκαλοι . Είναι φροντιστές, προπονητές, σύμβουλοι, φίλοι, σωτήρες.

      «Είμαι ευλογημένος που ο Κάμραν είχε μια κυρία Πάτον στη ζωή του. Είναι ευχή μου να το έχει αυτό κάθε παιδί».

      Μοιραστείτε τις ιστορίες σας μαζί μας στο emg.inspired@epochtimes.com και συνεχίστε να λαμβάνετε την καθημερινή σας δόση έμπνευσης με την εγγραφή σας στο ενημερωτικό δελτίο Bright στο TheEpochTimes.com/newsletter